广东省科技计划工业攻关项目(2007B031003005)
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
- 相关作者：陈建庭汤勇智肖文德徐俊昌李涛更多>>
- 相关机构：南方医科大学南方医院广东海洋大学广州市第一人民医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 新型活性修饰对聚乳酸组织工程骨支架上种子细胞生物学行为的影响
- 2011年
- 目的探讨氨等离子体改性、酰胺键接枝甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(GRGDS)短肽的活性修饰方法对消旋聚乳酸(PDLLA)组织工程骨上慢病毒转染红色荧光蛋白的骨髓间充质干细胞生物学行为的影响。方法制备圆片状直径8 mm、厚1 mm的PDLLA三维多孔支架,分为3组:表面氨基化PDLLA(A组),接枝肽A/PDLLA(PA组),以未经处理的PDLLA(P组)作为对照组。CyQuant NF和AlamarBlue分别检测支架上细胞的增殖和代谢活性;钙黄绿素进行矿化荧光染色,荧光显微镜观察支架上钙盐沉积以及RFP-BMSCs的贴附与增殖;扫描电镜观察细胞的贴附。结果接种细胞后各时间点,3组材料上细胞均能增殖,组间细胞数量差别均有统计学意义(P<0.001),PA组>A组>P组。除第10天(P=0.077)和第12天(P=0.491)PA组和A组间细胞数量差异无统计学意义外,其余各时间点,PA组数量均明显高于A组。随着时间的延长,两组间细胞数量逐渐接近。细胞代谢活性检测与增殖检测结果近似,骨支架上细胞增殖程度越高,其代谢越活跃。荧光显微镜观察,A组和PA组材料上RFP-BMSCs较P组增殖活跃;钙盐沉积荧光染色显示,第14天和第21天,绿色荧光强度PA组>A组>P组。扫描电镜显示,PA组材料能获得较A组更好的细胞贴附,P组细胞较稀疏。结论氨等离子体改性接枝GRGDS肽的新型活性修饰PDLLA骨支架,能明显促进RFP-BMSCs为种子细胞的贴附、增殖、代谢与矿化。
- 许子星陈建庭李涛查丁胜张鑫鑫姜晓锐肖文德朱青安
- 关键词：消旋聚乳酸仿生材料骨组织工程细胞生物学
- 缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的细胞相容性研究被引量：8
- 2011年
- 目的探讨缓释血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的细胞相容性。方法将MC3T3-E1细胞分别接种缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架(实验组)、纳米珍珠层/聚乳酸支架(对照1组)和聚乳酸支架(对照2组),单纯细胞培养为空白对照组。倒置相差显微镜、扫描电镜观察细胞生长情况,MMT法检测细胞增殖功能,碱性磷酸酶(ALP)测定了解细胞成骨分化情况。结果细胞在新型支架上粘附生长良好。各组MTT和ALP值随培养时间延长而增大,各时间点实验组均高于其他三组,差异有统计学意义(P<0.05)。结论缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架具有良好的细胞相容性,是一种理想的骨组织工程支架材料。
- 肖文德陈建庭徐准郑帅姜杰饶敏杰
- 关键词：血小板衍生生长因子BB珍珠层消旋聚乳酸纤维蛋白胶细胞相容性
- 缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架生物安全性评价被引量：4
- 2013年
