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重庆市自然科学基金(2010BB5097)

作品数:1 被引量:0H指数:0
相关作者:张赟江伟毕杨李廷玉陈洁更多>>
相关机构:重庆医科大学更多>>
发文基金:重庆市自然科学基金重庆市医学科研计划项目中国博士后科学基金更多>>
相关领域:医药卫生更多>>

文献类型

  • 1篇中文期刊文章

领域

  • 1篇医药卫生

主题

  • 1篇重组腺病毒
  • 1篇细胞
  • 1篇腺病
  • 1篇腺病毒
  • 1篇小干扰RNA
  • 1篇PC12细胞
  • 1篇RNA干扰
  • 1篇小干扰

机构

  • 1篇重庆医科大学

作者

  • 1篇龚敏
  • 1篇陈洁
  • 1篇李廷玉
  • 1篇毕杨
  • 1篇江伟
  • 1篇张赟

传媒

  • 1篇解剖学杂志

年份

  • 1篇2012
1 条 记 录,以下是 1-1
排序方式:
视黄酸核受体α的siRNA重组腺病毒构建及干扰效果初步鉴定
2012年
目的:构建视黄酸核受体a(RARa)的siRNA重组腺病毒,为反向研究RARa受体在全反式视黄酸(ATRA)抗凋亡过程中的作用提供实用的技术手段。方法:设计3对大鼠RA风的siRNA序列,将其分别克隆到pSES-HUS穿梭质粒;进而将重组穿梭质粒pSES-HUS-siRARa与pAdEasml在BJ5183感受态大肠埃希菌内同源重组以得到pAd-siRARa,PacI酶切线性化后转染HEK293进行包装扩增以得到重组腺病毒Ad-siRAR^Ad-siRARa感染大鼠PCI2细胞48h,提取各组mRNA和总蛋白,Real-timePCR和免疫印迹检测Ad-siRAR^-I、一2、一3对RARQ的抑制效率。结果:PCR、酶切及测序均证实RARa的siRNA序列正确克隆至腺病毒质粒载体,经过包装扩增得到大量高滴度重组腺病毒Ad-siRARa,而且对RARa的表达抑制效率接近70%。结论:成功构建视黄酸核受体RARⅡ的siRNA重组腺病毒,并具有下调PCI2细胞RARa基因和蛋白表达的功能。
龚敏毕杨张赟江伟陈洁李廷玉
关键词:小干扰RNA重组腺病毒RNA干扰PC12细胞
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