国家自然科学基金(30771993)
- 作品数：2 被引量：8H指数：1
- 相关作者：钟彦伟徐东平荆霞蔡炯陈丽更多>>
- 相关机构：解放军第302医院北京协和医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 噬菌体展示技术筛选甲型H1N1流感病毒抗原模拟表位的研究被引量：7
- 2010年
- 目的筛选特异性甲型H1N1流感病毒抗原模拟表位。方法应用噬菌体表面展示技术,以2009年甲型H1N1流感康复患者的血清作为固相筛选分子,对人工合成的噬菌体随机环七肽库进行3轮"吸附-洗脱-扩增"筛选。从顶部琼脂噬菌斑中随机挑取32个克隆至处于对数生长期的大肠埃希菌中培养,采用ELISA,交叉反应以及竞争抑制性实验筛选并鉴定阳性克隆,对阳性克隆进行DNA序列分析,对其编码的展示于噬菌体表面的氨基酸序列与流感病毒血凝素(HA)基因进行同源性比较,确定甲型H1N1流感病毒抗原的模拟表位。结果从随机挑选的32个克隆中得到12个阳性克隆,确定氨基酸序列PLHARLP为甲型H1N1流感病毒抗原的模拟表位,其表位由HA的第52,53,59,60,61,83,271位氨基酸共同构成。结论用噬菌体环七肽库筛选得到甲型H1N1流感病毒的模拟表位,为开展用流感病毒模拟表位探索新的流感防治方法奠定了基础。
- 蔡炯钟彦伟荆霞陈丽李方徐东平
- 关键词：流感流感病毒A型H1N1亚型表位细菌噬菌体
- 应用噬菌体表面展示技术筛选流感病毒H3N2抗原模拟表位被引量：1
- 2009年
- 目的筛选特异性流感病毒H3N2抗原模拟表位，为开展新的流感病毒疫苗研究探索新的途径。方法应用噬菌体表面展示技术，以抗．H3N2的单克隆抗体作为固相筛选分子，对人工合成的噬菌体随机肽库进行5轮“吸附-洗脱-扩增”的筛选过程，在第5轮筛选后，随机挑取48个克隆，经噬菌体酶联免疫吸附法（ELISA）鉴定并进行交叉反应实验以及竞争抑制性实验，最后对所选克隆进行DNA序列分析，以确定H3N2抗原的模拟表位。结果经噬菌体富集后，从随机筛选的48个克隆中得到21个阳性克隆，经ELISA鉴定及交叉反应实验、竞争抑制性实验后，确定氨基酸序列XTXPYXX为H3N2的模拟表位。结论用噬菌体7肽库筛选得到H3N2的模拟表位，为开展用流感病毒模拟表位探索新的防治方法研究奠定了基础。
- 钟彦伟徐东平李晓东戴久增许彪李乐
- 关键词：正黏病毒科表位肽库
