国家教育部博士点基金(20104321110002)
- 作品数：4 被引量：34H指数：3
- 相关作者：李志辉张冬林杨模华丁贵杰史昆更多>>
- 相关机构：中南林业科技大学贵州大学更多>>
- 发文基金：国家教育部博士点基金湖南省自然科学基金国家高技术研究发展计划更多>>
- 相关领域：农业科学更多>>
- 马尾松幼胚体细胞胚胎发生研究被引量：20
- 2011年
- 本论文首次报道了马尾松（Pinus massoniana Lamb.）幼胚体细胞胚胎发生的完整发育过程,并对影响马尾松胚性愈伤组织诱导的因素如球果采种期、球果冷藏处理时间、外植体处理方式等进行了探讨,统计胚性愈伤组织诱导率,进行增殖评价,探讨ABA浓度梯度对马尾松体细胞胚分化成熟的影响,试验数据用SPSS16统计分析软件进行方差分析、差异显著性检验。结果表明：1）2008~2009连续2年内15个采种期得到的幼胚,胚性愈伤组织诱导和增殖有显著性差异,最适宜的马尾松球果采种期是6月下旬至7月下旬,诱导率在9.66%~22.59%之间;2）球果冷藏处理时间,对胚性愈伤组织诱导有显著性差异,其中4℃冷藏球果15d有利于幼胚胚性愈伤组织诱导;3）雌配子体包含幼胚的接种处理方式是可取的;4）胚性愈伤组织经稳定增殖培养后,转入分化成熟培养基,得到体细胞胚状体＂爆发式＂分化成熟,数量多,质量好。适宜体胚成熟转化的培养基为：成熟LP培养基添加ABA5.0mg·L-1＋60.0g·L-1蔗糖,并附加L-谷氨酰胺和水解酪蛋白;5）成熟体细胞胚在无激素萌发型LP培养基上正常萌发,并转化为结构完整的小植株。本研究首次建立了马尾松幼胚体细胞胚胎发生技术平台,为马尾松遗传改良种质创新、缩短育种周期奠定了研究基础。
- 杨模华张冬林李志辉靳小翠丁贵杰
- 关键词：森林培育学马尾松幼胚体细胞胚胎发生胚性愈伤组织胚状体
- 蔗糖与肌醇对马尾松胚性细胞系增殖的影响被引量：3
- 2014年
- 针对马尾松胚性细胞系增殖困难的问题,本研究设定了2因素3水平的处理,分析了增殖培养基中蔗糖与肌醇对马尾松胚性细胞系增殖的影响。研究结果表明,胚性培养物的增殖倍数在9个处理间存在极显著性差异(P<0.01),并初步选出马尾松胚性细胞系增殖倍数较高的3个培养基:5号(蔗糖20 g·L-1+肌醇1.0 g·L-1)、7号(蔗糖30 g·L-1+肌醇0.1 g·L-1)和8号(蔗糖30 g·L-1+肌醇1.0 g·L-1)。胚性细胞在以上3个培养基具有不同分化发育反应,其中培养基5号中,培养基胚性细胞发育较慢;培养基7号中,胚性细胞发育较快且能形成具有完整结构的正常早期体细胞胚;在培养基8号中,胚性细胞易分化形成结构不完整、形态不正常的早期体细胞胚。综合考虑胚性细胞系增殖倍数与胚性细胞分化发育两方面的因素,在增殖培养基中添加蔗糖30 g·L-1和肌醇0.1 g·L-1的组合更适合马尾松胚性细胞系的增殖。
- 史昆杨模华李志辉张冬林丁贵杰
- 关键词：马尾松胚性细胞系蔗糖肌醇增殖
- 外植体采集时期与冷藏处理对马尾松愈伤组织诱导的影响被引量：6
- 2013年
- 马尾松(Pinus massoniana)无性繁殖困难,研究常采用体细胞胚胎发生和器官发生的方式繁殖,外植体采集时期是实验成功的关键。本实验采用2011年10月至2012年10月期间(每周或每两周采集1次)采集的马尾松枝梢顶端分生组织为外植体,并将外植体置于4℃冰箱冷藏做不同冷藏时间处理(4～114天)。处理后的外植体接种在添加不同激素浓度的改良GD培养基中,24～25℃条件下暗培养。实验结果表明:冷藏时间对马尾松愈伤组织诱导没有显著影响;2012年3月中旬至4月底采集的马尾松外植体,愈伤组织诱导率最高达89.8%,其平均诱导率达到80%以上;外植体经流水冲洗2～3 h、75%的酒精处理20～30 s、0.1%的升汞处理9～10 min并去除鳞片和针叶,能有效降低外植体污染率;外植体经流水冲洗2～3 h、去除鳞片和针叶后切成长约0.2～0.5 cm的薄片后接种,能大大降低培养过程中外植体的褐化率。
- 伊书亮张冬林杨模华李志辉王茜史昆
- 关键词：马尾松愈伤组织冷藏处理
- 马尾松胚性细胞悬浮增殖培养体系的建立被引量：11
- 2014年
- 本研究利用马尾松未成熟胚诱导的胚性愈伤组织,首次建立马尾松胚性愈伤组织悬浮增殖培养体系。实验中定期对细胞生长参数沉淀细胞体积（SCV）、细胞活力进行了测定,研究了初始接种量,继代细胞密度对悬浮增殖培养体系建立的影响。研究结果表明：不同初始接种量、继代转接细胞密度显著地影响马尾松胚性细胞悬浮培养的效果;在悬浮培育过程中,胚性细胞的生长周期曲线呈＂S＂型,细胞活力呈现先急剧上升,后缓慢下降的趋势;本研究建立的马尾松胚性细胞悬浮增殖培养体系为：在30 mL的培养基中,初始接种1.0 g胚性细胞（平均增殖系数达12.097）,继代培育以1/6作为继代细胞密度,且继代周期为8～12 d为宜。本研究为优化调控马尾松体细胞胚胎发生胚性愈伤组织稳定增殖提供了技术支撑,同时为采用遗传转化及细胞融合等技术进行马尾松新品种选育奠定了研究基础。
- 史昆杨模华李志辉张冬林王茜丁贵杰
- 关键词：生物技术马尾松胚性细胞