- 目的探讨缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的生物安全性,为临床应用提供理论依据。方法采用支架材料浸取液进行急性毒性试验、皮内刺激试验以及热原实验,根据实验数据评价其安全性;同时采用皮下置入试验,观察其对周围组织的反应,对复合材料组织相容性进行评价。结果该支架材料无毒性作用,不引起皮内刺激反应,不具有致热原作用;皮下置入试验术后病理组织学切片证实该材料置入兔体内后炎性细胞反应逐渐减轻,材料周围组织纤维囊壁逐渐变薄。结论缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架具备良好的生物安全性和组织相容性,符合作为骨组织工程材料的基本条件。
- 肖文德郭东明温世锋梁英杰芦虎王岳桂陈建庭
- 关键词：血小板衍生生长因子BB珍珠层消旋聚乳酸纤维蛋白胶生物安全性
- 纳米珍珠层人工骨的制备被引量：7
- 2008年
- 目的探讨纳米珍珠层人工骨在原有珍珠层人工骨基础上的改进,所带来的性能变化及其应用的合理性。方法采用机械研磨法制得纳米级珍珠层粉,与消旋聚乳酸复合,制成中空圆柱体人工骨,与同法制作的微米级珍珠层粉/消旋聚乳酸复合实心圆柱体人工骨进行对比分析,观察在原材料粒径、人工骨孔径、孔隙率、生物力学特性等方面的差异。结果通过电镜观察,发现纳米级珍珠层粉的平均粒径为(50.4±12.4)nm,所制得的复合人工骨孔径平均为(215.7±77.5)μm,普通微米级珍珠层粉的平均粒径为(5.0±3.0)μm,所制得的复合人工骨孔径平均为(205.1±72.0)μm;采用比重法测得纳米级和微米级人工骨的孔隙率分别是(65.4±2.9)%和(53.4±2.2)%。生物力学测试结果为纳米级人工骨与微米级人工骨在抗压强度和弹性模量方无显著差异,而前者的抗折弯强度低于后者。结论纳米珍珠层人工骨原材料粒径小,有利于吸收降解,而且设计更合理,具有良好的孔径、孔隙率和力学特性,是一种有发展前景的骨组织工程材料。
- 陈建庭汤勇智张建刚王建钧肖颖
- 关键词：纳米珍珠层人工骨消旋聚乳酸
- 纳米珍珠层粉的降解实验及其复合人工骨的生物相容性研究被引量：18
- 2009年
- [目的]研究纳米珍珠层粉的体内降解情况,及其所制得的复合人工骨的生物相容性。[方法]机械研磨法制得的纳米珍珠层粉及其与消旋聚乳酸复合制得的人工骨,分别植入大鼠股骨骨洞及股部肌囊,同时与微米珍珠层粉及其人工骨作对照,并建立空白对照。于术后当天及第2、4、8周分别作X线片检查,动物处死前予四环素注射活体荧光标记,处死后行大体、组织学及扫描电镜观察。[结果]各检查结果显示纳米组较微米组降解更快,骨缺损愈合也最快;2种材料制得的复合人工骨均与周围组织结合良好。[结论]纳米珍珠层粉在动物体内的降解速度较微米级的快,可促进新生骨的生长;纳米珍珠层人工骨生物相容性好,是更好的生物活性可降解材料。
- 汤勇智陈建庭赵成毅徐俊昌
- 关键词：珍珠层粉降解复合人工骨生物相容性
- 纳米珍珠层人工骨构建骨诱导型组织工程化骨治疗犬股骨头坏死被引量：3
- 2010年
- 背景:将生长因子和少量自体骨髓与支架材料复合构成诱导型组织工程化骨,省略了分离及体外培养细胞的步骤和费用,防止了相关的污染和细胞性状改变等,是一种现阶段较为可行的诱导骨组织再生的方法。目的:探讨纳米珍珠层人工骨作为骨形态发生蛋白和自体骨髓载体的可行性,以及其构建的诱导型组织工程化骨治疗股骨头坏死的疗效。方法:健康成年杂种犬建立股骨头坏死模型,分别给予髓芯减压结合植入纳米珍珠层人工骨治疗,单纯髓芯减压治疗。术后4、12周分批处死动物行影像学、生物力学及组织学检查。结果与结论:纳米珍珠层人工骨组的抗压强度高于髓芯减压组和坏死组(P=0.000),纳米珍珠层人工骨组新骨形成明显,表现为软骨内化骨;髓芯减压组未见新骨形成,仅纤维组织填充减压区。结果提示纳米珍珠层人工骨可以作为骨形态发生蛋白和自体骨髓的载体,其构建的诱导型组织工程化骨可改善股骨头抗压强度,促进新骨形成和进行坏死修复。
