国家科技重大专项(2013ZX10003002-004)
- 作品数：2 被引量：9H指数：2
- 相关作者：李雅楠郝玉宾戴二黑张志王伟更多>>
- 相关机构：石家庄市第五医院河北省人民医院河北医科大学更多>>
- 发文基金：国家科技重大专项河北省卫生厅科研基金更多>>
- 相关领域：生物学医药卫生更多>>
- 应用不同引物检测耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因点突变对结果判定的影响被引量：2
- 2013年
- 目的探讨以PCR-SSCP技术为基础,应用不同引物检测耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因点突变以及固定/终止液的组成对判定结果可能会产生的影响。方法采用2对引物,经PCR-SSCP检测,利用银染显色的方法显现耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因点突变的DNA单链位移。结果对比标准株H37Rv及H37Ra gyrA基因的单链带位置,在被测试的89株菌株中发生位置变化的;对氧氟沙星的耐药程度>10μg/ml的分别有4株与14株,约占89株检测总数的4.49%和87.5%,对氧氟沙星的耐药程度介于≥2且≤10μg/ml之间的26株中,有与标准株gyrA基因的单链带位置发生改变的分别有20株与7株,约占89株检测总数的22.47%和7.87%;对氧氟沙星的耐药程度<2μg/ml的47株中分别有2株与11株,约占89株检测总数的2.25%和12.36%。用含5.0%乙醇和4.5‰冰醋酸配比的固定/终止液可为利用银染法显现核酸凝胶分离DNA提供温和的反应环境,操作过程方便,观测效果较为理想。结论应用不同引物检测耐氧氟沙星结核分枝杆菌gyrA基因点突变会对结果的判定产生影响,采用含5.0%乙醇、4.5‰冰醋酸的固定/终止液可为应用非变性聚丙烯酰胺凝胶分离核酸检测的银染着色法提供温和的反应环境,并产生清晰可辨的被检测标本的DNA单链条带。
- 张健源程君任卫聪刘毅赵雁林孙勇王伟李传友
- 关键词：氧氟沙星银染色法GYRA基因
- 实时荧光定量PCR相对定量法检测循环miRNA的内参选择被引量：7
- 2015年
- microRNA(miRNA)是一类内源性非编码微小RNA,在调控细胞增殖、分化、凋亡等方面发挥重要作用。研究发现,miRNA能够稳定存在于细胞外液,被称为循环miRNA。在多种疾病状态下循环miRNA表达谱改变,具有成为非创伤性新型生物标志物的潜能。实时荧光定量PCR(RT-qPCR)是检测miRNA表达变化的确证实验,其中内参的选择关系到相对定量结果是否真实可靠。我们简要综述国内外实验室常用的RT-qPCR内参及其特点。
- 李雅楠郝玉宾张志戴二黑
- 关键词：实时荧光定量PCR内参
