国家自然科学基金(30500027)
- 作品数：10 被引量：34H指数：4
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- 真菌耐药性产生的新机制:热休克蛋白90的作用被引量：3
- 2009年
- 近年来白念珠菌病发病率呈上升趋势。随着抗真菌药物的广泛应用,临床出现的耐药菌株也不断增多。最近对耐药菌株的产生机制的研究有了重大突破,对Hsp90的作用有了更深的了解,即Hsp90可以参与由于快速选择而出现的真菌耐药机制,而且对耐药性的维持也起到一定作用。该文对Hsp90对真菌产生耐药性的机制及其临床应用的研究进展作一综述。
- 许辉李若瑜刘伟
- 关键词：HSP90耐药真菌
- 根癌农杆菌介导的尿嘧啶缺陷烟曲霉转化是基因敲除的有效方法被引量：6
- 2008年
- 目的:探讨用嘧啶营养缺陷作为筛选标记、根癌农杆菌介导的转化方法敲除烟曲霉基因。方法:以pyrG作为筛选标记,在双元载体pDHt/sk上分别构建烟曲霉FAP1和SHO1基因的打靶序列。构建好的质粒分别转化入根癌农杆菌。24℃条件下,含打靶质粒的根癌农杆菌与烟曲霉在不含尿嘧啶和尿苷的诱导培养基上共培养48h;然后将培养物转移到37℃,筛选转化子。结果:根癌农杆菌介导的烟曲霉转化同源重组率较高,FAP1基因为44%(7/16)、SHO1基因为35%(7/20)。结论:以pyrG作为筛选标记、根癌农杆菌介导的转化方法能高效敲除烟曲霉基因,为烟曲霉基因功能研究提供了有效方法。
- 乔建军刘伟马彦万喆李若瑜
- 关键词：根瘤菌曲霉菌基因
- 耐氟康唑的白念珠菌对常见抗真菌药物的敏感性检测被引量：5
- 2009年
- 目的测定耐氟康唑白念珠菌对常见抗真菌药物的敏感性,并探讨pH值对微量液基稀释法的影响。方法参照美国临床实验室标准研究所(CLSI)颁布的酵母菌抗真菌药物敏感性试验方案M27-A2,测定氟康唑(FLC)、伏立康唑(VOR)、伊曲康唑(ITC)、两性霉素B(AMB)和米卡芬净(MCFG)的最小抑菌浓度(MIC),并调整RPMI-1640液体培养基的pH值至4.5,测定FLC、VOR和ITC的MIC值。结果FLC的MIC值均>64μg/mL;VOR的MIC值,6株菌>16μg/mL,1株为2μg/mL,3株<1μg/mL;ITC的MIC值,7株≥1μg/mL,3株为0.25～0.5μg/mL;MCFG的MIC值为0.125～0.25μg/mL,AMB的MIC值为1～2μg/mL;使用pH值为4.5的RPMI-1640液体培养基,5种抗真菌药物的MIC值变化不明显。结论10株耐氟康唑的白念珠菌对MCFG均敏感,部分菌株对VOR和(或)ITC交叉耐药;部分耐FLC的白念珠菌对AMB的敏感度有所降低。降低RPMI-1640的pH值,可明显减少拖尾现象,但不影响药敏结果的判定。
- 冯丽娟陈伟万喆王晓红李若瑜刘伟
- 关键词：白念珠菌抗真菌药物耐药性
- 对多烯类药物特异性耐药的黄曲霉临床分离株
- 目的对分离自疑似侵袭性肺曲霉病患者肺泡灌洗液的黄曲霉,进行常用抗真菌药物敏感性的测定。方法经过形态学,对分离自疑似侵袭性肺曲霉病患者肺泡灌洗液的病原真菌进行菌种鉴定;然后参照美国临床和实验室标准研究所CLSI颁布的关于丝...
- 刘伟万喆陈伟王端礼李若瑜
- 关键词：黄曲霉耐药性
- 文献传递
- 额外拷贝ERG6基因对烟曲霉的影响
- [目的]通过构建烟曲霉ERG6基因额外拷贝株,研究该基因对烟曲霉生长速度、抗药物敏感性的影响。[方法]在烟曲霉基因组找出烟曲霉可能的ERG6基因的开放读码框（ORF）,PCR扩增ERG6的ORF连同其上下游各约1 kb的...
