“十五”国家科技攻关计划(2004BA308A21-6)
- 作品数：3 被引量：7H指数：1
- 相关作者：许煜泉张雪洪汪晓雷彭华松胡洪波更多>>
- 相关机构：上海交通大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项国家自然科学基金上海市教育委员会重点学科基金更多>>
- 相关领域：农业科学轻工技术与工程化学工程更多>>
- 假单胞菌M18菌株的PltR因子特异性正调控藤黄绿菌素合成被引量：1
- 2007年
- 经生物信息学分析,在假单胞菌M18(Pseudomonas sp.M18)菌株的藤黄绿菌素(pyolute-orin,Plt)生物合成基因簇上游定位了一个属于LysR家族的调控因子编码基因pltR.运用同源重组技术,构建了pltR失活的突变菌株M18TRG,在King’sB培养基中,与野生型菌株相比,Plt合成能力下降了70%,而吩嗪-1-羧酸(phenazine-1-carboxylic acid,PCA)的合成能力不受影响.反式互补pltR的突变株能回复Plt的合成能力达到野生型水平.在菌株M18中过表达pltR,Plt产量提高13倍,PCA产量没有改变.这些结果表明pltR基因表达产物是Plt生物合成的特异性正调控因子.在野生型菌株M18和不产Plt的突变株M18T中,pltR基因表达量无显著差异,表明pltR基因的表达不受Plt调控.与野生株相比,突变株M18TRG中的转录融合plt-lacZ表达量显著降低,表明PltR对Plt的正调控作用主要发生在转录水平上.对pltR基因在gacA突变株M18G和rsmA突变株M18R中的表达量的进一步研究发现,PltR参与了gacA基因对Plt的合成的正调控,但不参与rsmA基因对Plt合成的负调控.
- 严安汪晓雷张雪洪许煜泉
- 产PCA基因工程菌M18G反复补料分批培养研究被引量：5
- 2007年
- 吩嗪-1-羧酸(PCA)是一种广谱、高效的微生物源农药,采用反复补料分批培养工艺可提高PCA合成速率,为实现PCA的商业化生产打下了良好的基础。本试验针对高产PCA的基因工程菌M18G,首先在摇瓶培养条件下,用正交试验法研究了培养基中各主要营养因子葡萄糖、黄豆粉、甘油、95%乙醇等对PCA产量的影响,并确定了适合PCA分泌的最佳培养基(1L)为:葡萄糖6g,黄豆粉40g,甘油6mL,95%乙醇5.9mL;然后确定了反复补料分批培养时更换新鲜培养基的最佳时间为每次培养进行48h后、体积比例为90%。在此条件下,培养进行五个周期后,PCA的合成速率可达到2.27mg/h,是优化后分批培养的1.34倍,同时延长了培养周期,有利于提高设备使用率,降低生产成本。
- 张云胡洪波彭华松许煜泉张雪洪
- 关键词：吩嗪-1-羧酸培养基优化
- 假单胞菌M18株las系统负调控藤黄绿脓菌素和吩嗪-1-羧酸的合成被引量：1
- 2008年
- 从假单胞菌M18株（Pseudomonassp．M18）中，克隆了las系统的双元组分lasI和lasR基因，它们的编码产物属于LuxI—LuxR调控因子．运用同源重组技术，分别构建lasI和lasR基因的染色体失活突变株，与野生型菌株相比，抗生素藤黄绿脓菌素（Pit）和吩嗪-1-羧酸（PcA）的产量均分别提高了4～5倍和2～3倍．在lasI和lasR突变株的反式互补实验中，两种抗生素的产量回复到野生型水平．pltA’-lacZ和phzA-＇lacZ翻译融合的测定结果进-步证明lasI和lasR的编码产物对Plt和PCA生物合成基因簇具有负调控作用．las系统正调控细菌的群集运动，在lasI和lasR的失活突变株中，细菌的群集运动能力消失．对lasI和lasR突变株和野生型的生长曲线的研究发现，lasI和lasR基因的编码产物对细菌的生长具有抑制作用．结果表明，las系统作为整体调控因子的编码基因，参了与细胞内多种生物活动的调控作用．
- 陈韵汪晓雷黄显清张雪洪许煜泉
- 关键词：吩嗪-1-羧酸群集运动
