福建省自然科学基金(2008J04011)
- 作品数：7 被引量：20H指数：3
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- 甘草水通道蛋白PIP1基因正义和反义表达载体的构建被引量：1
- 2008年
- 〕根据已报道的GuPIP1基因序列设计特异引物,克隆甘草水通道蛋白GuPIP1基因cDNA序列,将该片段正向、反向分别插入植物表达载体pMBW 330的CaMV 35S启动子和OCS终止子之间,构建了正义、反义表达载体.通过双酶切、PCR和DNA测序鉴定后,分别导入农杆菌EHA105中.
- 王芳董乐黄周英
- 关键词：甘草水通道蛋白
- 蓬蘽叶中茶多酚的微波提取被引量：3
- 2009年
- 以蓬蘽叶为原料,采用乙醇作为提取溶剂,通过正交试验,探讨在微波辐射下微波功率、溶剂浓度、料液比、提取时间和提取级数对茶多酚提取率的影响,获得从蓬蘽叶中提取茶多酚的最佳工艺条件。结果表明,微波辅助法从蓬蘽叶中提取茶多酚的适宜工艺条件为:蓬蘽叶在40%乙醇溶液中料液比(W∶V)1∶10,提取功率320W,提取时间60s,微波浸提2次,此条件下茶多酚提取率为88.78%。
- 王芳董乐林娈
- 关键词：茶多酚微波辐射
- GuPIP1抗体的制备及其在GuPIP1组织定位上的应用
- 2009年
- 利用PCR技术,从甘草质膜水通道蛋白1(plasma membrane intrinsic protein1 from Glycyrrhiza uralensis Fisch,GuPIP1)的cDNA中扩增其保守区段(420bp),并将其构入pGEX-KG。酶切、测序分析表明,重组质粒pGEX-GuPIP1结构正确。IPTG诱导表达分子量约40kDa融合蛋白GST-GuPIP1,该蛋白质主要以非包涵体的形式存在于大肠杆菌中。诱导表达后的菌体超声裂解液经谷胱甘肽亲和层析纯化得到高纯度的GST-GuPIP1,以纯化的融合蛋白为抗原免疫兔子制备甘草质膜水通道蛋白的抗体。抗血清经过纯化后以酶联免疫吸附法(enzyme-linked immunosorbent assay,ELISA)和Western印迹检测抗体的效价和特异性。结果表明,抗体具有高的效价和特异性。免疫组织细胞化学定位表明,GuPIP1在胚根根尖的表皮细胞和根冠细胞中强烈表达。
- 王芳董乐袁建军
- 关键词：水通道蛋白抗体原核表达
- 福建插田泡果肉营养成分分析被引量：7
- 2009年
- [目的]探究福建插田泡果肉营养成分。[方法]以福建产插田泡果实为原料,对其总糖、果胶质、脂肪、酸度、粗蛋白、氨基酸等一般营养成分和超氧化物歧化酶(SOD)的含量进行分析。[结果]插田泡果肉鲜样维生素C含量丰富,SOD含量高达292.34μg/g(FW),另外,还含有丰富的糖类、蛋白质、有机酸、粗脂肪等营养成分。插田泡果实氨基酸含量为11.257 mg/g(DW),至少含有18种氨基酸,包括8种人体必需氨基酸。果肉鲜样中矿质元素含量丰富。[结论]插田泡果实有较高的营养价值,具有一定的开发利用潜力。
- 王芳
- 关键词：果肉营养成分
- 甘草水通道蛋白基因(GuPIP1)RNAi双元表达载体的构建及鉴定
- 2009年
- 植物水通道蛋白(Aquaporins,AQPs)是细胞膜上选择性高效转运水分子的特异蛋白孔道.本文根据植物中hpRNA(hairpin RNA)的原理,以甘草质膜水通道蛋白基因GuPIP1为靶基因,在GuPIP1-cDNA序列中选择378bp作为构建RNAi的序列,经三次亚克隆,最后形成含GuPIP1-hpRNAi表达盒的双元表达载体,并转入农杆菌EHA105.
- 王芳董乐戴聪杰
- 关键词：甘草水通道蛋白RNAI双元表达载体
- 甘草肌动蛋白基因GuActin2的克隆和表达分析被引量：9
- 2009年
- 以乌拉尔甘草根为材料,从中提取总RNA,根据植物肌动蛋白的5'和3'末端设计简并引物。采用RT-PCR技术和5'RACE试剂盒,从乌拉尔甘草根中克隆到一个肌动蛋白基因编码区全长cDNA序列(GenBank登录号GQ404511),长度为1137bp。该基因编码一个由377个氨基酸残基组成的蛋白质。甘草GuActin2具有肌动蛋白(YVGDEAQs.KRG和WISKgEYDE)和肌动蛋白类似物(LLTEApLNPkaNR)的特征信号序列。Northern blot分析表明,GuActin2在甘草的根、茎、叶组织中都有表达,在根中,尤其在胚根中的表达强于茎和叶中的表达。该基因属于营养型亚类。
- 王芳
- 关键词：肌动蛋白基因表达基因克隆乌拉尔甘草
- 桐花树多酚氧化酶同源基因片段的克隆及序列分析
- 2009年
- 以桐花树(Aegiceras corniculatum(L.)Blanco)叶为材料,采用同源PCR克隆策略,扩增桐花树多酚氧化酶(Polyphenol Oxidase,PPO)铜结合区之间的cDNA序列。该序列长度597 bp(Genbank accessionNo.GQ404509),编码了一段由199个氨基酸残基组成的多酚氧化酶保守区片段。桐花树PPO保守区片段具有PPO铜结合区A(CuA)的特征信号序列Hnswl.FFp FHRyyLyff E。同源比对表明,该序列与GenBank上其他已有的植物多酚氧化酶氨基酸序列的同源性都在65%以上。
- 王芳董乐戴聪杰林娈欧巧慧
- 关键词：多酚氧化酶基因克隆