- 肖颖陈建庭王锐英汤勇智徐俊昌
- 关键词：股骨头缺血性坏死
- 缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的制备被引量：8
- 2011年
- [目的]探讨缓释血小板衍生生长因子BB(PDGF-BB)的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架的制备方法及其性能。[方法]采用溶剂浇铸-粒子沥滤法制备聚乳酸支架(S1)和纳米珍珠层/聚乳酸支架(S2),接着将PDGF-BB与纤维蛋白胶混合注入S2,冷冻干燥后制成缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架(S3)。3种支架通过万能测试机测试抗压强度、扫描电子显微镜观察表面形貌以及阿基米德法测定孔隙率;利用ELISA法检测S3降解过程中PDGF-BB释放量。[结果]3种支架材料均具有良好的三维多孔结构,孔径分别为(330.0±55.6)μm、(322.5±50.8)μm和(303.3±47.0)μm,差异无统计学意义(P>0.05);孔隙率分别为81.0%±1.1%、82.5%±0.8%和80.2%±0.7%,差异无统计学意义(P>0.05);抗压强度分别为(3.6±0.12)MPa、(5.0±0.35)MPa和(5.1±0.26)MPa,S1与S2和S3有显著性差异(P<0.01)。ELISA实验结果表明支架中复合的PDGF-BB释放长达30 d,呈持续缓慢释放。[结论]缓释PDGF-BB的纳米珍珠层/聚乳酸/纤维蛋白胶复合支架为三维多孔结构,具有较好的力学性能,持续缓慢释放PDGF-BB,有望成为一种理想的骨组织工程支架材料。
- 肖文德陈建庭张建刚黄志平徐准郑帅
- 关键词：血小板衍生生长因子BB珍珠层消旋聚乳酸纤维蛋白胶
- 新型活性修饰聚乳酸组织工程骨的体外成骨研究被引量：3
- 2011年
- [目的]探讨氨等离子体改性、酰胺键接枝甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(GRGDS)短肽的活性修饰方法对消旋聚乳酸(PDLLA)组织工程骨体外成骨能力的影响。[方法]制备圆片状直径8 mm、厚1 mm的PDLLA三维多孔支架,分为三组:表面氨基化PDLLA(aminated PDLLA,A/PDLLA,A组),接枝肽A/PDLLA(peptides conjugated A/PDLLA,PA/PDLLA,PA组),以未经处理的PDLLA(P组)作为对照组。实时荧光定量聚合酶链式反应(RT-qPCR)检测各组材料上骨髓间充质干细胞(BMSCs)、骨钙素(OCN)、Ⅰ型胶原(Col-Ⅰ)、碱性磷酸酶(ALP)、骨形态发生蛋白-2(Bmp-2)和骨桥蛋白(OPN)mRNA的表达变化并进行ALP活性测定和钙黄绿素矿化荧光染色。[结果]qPCR结果示:第3 d,PA组各基因表达倍数均较P组高;除OCN外的各基因表达也均较A组高。第7 d,A组OCN(13.13±1.28)、Col-Ⅰ(23.71±6.51)和OPN(27.4±7.17)mRNA表达倍数为最高,PA组次之。第14 d,多数基因表达上调,A组和PA组表达倍数较对照组明显增高。PA组OCN(49.21±7.03)、ALP(24.26±3.41)和BMP-2(11.82±2.38)mRNA的表达较A组高,差异有统计学意义(P<0.05)。ALP活性检测结果示:A组和PA组ALP活性持续升高,P组活性第21 d较第14 d时略有下降。第7 d,A组和PA组之间ALP活性比较无统计学意义(P>0.05),但均高于P组(P<0.01);第14 d和第21 d,三组间ALP活性两两比较均有统计学意义,ALP活性PA组>A组>P组。钙黄绿素矿化荧光染色观察示,骨支架上钙盐沉积与ALP的活性变化趋势相平行。[结论]氨等离子体改性能够促进聚乳酸组织工程骨支架上BMSCs早期向成骨细胞分化,改性后接枝GRGDS肽的新型活性修饰PDLLA具有更好的促BMSCs体外成骨能力。
