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ING1家族各异构体抑制HeLa细胞增殖的分子机制研究: 2008年; ING1(inhibitor of growth 1)是一个候选抑癌基因家族,p47ING1a、p33ING1b和p24ING1c是其三种剪接异构体.通过MTT法和流式细胞术研究ING1a、ING1b和ING1c对HeLa细胞增殖的影响,结果发现三者均可将HeLa细胞阻滞于G0/G1期并抑制细胞生长.采用PCR方法构建ING1a和ING1b的PHD结构域缺失体1a!C和1b!C,进而使ING1a,ING1b、ING1c、1a△C和1b△C在HeLa细胞中过表达.采用Western blot检测上述HeLa细胞中p16INK4a、PTEN/p27Kip1和p53/p21Waf1的表达变化,结果发现ING1a、ING1b、ING1c和1a△C均可促进p16INK4a的表达,其中ING1c的促进作用最为显著,1b△C则略微抑制了p16INK4a的蛋白质表达.利用荧光素酶分析初步确定1a△C可增强p16INK4a启动子活性而促进p16INK4a的转录,1b△C则抑制了p16INK4a启动子活性.上述结果阐释了ING1家族各成员对HeLa细胞增殖的影响及其分子机制,从而确定了各异构体功能的异同及它们所调控的重要基因.首次发现除p53/p21Waf1通路外,ING1家族各异构体还可通过上调p16INK4a和PTEN的表达而抑制肿瘤细胞生长,并且ING1a的PHD结构域删除体可以增强p16INK4a的转录,这为研究ING1家族抑制肿瘤细胞生长的分子机制提供了新的线索.; 李娜张英涛薛丽香童坦君; 关键词：ING1 P16^INK4A P53

参与细胞衰老的蛋白质结构域被引量：2: 2007年; 大多数正常体细胞有有限的复制周期,并最终进入生长停滞状态被称为复制性衰老.迄今比较公认的3条细胞衰老信号转导途径是:p16INK4a/Rb、p19ARF/p53/p21Waf1以及PTEN/p27.目前发现,在基因转录水平上,有些转录因子的结构域对调节p16INK4a、p53/p21Waf1以及p27等与细胞衰老相关基因的表达有重要作用,如E2DBD、环指域(RINGfinger)等;其次,各条通路要发挥作用,必然要借助其上下游蛋白质的相互作用,其中结构域发挥了纽带作用.本文对其中某些蛋白质相互作用的结构域进行了描述.最后,还总结了其他一些参与细胞衰老的结构域.; 李娜张英涛薛丽香童坦君; 关键词：细胞衰老信号转导途径结构域

抑癌基因 p33^(ING1b)对人胚肺二倍体成纤维细胞衰老进程影响的机制研究: 2006年; 目的探讨衰老相关基因 p33^(ING1b)对 p16^(INK4a)以及细胞衰老进程影响的内在分子机制。方法以人胚肺二倍体成纤维细胞(2BS)为对象,采用 RT-PCR、Western blot、结构域分析、启动子分析以及相关衰老生物学指标检测等手段对 p33^(ING1b)对细胞衰老进程的影响进行研究。结果在2BS 细胞中,无论在 mRNA 水平还是蛋白质水平,p33^(ING1b)的表达均随代龄俱增,老年细胞 p33^(ING1b)蛋白表达水平是青年细胞的10倍;而且该基因具有促进 p16^(INK4a)表达的作用;通过结构域分析发现,C端的植物同型结构域(PHD)删除体(p33△C)较野生型 p33^(ING1b)具有更为明显的促进 p16^(INK4a)表达以及诱导细胞衰老的作用。具体表现在 p33△C 使 p16^(INK4a)表达上调,细胞生长曲线变缓(P<0.05),细胞传代次数减少10代以上。结论 p33^(ING1b)具有诱导衰老的作用,而且 p33^(ING1b)的不同结构域的作用也有所不同,PHD 结构域似有延缓衰老、约束或拮抗分子内其他部分的作用。; 薛丽香张宗玉童坦君; 关键词：成纤维细胞

Optimization of reporter gene assay:several factors influencing detection of promoter activity: 2007年; 背景倡导者分析当前被使用在信号 transduction 和 transcriptional 规定的研究检测指向的基因的表示。作为记者基因，酶起一个重要作用并且在胚胎的肺成纤维细胞房间(2BS ) ， HeLa 房间和 MCF-7 房间是的倡导者 assay.Methods 人广泛地被使用了有各种各样的基因的 transfected 由 lipofectamine 嵌入。这研究决定了影响倡导者活动决心的各种各样的因素，例如记者基因和内部参考书的选择，剂量和带抄写因素的向量的类型，宿主细胞和 instruments.Results 酶试金的敏感比提高的绿荧光蛋白质( EGFP )的高得多。而且，倡导者活动仅仅在结果可以在外面被颠倒的某些范围以一种剂量相关的方式被增加，倡导者活动与正在带 cDNA.Otherwise 的表示向量有关，倡导者的长度，内部参考书和主人房间罐头也影响倡导者 activity.Conclusions 精确地检测倡导者活动，包括影响记者基因试金的剂量，向量，长度和主人房间的一些因素上述的; XUE Li-xiang WENG Mo ZHANG Zong-yu TONG Tan-jun; 关键词：启动子活性荧光素酶绿色荧光蛋白

Sp1和Sp3介导的转录调控被引量：12: 2006年; 基本转录因子Sp1和Sp3对转录调控区GC盒有很强的亲和力,参与几乎所有细胞功能,包括细胞增殖、凋亡、分化和新生物的转化.但在同一细胞中Sp1和Sp3对不同基因的作用并不相同,二者对基因特异性的转录调控是Sp1和Sp3研究领域的重要问题.近年来发现,Sp1和Sp3自身表达水平、结合的靶序列、磷酸化、糖基化等翻译后修饰,其他蛋白质的结合以及染色质结构与修饰等方面均可影响Sp1和Sp3的转录活性.本文从Sp1和Sp3蛋白参与转录调节的机制以及影响其基因特异性转录活性的诸方面因素这两大侧面,介绍了近年来的最新进展.; 薛丽香翁默吴军峰张宗玉童坦君; 关键词：SP1 SP3 转录调节

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