- 乔建军刘伟李若瑜曹存巍万哲
- 关键词：烟曲霉抗真菌药物敏感性
- 文献传递
- 耐伊曲康唑烟曲霉临床分离株对四种抗真菌药物的敏感性测定被引量：1
- 2007年
- 目的测定耐伊曲康唑炯曲霉临床株对4种抗真菌药物的敏感性。方法自一例对伊曲康唑无效的肺曲霉球患者体内系列分离6株烟曲霉。利用美国临床实验室标准化研究所(CLSI)的微量液基稀释法M38-A方案和E-test法测定6株烟曲霉临床分离株对两性霉素B、卡泊芬净、米卡芬净、伏立康唑和伊曲康唑的敏感性。结果6株烟曲霉中,2株对伊曲康唑的最低抑菌浓度(MIC)为0.5μg/mL,其他4株的MIC均>16μg/mL;两性霉素B和伏立康唑对6株烟曲霉的MIC分别为1μg/mL和0.25～1μg/mL,卡泊芬净和米卡芬净对6株烟曲霉的最低有效浓度均≤0.03μg/mL。E-test法测定结果也显示,卡泊芬净和伏立康唑对6株烟曲霉有良好的抑制活性。结论耐伊曲康唑烟曲霉临床株对两性霉素B、卡泊芬净、米卡芬净和伏立康唑敏感。
- 刘伟乔建军万结陈伟王端礼李若瑜
- 关键词：伊曲康唑
- 对多烯类药物耐药的1株黄曲霉临床株耐药性的初步研究被引量：3
- 2007年
- 目的对1株分离自疑似侵袭性肺曲霉病患者肺泡灌洗液的黄曲霉进行常用抗真菌药物敏感性的测定,判断其药物敏感性。方法以形态学方法对该菌株进行菌种鉴定;然后按照美国临床和实验室标准研究所(CLSI)的丝状真菌抗真菌药物敏感性试验方案M38-A,测定常用抗真菌药物对该菌株的最低抑菌浓度、最低杀菌浓度;同时以E-test法测定该菌对两性霉素B和伊曲康唑的敏感性。结果微量液基稀释法显示,两性霉素B或制霉菌素对该菌的MIC值均为4μg/ml,MFC值均为16μg/ml;伊曲康唑的MIC值为0.5μg/ml,MFC值为2μg/ml;特比萘芬的MIC为0.03μg/ml,MFC为0.03μg/ml。E-test法结果显示,该菌对伊曲康唑敏感,对两性霉素B耐药。结论临床上可以分离到对多烯类抗真菌药物耐药的黄曲霉株,应该引起重视。
- 刘伟万喆陈伟王端礼李若瑜
- 关键词：黄曲霉耐药性
- 白念珠菌耐药的分子机制研究进展被引量：10
- 2007年
- 近年来,免疫受损人群不断增多,该人群念珠菌病发病率呈上升趋势。随着抗真菌药物的广泛应用,临床分离到的白念珠菌耐药株增多,有关白念珠菌对抗真菌药物的耐药机制的研究又有了进一步的进展。就白念珠菌对唑类、多烯类、5-氟胞嘧啶、棘白菌素类等抗真菌药物的耐药机制方面的研究进展,作了介绍。
- 乔建军刘伟李若瑜
- 关键词：白念珠菌抗真菌药物耐药
- 含额外拷贝ERG3B基因烟曲霉的表型分析被引量：2
- 2008年
- 目的克隆烟曲霉ERG3B基因,并构建烟曲霉ERG3B基因额外拷贝株,了解该基因对烟曲霉表型的影响。方法通过同源性比对,在烟曲霉基因组找出烟曲霉可能的ERG3基因的开放读码框(ORF),PCR扩增ERG3B基因ORF连同其上下游各约1kb的DNA片段,将该片段重组到穿梭质粒pRG-AMA1-NotI。用重组后的质粒转化嘧啶营养缺陷株烟曲霉AF293.1。观察转化子的生长速度并测定转化子对抗真菌药物敏感性。结果①烟曲霉ERG3基因有3个拷贝(ERG3A,ERG3B,ERG3C)。Erg3Ap和Erg3Bp与其他真菌的Erg3同源性高。②烟曲霉ERG3B基因被重组到了pRG-AMA1-NotI,产生质粒pERG3B。用pERG3B和空载体pRG-AMA1-NotI转化AF293.1后,分别得到转化子AF-pERG3B和AF-empty。AF-pERG3B与AF-empty的生长速度无差异;两者对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性也无差异。结论额外拷贝的ERG3B基因不影响烟曲霉的生长速度及对伊曲康唑、伏立康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性。
- 乔建军刘伟李若瑜万喆
- 关键词：烟曲霉抗真菌药物敏感性菌丝生长
- 额外拷贝ERG6基因对烟曲霉的影响被引量：3
- 2007年
- 通过构建烟曲霉ERG6基因额外拷贝株．研究该基因对烟曲霉生长速度、抗药物敏感性的影响。在烟曲霉基因组找出烟曲霉可能的ERG6基因的开放读码框(ORF),PCR扩增ERG6的ORF连同其上下游各约1 kb的DNA片段,利用DNA重组的方法将该片段克隆到载体pRG-AMA1-NotI。用重组后的质粒转化烟曲霉尿嘧啶营养缺陷株AF293．1。在MM和YAG培养基上观察转化子的生长速度。采用纸片扩散法和微量液基稀释法测定转化子对抗真菌药物敏感性。烟曲霉基因组中存在一个拷贝的ERG6基因,ORF大小为1,256 bp。其编码的蛋白与白念珠菌、酿酒酵母固醇甲基转移酶(Ers6p)的氨基酸相同率分别为57%和50%,相似率分别为70%和63%。烟曲霉中ERG6基因被成功克隆到了pRG-AMA1-Not I,产生了质粒pERG6。用pERG6和空载体pRG-AMA1-Not I转化AF293．1后,分别得到转化子AF-pERG6和AF-empty。AF-pERG6在MM和YAG培养基上的生长速度均比AF-empty慢。AF-pERG6和AF-empty对伊曲康唑、伏力康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性没有差异。ERG6基因额外拷贝不影响烟曲霉对伊曲康唑、伏力康唑、特比萘芬、两性霉素B、卡泊芬净、灰黄霉素的敏感性,但是能使烟曲霉的生长速度减慢。
- 乔建军刘伟曹存巍万哲李若瑜
- 关键词：烟曲霉抗真菌药物敏感性
