广西壮族自治区自然科学基金(0728017)
- 作品数：5 被引量：4H指数：1
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- 类芽孢杆菌产胆固醇氧化酶的最适产酶条件研究
- 2012年
- 对诱变过的产胆固醇氧化酶的类芽孢杆菌(Paenibacillus sp.X534)在最适培养基进行了发酵条件的优化,确定其最适发酵条件为起始pH值为8,接种量8%,装液量16%,摇瓶转速180r/min,培养温度34℃,发酵时间50h。优化之后胆固醇氧化酶活达到约580U/L,比优化前提高了约1.5倍。
- 赵芳赵巧丽杨辉张建周河治
- 关键词：胆固醇氧化酶发酵
- 聚乙烯醇固定化胆固醇氧化酶的研究被引量：1
- 2013年
- 【目的】探讨类芽孢杆菌胆固醇氧化酶(COD)的固定化,为COD的应用研究提供参考依据。【方法】以不同浓度的聚乙烯醇、硼酸为主要材料制备固定化酶,并通过试验确定制备固定化酶的最适浓度、最佳反应温度、最适pH、热稳定性、酸稳定性、米氏常数及操作稳定性。【结果】选用12%聚乙烯醇、5%硼酸制备的固定化酶形状好、强度适中、易操作、固定化率高,其最适反应温度60℃,最适反应pH7.0,热、酸稳定性比游离酶好,且稳定范围较游离酶宽,表观米氏常数Km(2.55×10-5mol/L)相对游离酶变小,重复使用5次后酶活力仍能保持在67.8%以上,半衰期为8.91次。【结论】聚乙烯醇制备的固定化COD稳定性好,与底物亲和力较强,可重复回收利用,具有良好的应用前景。
- 李杰民王双双刘倩倩赵芳王发合周河治杨辉
- 关键词：聚乙烯醇胆固醇氧化酶固定化酶活性稳定性米氏常数
- 产溶菌酶白色链霉菌的筛选及鉴定被引量：2
- 2011年
- 从广西各地土壤中取样,利用添加金黄色葡萄球菌的LB培养基初筛,然后用含金黄色葡萄球菌的营养盐平板复筛,所得突变株经摇瓶发酵后测定其用蛋白酶K处理前后的粗酶液活力变化,筛选到一株溶菌酶产生菌RJ-36b。通过菌株形态学和16S rDNA保守序列分析,鉴定其为白色链霉菌。对其发酵条件的初步研究表明,在32℃、200 r/min发酵60 h时粗酶液活力最大,达到108 U/mL。
- 杨辉闫守泉赖祯冬林祖端梁海秋朱萍
- 关键词：溶菌酶白色链霉菌酶活力
- 类芽孢杆菌产胆固醇氧化酶的发酵条件优化
- 2012年
- 对诱变过的产胆固醇氧化酶的类芽孢杆菌(Paenibacillus sp X534)进行了发酵条件的优化,确定其最适培养基为:蔗糖2%,大豆粉2%,MgSO4.7H2O 0.1%,MnSO40.02%,土豆汁30%,K2HPO4.3H2O 0.4%,Tween-80 0.1%。确定最适发酵条件为:起始pH值为8,接种量8%,装液量16%,摇瓶转速180r/min,培养温度34℃,发酵时间50h。优化之后胆固醇氧化酶活达到400U/L左右,比优化前提高了约2倍。
- 赵芳张建杨林华周河治
- 关键词：胆固醇氧化酶发酵
- 类芽孢杆菌胞外胆固醇氧化酶的分离纯化被引量：1
- 2012年
- 【目的】探讨类芽孢杆菌产生胞外胆固醇氧化酶(COD)的分离、纯化方法,为其生产和应用提供技术支持。【方法】将类芽孢杆菌发酵液通过旋转蒸发浓缩、蔗糖透析浓缩、DEAE离子交换柱层析和凝胶层析,纯化目的蛋白,然后测定获得酶的基本酶学性质。【结果】类芽孢杆菌发酵液经DEAE离子交换柱层析和SephadexG-75凝胶柱层析后,纯化所得的COD比活力达6.83U/mg,酶活力回收为35.6%,纯化倍数为13.4倍。纯化酶经SDS-PAGE显示为均一条带,分子量约58kDa。将纯化的COD作用于不同浓度胆固醇,采用LineweaverBurk作图法,测得其Km=3.3×10-5mol/L。薄层层析结果显示,产物为胆甾-4-烯-3-酮,说明纯化所得酶是COD。【结论】纯化获得电泳纯类的芽孢杆菌胞外COD,其与底物亲和力较强,具有潜在的应用研究价值。
- 杨辉吕彦茹余磊赵芳王发合李杰民梁海秋朱萍周河治
- 关键词：类芽孢杆菌胆固醇氧化酶纯化
