福建省自然科学基金(B0410010)
- 作品数：2 被引量：10H指数：2
- 相关作者：王宗华庄振宏汪世华李兰孙宪连更多>>
- 相关机构：福建农林大学中国农业科学院作物科学研究所更多>>
- 发文基金：福建省自然科学基金国家高技术研究发展计划福建省教育厅资助项目更多>>
- 相关领域：生物学农业科学更多>>
- 抗黄曲霉毒素B1单链抗体(scFv)库的建立和筛选被引量：6
- 2009年
- 从抗黄曲霉毒素B1单克隆抗体细胞系中扩增到重链可变区(VH)和轻链可变区(VL),经PCR将VH、Linker和VL连接成单链抗体(scFv),并克隆到载体pCANTAB-5E,经电转化大肠杆菌TG1,构建了库容量为1×108的单链抗体库。通过辅助噬菌体M13KO7感染后,使单链抗体展示在噬菌体衣壳蛋白pIII的N端,得到客容量为1×108的噬菌体展示的抗体库。将抗体库用于"淘洗-富集-扩增"4轮以后,得到针对AFB1特异性的噬菌体抗体。进一步以噬菌体感染大肠杆菌HB2151,在细菌细胞周质中可溶性大量表达,最终经竞争ELISA分析表明获得了3株可以稳定分泌抗黄曲霉毒素B1 scFv菌株,分别命名为3C3、3B3和4A2。
- 庄振宏李兰孙宪连张新艳单超汪世华王宗华
- 关键词：黄曲霉毒素B1单链抗体抗体库
- 小麦成熟胚再生体系及基因枪转化的初步研究被引量：4
- 2005年
- 以小麦品种晋麦2148的成熟胚为外植体,消毒后用解剖刀刨碎,接种于MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+2mg·L-12,4D+8g·L-1琼脂糖的培养基中诱导愈伤组织,将诱导3周的成熟胚愈伤组织接种到胚状体成熟培养基(MS+VB5+11.2g·L-1葡萄糖+0.2mg·L-1IAA+8g·L-1琼脂糖)中培养4-8周,然后转接到再生培养基(1/2MS+VB5+30g·L-1蔗糖+8g·L-1琼脂糖)中进行再生成苗.接种1200块成熟胚,得到1123块愈伤组织,最终形成258株再生苗,再生率为21.5%.在建立了再生体系的基础上,用基因枪介导法将GUS基因导入成熟胚愈伤组织,Xgluc染色表明,GUS基因已经在小麦成熟胚愈伤组织中表达.将100块愈伤组织用Xgluc染色,29块愈伤组织出现肉眼可见的蓝色小点.
- 林德书王艳丽庄振宏鲁国东叶兴国王宗华
- 关键词：成熟胚基因枪转化GUS基因体成熟再生苗再生率
