国家教育部博士点基金(20110204110015)
- 作品数：2 被引量：9H指数：1
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- 猪轮状病毒诱导猪小肠上皮细凋亡的研究
- 轮状病毒是威胁婴幼儿及幼畜生命的主要病原体。为了研究轮状病毒（Rotavirus）感染与小肠上皮细胞凋亡的关系,我们用猪轮状病毒AV55株感染猪小肠上皮细胞（SIEC-2）后进行了一系列与细胞凋亡相关指标的检测。TUNE...
- 王静张彦明林鸷高婉俊
- 关键词：猪轮状病毒
- 文献传递
- 猪轮状病毒NSP4的细胞定位及在细胞凋亡中的作用被引量：1
- 2015年
- 为研究猪轮状病毒非结构蛋白NSP4的细胞定位及其蛋白功能,将构建的重组质粒pNSP4-EGFP,pviroporin-EGFP和pEGFP-N1空载体质粒转染到SIEC02细胞株,通过与内质网定位蛋白的共聚焦分析、实时荧光定量PCR检测和Western blot分析,发现NSP4主要分布于内质网,少数定位于细胞核;NSP4蛋白可显著上调Bax基因水平(P<0.01)和caspase-3蛋白表达水平。说明猪轮状病毒NSP4蛋白具有类似viroporin的功能,主要定位于内质网上;NSP4依赖或部分依赖caspase的激活和Bax的活化促进细胞凋亡。
- 建琛瑶王静董望张彦明
- 关键词：猪轮状病毒非结构蛋白细胞凋亡NSP4
- 猪A组轮状病毒实时荧光定量PCR检测方法的建立被引量：8
- 2012年
- 本试验旨在建立一种检测猪A组轮状病毒的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法。参考GenBank上登录的猪轮状病毒OSU株的VP6基因序列保守区设计一对特异性引物,通过RT-PCR方法克隆目的基因,并将其连入pMD 19-T Vector,制备阳性标准品,优化反应条件。建立的方法在1.0×102～1.0×109拷贝/μL范围内线性关系良好,反应扩增效率大于90%,扩增相关系数大于0.98。对猪瘟病毒、猪繁殖与呼吸综合征病毒、猪传染性胃肠炎病毒及猪圆环病毒2型均检测不到荧光信号,表明该方法特异性强。该方法批内和批间变异系数均小于2%,重复性好。结果表明,建立的SYBR GreenⅠ实时荧光定量PCR方法可为A组猪轮状病毒早期感染的诊断及病毒定量分析提供技术支持。
- 高婉俊王静林鸷曹伟伟张彦明
- 关键词：A组轮状病毒SYBR实时荧光定量PCR
