国家自然科学基金(30500113)
- 作品数：2 被引量：1H指数：1
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- 相关机构：复旦大学中国科学院上海应用物理研究所中国科学院研究生院更多>>
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- 多波长反常散射法解析Sau3AI蛋白C端结构域晶体结构被引量：1
- 2008年
- 用同步辐射装置收集了Sau3AI的C端蛋白晶体在Se吸收边附近三个波长下的衍射数据,通过多波长反常散射(Multi-wavelength Anomalous Dispersion,MAD)法解决了晶体的衍射相位问题,解析了Sau3AI的C端蛋白的结构。结果表明,Sau3AI-C的结构与DNA错配修复蛋白MutH相似,结构中间的凹槽是Sau3AI-C与DNA的潜在结合区域。
- 徐春艳郁峰孙丽华唐琳胡小健何建华
- 关键词：晶体结构
- 限制性内切酶Sau3Al蛋白质的结晶研究
- ＜正＞限制性内切酶Sau3AI识别并酶切含GATC序列的DNA链,由于其对DNA的破坏性使得大量表达重组Sau3AI难以在大肠杆菌中实现。与有相同酶活性的其它蛋白质相比,Sau3AI对双链DNA识别位点GATC中的A的甲...
- 徐春艳宋佳平郁峰丁滪唐琳胡小健何建华张志鸿
- 文献传递
- 重组人血红素加氧酶2的表达、纯化及性质鉴定
- 2013年
- 血红素加氧酶是广泛存在于哺乳动物细胞中的一类氧化酶,催化血红素氧化生成胆绿素,同时生成三价铁离子和一氧化碳,对调节体内离子平衡,参与机体免疫反应及调节神经系统功能均有重要影响.血红素加氧酶2 （HMOX2）与血红素加氧酶1的功能相似,但分布不同且有着不同的反应动力学,但目前国内外对其研究较少.本文在获得HMOX2全长cDNA的基础上,将其克隆至高表达载体,通过自动诱导系统表达了人血红素加氧酶2重组蛋白（His10-HMOX2）.每升菌液通过Ni-NTA亲和层析和Mono Q阴离子交换层析纯化,最终约可获得92.6 mg纯度为92％蛋白质样品.通过酶活检测,其活性可达到69.51 u/mg,与已报道的血红素加氧酶活性相比较,我们得到的HMOX2具有与之相当的酶活性.同时,通过改变反应温度（20 ～ 95℃）,pH值（pH 6 ～9）等条件,检测了重组His10-HMOX2的催化活性,在温度为40℃和pH为8时,其活性最高.本研究为将来进一步深入了解HMOX2的生化功能及与相关疾病的关系奠定了基础.
- 周传文李益鹏丁澦
- 关键词：原核表达纯化酶活