- 许子星陈建庭张鑫鑫姜晓锐李方国李涛查丁胜刘富强巫松辉朱青安
- 关键词：消旋聚乳酸仿生材料骨组织工程
- 纳米珍珠层人工骨修复兔桡骨缺损的实验研究被引量：3
- 2009年
- 目的探讨纳米珍珠层人工骨(NNAB)在动物体内的生物相容性、成骨作用及降解情况。方法将NNAB植入新西兰白兔1.5 cm的桡骨缺损内,同时与微米珍珠层人工骨(MNAB)作对照,并设立空白对照。分别于术后当天及4,8,16,24周作X线、骨密度测量,动物处死前予四环素注射活体荧光标记,然后动物取材作大体及组织学检查。结果NNAB植入动物体内后显示与组织相容性良好,各项检查结果均显示NNAB的骨化及降解能力均优于MNAB。NNAB植入区愈合较好,MNAB植入区次之,空白对照组骨缺损未愈合。结论NNAB是一种良好的骨替代材料,具备骨诱导和骨传导能力,可在体内生物降解。
- 汤勇智陈建庭徐俊昌赵成毅钟招明
- 关键词：珍珠层人工骨桡骨缺损
- 氨等离子体锚定短肽的消旋聚乳酸骨支架研究被引量：3
- 2010年
- 目的运用氨等离子体辅助接枝技术,在消旋聚乳酸(poly-D,L-lactide acid,PDLLA)表面以酰胺键接枝甘氨酸-精氨酸-甘氨酸-天冬氨酸-丝氨酸(Gly-Arg-Gly-Asp-Ser,GRGDS)短肽,探讨制备活性骨替代材料的可行性。方法使用溶剂浇铸/颗粒沥析法制备圆片状直径8mm、厚1mm的PDLLA三维骨支架,行氨等离子体改性处理制备表面氨基化PDLLA(aminated PDLLA,A/PDLLA),测量未改性(0min对照组)及改性5、10、20min组支架的孔径、孔隙率和表面水接触角。以上各组A/PDLLA放入1mg/mLFITC标记的GRGDS肽溶液[1-(3-二甲基氨基丙基)-3-乙基碳化二亚胺盐酸盐、N-羟基琥珀酰亚胺、活性肽的摩尔比值为1.5:1.5:1.0],室温下低速震荡24h行表面接枝处理,得到接枝肽处理材料(peptides conjugated A/PDLLA,PA/PDLLA)。对未改性(0min对照组)、改性5、10、20min及其后接枝肽处理的材料行X射线光电子能谱(X-rayphotoelectron spectroscopy,XPS)仪检测;对PDLLA和改性0、5、10、20min后接枝肽处理的材料行激光共聚焦显微镜观察及高效液相色谱(high performance liquid chromatography,HPLC)定量分析。全骨髓贴壁法分离、培养SD大鼠BMSCs,取第3～6代细胞接种于以下3组材料:20min氨等离子体改性组(A/PDLLA组)、20min氨等离子体改性后接枝肽组(PA/PDLLA组)及未经处理的PDLLA对照组(PDLLA组)。各组BMSCs-材料复合物培养16h后测定细胞上架数及上架率;培养4、8d行扫描电镜观察。结果 PDLLA孔径和孔隙率不随氨等离子体改性时间变化而变化(P>0.05)。随着氨等离子体改性时间延长,A/PDLLA支架表面水接触角逐渐减小,材料亲水性能逐步改善,各组间比较差异均有统计学意义(P<0.001)。XPS检测示,A/PDLLA支架表面出现N元素,且随改性时间延长,N1s峰渐趋明显,N/C逐渐加大;PA/PDLLA支架N/C相应加大,表面出现S2p峰。激光共聚焦显微镜观察示PA/PDLLA支架荧光强度随改性时间延长而明显增强。HPLC成功测得经10
- 许子星陈建庭尹诗衡朱青安李涛查丁胜姜晓锐张鑫鑫
- 关键词：骨组织工程消旋聚乳酸活性肽
