国家科技支撑计划(2007BAD75B06)
- 作品数：8 被引量：42H指数：4
- 相关作者：黄日波孙靓黄艳燕孙菲菲李检秀更多>>
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- 相关领域：轻工技术与工程化学工程生物学环境科学与工程更多>>
- 木薯淀粉发酵生产L-乳酸的培养条件优化被引量：14
- 2009年
- 通过单因素实验方法和Plackett-Burman实验方法,对木薯淀粉发酵生产L-乳酸的培养条件及培养基主要因子进行了优化和筛选。实验结果表明:鼠李糖乳杆菌发酵木薯淀粉生产L-乳酸的种龄为12h,培养基氮源为酵母粉,MgSO4·7H2O含量为0.4%,MnSO4含量为0.01%,CaCO3含量为7%,接种量为6%;木薯淀粉发酵乳酸的最适温度为37℃,最适pH值为6.3;通过Plackett-Burman实验,从酵母粉、MgSO4·7H2O、MnSO4、CaCO3、接种量、Tween-80、K2HPO4、乙酸钠、柠檬酸二铵等9个因素中筛选出了对L-乳酸产量具有明显影响的因素为:酵母粉、K2HPO4和MgSO·47H2O,并得到了L-乳酸产量为响应值的线性回归方程。
- 孙靓孙菲菲黄艳燕卢福芝黄日波
- 关键词：L-乳酸木薯淀粉PLACKETT-BURMAN设计
- 四环素抗性重组鼠李糖乳杆菌的构建被引量：1
- 2011年
- 将含有鼠李糖乳杆菌同源序列的自杀质粒pUC-ldhD-Ter转化到鼠李糖乳杆菌JCM 1553中,成功获得2株含四环素抗性的重组鼠李糖乳杆菌GL-1和GL-2。采用PCR技术鉴定重组菌株染色体基因组上含有四环素抗性基因Ter;生长曲线说明四环素抗性基因的插入对鼠李糖乳杆菌的生长没有较大影响。抗性菌株GL-1和GL-2在含10%葡萄糖的摇瓶发酵培养基发酵结果显示:37℃,200 r/min发酵40h,菌体密度OD600最大达到25.49和24.66,残糖含量为0.60%和0.63%,L-乳酸最高产量为93.956 g/L、93.693 g/L,葡萄糖转化率达到94.82%、94.56%,与原始菌株没有显著区别。
- 郭铃孙靓李检秀孙菲菲黄艳燕黄日波
- 关键词：鼠李糖乳杆菌发酵L-乳酸
- 微生物发酵L-乳酸的研究进展被引量：14
- 2009年
- 介绍了发酵法生产L-乳酸的天然微生物,对经典和理性育种方法进行了阐述,并探讨了其发展前景。
- 杨登峰关妮潘丽霞黄日波
- 关键词：L-乳酸发酵菌种筛选
- 大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因克隆表达及其酶学特性研究被引量：1
- 2011年
- 通过PCR克隆得到了不包括信号肽序列的109～1803bp大黄欧文氏菌蔗糖异构酶基因,以pQE30为表达载体可以在大肠杆菌中高效表达SI基因,但容易形成包涵体。通过降低诱导剂IPTG至10μmol/L,28℃低温诱导表达可以改进表达产物的可溶性。重组SI的最适pH为6.0,最适反应温度为30℃。测定的Km为46.8mmol/L,Vmax为152.2U/mg。重组SI对麦芽糖、海藻糖、棉子糖、三氯蔗糖及α-甲基葡萄糖苷等均不起作用,只利用蔗糖为底物转糖苷,也可以水解对硝基苯酚-α-葡萄糖苷。同时发现重组SI具有转化异麦芽酮糖生成海藻酮糖的活性。
- 周兴韦星明杨祥开郑元涛许黎明黄日波
- 关键词：酶学特性异麦芽酮糖
- 一株耐高温L-乳酸高产菌的选育及其发酵特征被引量：4
- 2011年
- 对鼠李糖乳杆菌菌株Lactobacillus rhamnosusJCM1553进行紫外诱变,选育得到一株耐高温L-乳酸高产突变菌GX-6。在47℃,分别以葡萄糖和木薯淀粉为底物,研究GX-6菌株发酵生产L-乳酸的情况并考察GX-6菌株的遗传稳定性。结果表明,以葡萄糖为底物时,发酵56h的L-乳酸产量达到117g/L,比出发菌(100g/L)提高17%,糖酸转化率68.8%;以木薯淀粉为底物时,发酵72h的L-乳酸产量达到138g/L,比出发菌株(73g/L)提高77.6%,糖酸转化率达到85.4%。经16次传代培养,GX-6菌株的乳酸发酵性能没有发生显著变化,具有较好的遗传稳定性。
- 李检秀孙靓吴军华郭铃孙菲菲黄艳燕
- 关键词：鼠李糖乳杆菌紫外诱变
- 甘蔗糖蜜发酵生产L-乳酸工艺条件研究被引量：7
- 2011年
- 以甘蔗糖蜜作为原料,利用经诱变筛选得到的鼠李糖乳杆菌SCT-10-10-60发酵生产L-乳酸。通过设置单因素实验,研究不同初始糖蜜浓度(50%、40%、30%、20%)、不同发酵温度(30℃、37℃、42℃、47℃)、不同pH调节剂碳酸钙加入量(4%、6%、8%、10%)和氮源替代(尿素替代酵母粉)对L-乳酸产量的影响。结果表明,在初始糖蜜浓度20%(m/V)、温度37℃、碳酸钙浓度4%(m/V)、鼠李糖乳杆菌SCT-10-10-60接种量6%(V/V)的发酵条件下,发酵40h L-乳酸的产量最高可以达到106g/L。尿素不能作为菌株生长所需要的氮源。
- 黄靖华孙靓吴军华孙菲菲李检秀黄艳燕郭铃黄日波
- 关键词：L-乳酸甘蔗糖蜜鼠李糖乳杆菌
- 鼠李糖乳杆菌D-(+)-乳酸脱氢酶基因的克隆及在大肠杆菌中的表达被引量：3
- 2010年
- 利用PCR的方法从鼠李糖乳杆菌基因组DNA中扩增到D-(+)-乳酸脱氢酶基因(ldhD),并连接到载体pSE380上,构建表达质粒pSE-ldhD,将重组质粒pSE-ldhD转化大肠杆菌BL21(DE3),重组菌株经IPTG诱导表达,SDS-PAGE电泳分析表明ldhD在大肠杆菌中实现了表达,表达产物的分子量约为37kD。同时采用紫外分光光度法测定D-乳酸脱氢酶的酶活,测得重组菌株的D-乳酸脱氢酶活力为5.4U/mL,最适反应温度为35℃,最适pH为5.6。
- 黄艳燕黄靖华卢福芝孙靓彭立新周兴黄日波
- 关键词：克隆鼠李糖乳杆菌
- 重组鼠李糖乳杆菌发酵L-乳酸的初步研究
- 2011年
- 将自杀质粒pDT转化到鼠李糖乳杆菌JCM1553中,成功获得了具有四环素抗性的鼠李糖乳杆菌。生长曲线说明,重组菌株能在5μg/mL四环素MRS培养基中正常生长,最适培养温度为37～42℃。重组菌株在含有10%、15%、20%、25%的葡萄糖发酵培养基中的发酵结果显示:37℃,200 r/min发酵40～88 h,菌体密度OD600最大为29.05;残糖含量最低为0.604%,L-乳酸的最大产量为228.19 g/L,葡萄糖转化率最大为96.24%。
- 郭铃孙靓李检秀吴军华黄艳燕孙菲菲黄日波
- 关键词：微生物同源重组鼠李糖乳杆菌
