湖北省自然科学基金(2007ABA186)
- 作品数：6 被引量：5H指数：2
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- 相关机构：武汉科技大学江汉大学华中科技大学更多>>
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- Survivin-siRNA在体外诱导Panc-1细胞凋亡的实验研究被引量：2
- 2008年
- 目的:探讨RNA干扰技术抑制Survivin对人胰癌细胞株Panc-1细胞凋亡的影响。方法:体外设计、合成针对sur-vivin基因的小分子干扰RNA(survivin-siRNA),应用脂质体介导survivin-siRNA转染Panc-1细胞后,MTT试验测定转染细胞的增殖抑制率,RT-PCR检测细胞survivin mRNA表达,琼脂糖凝胶电泳分析其对Panc-1细胞凋亡诱导作用。结果:转染survivin-siR-NA的Panc-1细胞增殖明显受抑制,与对照进行比较,具有显著性差异(P<0.01);经琼脂糖凝胶电泳,转染survivin-siRNA的Panc-1细胞可见到DNA梯形条带,而对照细胞未见到。结论:survivin-siRNA能够显著诱导Panc-1细胞凋亡。
- 邱文洪郭凯文宋文剑沈关心
- 关键词：SIRNA
- Survivin特异性siRNA增强人胰癌细胞株Panc-1对顺铂的敏感性
- 2008年
- 目的探讨Survivin特异性siRNA对人胰癌细胞株Panc-1顺铂敏感性的影响。方法体外将Survivin特异性siRNA表达载体pSurvivin-siRNA转染人胰癌细胞株Panc-1,应用RT-PCR、蛋白印迹法(Western blot)检测转染siRNA后Panc-1细胞Survivin基因和蛋白的表达变化,应用MTT法检测干扰Survivin后Panc-1细胞对顺铂敏感性的变化。结果转染Survivin特异性siRNA后,Panc-1细胞Survivin基因和蛋白的表达水平明显下降;顺铂对Panc-1细胞的半数抑制量从(11.9927±1.1470)μg/ml下降到(1.2382±0.0857)μg/ml,Panc-1细胞对顺铂的敏感性增加了9.69倍。结论Survivin特异性siRNA抑制Survivin表达,能增加人胰癌细胞株Panc-1对顺铂的敏感性。
- 邱文洪郭凯文宋文剑沈关心
- 关键词：SURVIVIN人胰腺癌顺铂
- β-半乳糖苷结合凝集素-9真核表达载体的构建和鉴定
- 2010年
- 目的:构建β-半乳糖苷结合凝集素-9的真核表达载体并鉴定。方法:通过DNA重组技术和PCR方法从人外周血单个核细胞克隆β-半乳糖苷结合凝集素-9基因,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性。结果:DNA测序和酶切鉴定证明β-半乳糖苷结合凝集素-9基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点。结论:成功构建β-半乳糖苷结合凝集素-9的真核表达载体pGal-9。
- 邱文洪吴丽娜叶梅许楚娟易路阳郭凯文
- 关键词：真核表达载体
- Survivin-siRNA增强人胰癌细胞株Panc-1对顺铂的敏感性被引量：1
- 2008年
- 目的探讨RNA干扰技术抑制survivin对人胰癌细胞株Panc-1细胞顺铂敏感性的影响。方法体外设计、合成针对survivin的小分子干扰RNA(siRNA),并转染人胰癌细胞株Panc-1,应用RT-PCR、蛋白印迹法(western blot)检测转染siRNA后Panc-1细胞survivin基因和蛋白的表达变化,应用MTT法检测干扰survivin后Panc-1细胞对顺铂敏感性的变化。结果转染针对survivin的siRNA后,Panc-1细胞survivin基因和蛋白的表达水平下降;转染survivin-siRNA后,Panc-1细胞对顺铂的半数抑制量从(11.9927±1.147)g/ml提高到(2.2049±0.0857)g/ml,Panc-1细胞对顺铂的敏感性增加了5.44倍。结论RNA干扰技术抑制Survivin能增加人胰癌细胞株Panc-1细胞对顺铂的敏感性。
- 邱文洪郭凯文宋文剑沈关心
- 关键词：人胰腺癌顺铂
- Survivin特异性siRNA诱导胰腺癌细胞凋亡的研究被引量：2
- 2008年
- 目的观察survivin特异性siRNA对胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖和凋亡的影响。方法体外构建Survivin特异性siRNA表达载体p-Survivin-siRNA,转染胰腺癌细胞株Panc-1细胞系,RT-PCR和Western印迹法检验其对胰腺癌细胞株Panc-1细胞的RNA干扰(RNAi)效果。采用MTT法分析其对细胞增殖的影响,流式细胞仪检测其对细胞周期的影响。同时,采用Western印迹法检测半胱氨蛋白酶3(caspase3)的表达变化。结果p-survivin-siRNA表达质粒高效而特异地剔降胰腺癌细胞株Panc-1细胞中survivin的表达,抑制肿瘤细胞增殖(P<0.01),阻断胰腺癌细胞株Panc-1细胞在G1期。随着survivin基因被沉默,caspase3表达升高(P<0.01)。结论靶向survivin基因的siRNA表达载体可以显著抑制胰腺癌细胞株Panc-1细胞增殖,促进细胞凋亡。
- 邱文洪郭凯文宋文剑沈关心
- 关键词：生存素SIRNA胰腺癌细胞凋亡
- ASAP3真核表达载体的构建和鉴定
- 2012年
- 目的:构建ASAP3的真核表达载体并鉴定。方法:通过DNA重组技术和PCR方法从人肝癌细胞株HepG2克隆ASAP3基因,插入真核表达载体pcDNA3.1(+)中,通过PCR、酶切及测序鉴定重组载体的正确性。结果:DNA测序和酶切鉴定证明ASAP3基因正确克隆至pcDNA3.1(+)的多克隆位点。结论:成功构建ASAP3的真核表达载体p ASAP3。
- 郭凯文邱文洪邓小月艾永循徐楚娟陈朝霞
- 关键词：肝细胞癌真核表达载体
