中国博士后科学基金(20070420077)
- 作品数：6 被引量：38H指数：6
- 相关作者：刘洪臣贺慧霞王东胜鄂玲玲曹均凯更多>>
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- 矿化液促进犬牙周膜细胞异位成骨实验被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨矿化液对犬牙周膜细胞(PDLCs)体外诱导分化、体内成骨作用的影响。方法:酶消化法原代培养成年犬前磨牙PDLCs并鉴定。再以含地塞米松、β-甘油磷酸钠和抗坏血酸的矿化液连续诱导PDLCs,观察细胞形态变化,检测骨涎蛋白(BSP)表达碱性磷酸酶(ALP)活性。将诱导14d的细胞接种于钠米羟基磷灰石-胶原-聚乳酸复合支架(nHAC/PLA)上,体外培养5d后植入犬自体皮下,8W取材HE、三色法染色评价骨形成情况。以未诱导细胞为对照。结果:PDLCs波形丝蛋白(VIM)表达阳性,角蛋白(CK)阴性。矿化诱导后强阳性表达BSP,ALP活性也显著升高,提示细胞向成骨样细胞分化。体内移植8W,组织学见对照组主要形成纤维样组织而诱导组形成大量骨样组织。结论:矿化液具有促进PDLCs体外向成骨细胞分化和体内成骨作用。
- 贺慧霞刘洪臣王东胜鄂玲玲马军利苏方
- 关键词：矿化液牙周膜细胞细胞分化成骨
- 牙周膜干细胞的表型分析被引量：7
- 2011年
- 目的:分析人牙周膜干细胞(PDLSCs)的表型特点,为分离、鉴定和应用PDLSCs提供有效途径。方法:采用免疫磁珠法分离PDLSCs,制备细胞爬片。分别采用免疫荧光、免疫细胞化学染色法检测PDLSCs表面蛋白STRO-1、CD44、Vimentin、CK、COL-I、BSP的表达。收集PDLSCs,采用RT-PCR法检测PDLSCs Scleraxis mRNA、ColⅠ及CAP mRNA的表达情况。结果:PDLSCs表达间充质干细胞表面标志STRO-1、CD44,强阳性表达间充质来源细胞表面蛋白Vimentin,弱表达Col-I,不表达上皮细胞标志蛋白CK、成骨细胞相对特异性蛋白BSP。RT-PCR也显示PDLSCs表达韧带组织特异性基因Scleraxis和Col-I,不表达成牙骨质细胞特异性蛋白CAP。结论:本实验所分离的PDLSCs具有间充质来源的、牙周组织特异性的、未分化细胞的表型特点,该特点可作为PDLSCs分离和鉴定的重要依据。
- 贺慧霞刘洪臣王东胜鄂玲玲马攀
- 关键词：牙周膜干细胞表型间充质
- 牙周膜干细胞向成骨细胞方向分化实验被引量：6
- 2011年
- 目的:探讨人牙周膜干细胞(Periodontalligament stem cell,PDLSCs)向成骨细胞定向分化潜能,从细胞、分子和基因水平分析矿化诱导过程中细胞形态、功能变化。方法:将免疫磁珠分离的人PDLSCs矿化诱导,通过倒置显微镜观察诱导细胞形态变化,ELISA法检测诱导细胞碱性磷酸酶活性(ALPase)、RT-PCR、Western blot及免疫化学染色分析其成骨相关基因、蛋白表达变化,茜素红染色法检测其矿化结节形成情况来诱导细胞做对照。结果:矿化诱导14d,细胞形态呈成骨样短突起、多角形改变,诱导7d、14d ALPase活性显著增强。21d,诱导细胞高丰度表达骨桥素(OPN)、骨钙素(OCN)、牙骨质附着蛋白(CAP)及I型胶原(COLⅠ)mRNA,而对照组只有COLⅠmRNA弱表达。同时,Western blot及免疫化学染色均显示诱导细胞分泌骨涎蛋白(BSP)。21d,仅诱导组形成大量矿化结节。结论:人PDLSCs在矿化液诱导下可向成骨细胞分化,具有成骨细胞的形态、表型和功能特点,有望成为牙周及种植体周围骨缺损修复再生的理想的种子细胞。
- 贺慧霞刘洪臣郭宏杨洋刘一涵王东胜鄂玲玲
- 关键词：牙周膜干细胞成骨矿化液
- 牙周膜干细胞向脂肪细胞方向定向诱导分化实验被引量：11
- 2010年
- 目的探讨人牙周膜干细胞(PDLSCs)向脂肪细胞定向分化潜能,分析其分化过程中形态与功能变化。方法免疫磁珠法分离人PDLSCs,用成脂诱导液连续诱导21d,通过倒置显微镜、透射电镜、流式细胞仪、RT-PCR、Westernblot及免疫荧光方法观察诱导细胞形态、结构变化,分析其表面脂肪细胞特异性标志——低密度脂蛋白(LPL)和过氧化物酶体增殖物受体γ(PPAR-γ)的基因及蛋白表达时相及表达量,油红O染色检测脂滴分泌情况。结果诱导21d,诱导细胞呈脂肪细胞样圆形细胞,超微结构观察可见胞浆中大量脂肪细胞特征性脂滴。流式分析结果显示,有96.54%的PDLSCs向脂肪细胞分化。诱导细胞表达脂肪细胞特异性表面标志LPLmRNA和PPAR-γmRNA及PPAR-γ蛋白,且随诱导时间延长PPAR-γ蛋白表达量增加。诱导细胞产生油红O阳性染色的脂滴。结论人PDLSCs在适当条件下可定向分化为脂肪细胞样细胞,并具有脂肪细胞形态、结构和功能特点,具有可塑性。
- 贺慧霞刘洪臣王东胜曹均凯张海钟鄂玲玲
- 关键词：牙周膜干细胞分化脂肪细胞
- 人与犬牙周膜干细胞的生长特性比较被引量：9
- 2009年
- 目的:培养、分离人与犬牙周膜干细胞(PLSCs),比较其生长特性,为相关体内研究提供理论和实验依据。方法:采用免疫磁珠分选系统分别从原代培养的人与犬牙周膜细胞中分离PLSCs,通过倒置相差显微镜、细胞计数、集落形成检测、流式细胞仪等方法比较人与犬PLSCs的细胞形态、生长曲线、集落形成率(CFR)及STRO-1+表达情况。结果:人与犬PLSCs形态相似,均为梭形,生长曲线也都呈"S"形。但CFR人PLSCs显著高于犬PLSCs(P<0.05),而且人牙周膜中STRO-1+细胞的表达率高于犬牙周膜中STRO-1+细胞(P<0.05)。结论:STRO-1+免疫磁珠分选系统可用于分离人和犬PLSCs,所分离的两种PLSCs的形态和体外生长模式相似,但细胞亚群增殖能力和表型有差异。
- 贺慧霞刘洪臣王东胜鄂玲玲王照五师占平
- 关键词：牙周膜干细胞免疫磁珠分选
- 牙周膜干细胞生物学研究新进展被引量：7
- 2010年
- 牙周膜干细胞(periodontal ligament stem cell,PDLSC)是在干细胞理论和技术发展较为成熟的基础上提出的。PDLSCs具有分化形成牙槽骨、牙骨质和牙周膜的潜能,在牙周生理、病理和牙周病再生治疗中发挥极其重要的作用。对PDLSCs生物学的研究是解读这一系列事件的钥匙。本文就PDLSCs生物学作用、来源、组织学定位、分离和鉴定等方面研究的最新进展做一综述。
- 贺慧霞刘洪臣
- 关键词：牙周膜干细胞生物学
