广东省自然科学基金(9151051501000083)
- 作品数：6 被引量：22H指数：3
- 相关作者：舒建昌陈莲香吕霞朱海燕何雅军更多>>
- 相关机构：暨南大学暨南大学附属第一医院南方医科大学南方医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 神经生长因子对肝星状细胞胶原分泌及形态学的影响被引量：6
- 2011年
- 目的:观察神经生长因子(NGF)对大鼠肝星状细胞(HSCs)胶原分泌功能和形态学的影响,探讨NGF抗肝纤维化的作用机制。方法:大鼠肝星状细胞株(HSCs-T6)经不同浓度NGF作用24 h后,ELISA法检测上清液中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量;通过倒置显微镜、吖啶橙染色及透射电镜观察形态学变化。结果:NGF作用HSCs24 h后培养上清中Ⅰ、Ⅲ型胶原的含量与对照组相比明显减少(P<0.05),但无剂量依赖性。倒置显微镜下可见细胞数目变少,细胞变小,形态向椭圆形或圆形改变;吖啶橙染色及透射电镜可以见到细胞凋亡的形态学变化。结论:NGF可抑制HSCs合成Ⅰ、Ⅲ型胶原,诱导HSCs凋亡,抑制HSCs胶原分泌,可能是NGF抗肝纤维化的作用机制。
- 舒建昌朱海燕吕霞何雅军陈莲香叶国荣
- 关键词：肝星状细胞胶原形态学神经生长因子
- 神经生长因子抑制肝星状细胞增殖的观察被引量：6
- 2012年
- 目的观察神经生长因子（NGF）对大鼠肝星状细胞（HSC）增殖的抑制作用，并探讨其作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC—T6，将HSC—T6与不同浓度NGF孵育后，用XTT比色法检测NGF对HSC增殖的影响，流式细胞术分析NGF对HSC细胞周期的影响，透射电镜观察经100ng／mlNGF作用24h后HSC形态学变化。结果（100、200、400）ng／ml浓度时NGF对HSC的抑制作用经XTT法测得爿值分别为0．66±0．03、0．69±0．03和0．66±0．03，与对照组（0．73±0．01）比较，差异具有统计学意义垆〈0．05），但无浓度依赖性垆〉0．05）。100、200、400ng／mlNGF作用于HSC24h后，G2期比例分别为14．83％±5．41％、14．73％±2．50％和14．87％±2．060／0，与对照组（7．47％±4．39％）比较，明显增加妒〈0．0S），透射电镜可以见到细胞凋亡的形态学变化。结论NGF可抑制HSC增殖，通过使HSC细胞周期停滞于G2期而抑制HSC增殖可能为其作用机制之一；经NGF作用的大鼠肝星状细胞可出现明显的增殖受抑、细胞凋亡的形态学改变。
- 何雅军朱海燕舒建昌吕霞陈莲香叶国荣
- 关键词：肝硬化神经生长因子细胞增殖肝星状细胞
- p75^NTR蛋白体外通过TrkA^NGFR／p75^NTR异源二聚体信号途径促进L02细胞增殖被引量：3
- 2012年
- 目的观察神经生长因子（NGF）及受体（TrkA^NGFR、P75^NTR）在肝细胞中的表达，探讨外源性P75^NTR蛋白对肝细胞的生物学作用。方法体外培养L02肝细胞，免疫细胞化学和荧光定量PCR法分别检测NGF、TrkA^NGFR、P75^NTR在L02细胞中的表达。XTT法检测外源性P75^NTR、NGF、NGF＋P75^NTR、抗TrkA^NGFR、抗P75^NTR对L02细胞增殖的作用。流式细胞术（膜联蛋白V／碘化丙啶）检测外源性P75^NTR对L02细胞凋亡的作用。流式细胞术（碘化丙啶）检测外源性P75^NTR对L02细胞周期的影响。结果P75^NTR促进L02细胞增殖，呈剂量依赖性。NGF和NGF＋P75^NTR组吸光度值（A）值分别为0．4916±0．0565和0．5839±0．0733，与阴性对照组比较差异有统计学意义（0．3601±0．0310，P〈0．05）；抗TrkA^NGFR A值为0．2689±0．0229，与阴性对照组比较差异有统计学意义（P=0．003）；抗P75^NTR A值为0．3524±0．0312，与阴性对照组比较差异无统计学意义（P=1．000）。外源性P75^NTR对L02细胞有抗凋亡趋势，加入100ng／mlP75^NTR抗凋亡作用最强，表达量为3．70±0．26，但与对照组比较差异无统计学意义（4．10±0．62，P=1．000）。P75^NTR作用于L02细胞周期的S期，呈剂量依赖性，呈倒置的U形曲线，浓度为100ng／ml时作用最强（25．60±0．40），与对照组比较差异有统计学意义（20．10±1．00，P=0．000）。外源性NGF、P75^NTR、NGF＋P75^NTR上调了L02细胞NGFmRNA、TrkA^NGFR mRNA、P75^NTR mRNA的基因表达，与对照组比较差异有统计学意义（P〈0．05）；抗TrkA^NGFR、抗P75^NTR对NGFmRNA、TrkA^NGFR mRNA、P75^NTR mRNA的基因表达无明显影响，与对照组比较差异无统计学意义（P〉0．05）。结论L02细胞表达NGF及受体TrkA^NGFR、P75^NTR，合适剂量的外源性P75^NTR可能通过TrkA^NGFR／P75^NTR异源二聚体信号途径促进L02细胞增殖。
- 李俊峰陈莲香吕霞舒建昌
- 关键词：神经组织蛋白质类
- 神经生长因子通过TrkA^(NGFR)信号途径促进肝细胞增殖被引量：3
- 2012年
- 目的:观察神经生长因子(NGF)及其受体(TrkANGFR和p75NTR)在肝细胞中的表达,探讨外源性神经生长因子β(NGF-β)对肝细胞的生物学作用。方法:体外培养L02肝细胞,免疫细胞化学和荧光定量PCR法分别检测NGF、TrkANGFR和p75NTR在L02细胞中的表达。XTT法检测外源性NGF-β、anti-NGF、anti-TrkANGFR和anti-p75NTR对L02细胞增殖的作用,流式细胞术检测外源性NGF-β对L02细胞凋亡和细胞周期的影响。结果:L02细胞表达NGF及其受体TrkANGFR、p75NTR,NGF主要位于细胞质和细胞核,TrkANGFR和p75NTR位于细胞质和细胞膜;外源性NGF-β上调L02细胞表达NGF和TrkANGFR。低剂量外源性NGF-β(12.5～200μg/L)通过调控L02细胞的S期,促进细胞增殖,抗细胞凋亡,高剂量(>400μg/L)NGF-β不能促进L02细胞增殖;anti-NGF和anti-TrkANGFR抑制NGF-β诱导的L02细胞增殖,anti-p75NTR并不影响NGF-β诱导的L02细胞增殖。结论:L02细胞表达NGF及其受体TrkANGFR、p75NTR;合适剂量外源性NGF-β可能通过NGF/TrkANGFR信号途径促进L02细胞增殖。
- 李俊峰舒建昌陈莲香朱海燕吕霞
- 关键词：神经生长因子L02细胞细胞增殖
- 神经生长因子诱导肝星状细胞凋亡及其相关机制的研究被引量：2
- 2012年
- 目的观察神经生长因子（nerve growthfactor，NGF）对大鼠肝星状细胞（hepatic stellatecell，HSC）凋亡的影响，并探讨其可能的作用机制。方法体外培养大鼠肝星状细胞株HSC—T6，将HSC—T6与100ng／mlNGF孵育24h后，流式细胞术检测细胞凋亡；细胞免疫化学法检测HSC中凋亡相关基因P^53、Bcl-2、Caspase-3蛋白表达的情况；免疫荧光法检测NGF、神经生长因子低亲和力受体p75NTR表达的情况。结果NGF作用HSC后凋亡率较对照组明显增高[（22．364±9．51）％VS（5．88±1．36）％，P〈0．05]。凋亡相关蛋白P^53、Caspase-3的阳性细胞百分率与对照组比较明显增高[（78．41±4．00）％、（39．26±1．57）％VS（34．96±3．84）％、（9．27±1．01）％，P〈0．05]，而Bcl-2表达实验组阳性细胞百分率较对照组降低[（18．12±1．38）％vs（91．53±2．98）％，P〈0．05]。NGF作用HSC后NGF表达增多（6．53±1．40vs1．77±0．17，P〈0．05），而p75NTR表达无明显变化（3．52±0．36VS4．24±0．38，P〉0．05）。结论NGF可能通过使凋亡相关基因p、Caspase-3表达上调、Bcl-2表达下调，而诱导HSC凋亡。NGF作用HSC后可作为始动因子和效应因子增加NGF的表达，而对p75NTR表达无影响。
- 舒建昌邓延梅朱海燕吕霞何雅军陈莲香叶国荣
- 芥菜籽对氧化偶氮甲烷诱导小鼠结直肠癌的影响被引量：7
- 2010年
- 背景与目的:结直肠癌是常见的恶性肿瘤之一,在我国发病率和死亡率呈不断上升趋势。文献报道芥菜籽具有抗肿瘤的活性,本研究旨在观察在氧化偶氮甲烷(azoxymethane,AOM)诱发昆明种小鼠发生结直肠癌的过程中,通过芥菜籽(mustard seed,MS)进行饮食干预能否预防肿瘤的发生。方法:选择6周龄昆明种雌性小鼠,随机分为AOM组、AOM+5%MS干预组、AOM+10%MS干预组和正常对照组。小鼠皮下注射AOM(10mg/kg体质量),每周1次,连续3周。32周时颈椎脱臼处死小鼠,分离结直肠,用预冷的0.9%NaCl溶液冲洗肠内容物。观察记录各组小鼠有无肿瘤发生及发生数目、大小和位置,计算肿瘤发生率。结果:正常对照组小鼠未发现肿瘤,AOM模型组小鼠结直肠肿瘤发生率为86.7%,5%MS干预组及10%MS干预组小鼠结直肠肿瘤发生率分别为60.0%和41.7%,与模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。AOM模型组小鼠荷瘤数为(2.2±1.2)个,而5%MS干预组和10%MS干预组小鼠荷瘤数分别为(1.1±1.1)个和(0.7±0.9)个,与AOM模型组相比差异均有统计学意义(P<0.05)。结论:通过芥菜籽饮食干预能够抑制AOM诱导的小鼠结直肠癌的发生发展,可进一步用于结直肠癌防治的研究。
- 袁海锋郭文朱明古陈楚第
- 关键词：氧化偶氮甲烷结直肠癌
