国家自然科学基金(20177019)
- 作品数：6 被引量：50H指数：4
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- 绿磺隆克百威三唑磷多抗体免疫亲和色谱技术研究被引量：4
- 2009年
- 采用碳酰二咪唑(CDI)将Sepharose CL-4B活化并分别与纯化的抗绿磺隆、抗克百威、抗三唑磷的多克隆抗体共价偶联,合成相应的免疫亲和吸附剂,并制备了对绿磺隆、克百威和三唑磷具有特异性亲和力的多抗体免疫亲和色谱(MIAC)柱。对MIAC的条件进行优化,选择0.02mol·L-1pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,80%(体积分数)甲醇水溶液作洗脱剂。结果表明,在上述试验条件下,MIAC柱对绿磺隆、克百威和三唑磷的动态柱容量分别达1.81、2.29和1.89μg·mL-1床体积。用MIAC柱对添加有绿磺隆、克百威、三唑磷的河水与土壤提取液进行分离富集,洗脱液分别采用包被抗体直接竞争酶联免疫吸附(ELISA)法和高效液相色谱(HPLC)法测定,重复5次,平均回收率是89.98%～106.2%,相对标准偏差(RSD)为3.21%～14.81%,ELISA法和HPLC法的测定结果基本一致。成功建立了绿磺隆、克百威和三唑磷的多抗体免疫亲和色谱分析技术并用于河水和土壤中绿磺隆、克百威、三唑磷残留的测定。
- 韦林洪刘曙照邵秀金张军
- 关键词：绿磺隆克百威三唑磷
- 免疫亲和色谱-高效液相色谱法测定河水和土壤中克百威、三唑磷和绿磺隆残留量被引量：3
- 2012年
- 将河水或土壤样品的丙酮提取液通过串联的分别装有克百威、三唑磷和绿磺隆免疫亲和吸着剂的3支免疫亲和色谱柱(IAC)或同时装有上述3种吸着剂的多抗体IAC,对样品中克百威、三唑磷及绿磺隆3种农药进行分离。采用串联IAC分离时,在样品溶液过柱后,将串联的IAC柱分开,并用不同配比的甲醇-水溶液分别从3支IAC柱上洗脱农药,用ELISA和HPLC分别测得农药的含量。采用多抗体IAC分离时,用甲醇-水溶液洗脱后,用上述两种方法测得洗脱液中3种农药的含量。对2种分离方法作回收和精密度试验,两方法的回收率和重复性基本一致。
- 韦林洪刘曙照邵秀金
- 关键词：高效液相色谱克百威三唑磷绿磺隆
- 稻米中三唑磷残留免疫亲合色谱-高效液相色谱分析被引量：18
- 2006年
- 目的提高三唑磷残留的监测效率。方法采用碳酰二咪唑(CDI)将SepharoseCL-4B活化并与纯化的抗三唑磷多克隆抗体共价偶联,合成免疫亲合色谱(IAC)吸附剂并制备对三唑磷具有特异性亲合力的IAC柱。对IAC条件进行了优化,选择0.02mol·L-1pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,60%(体积分数)甲醇水作洗脱剂。结果在试验条件下,IAC柱对三唑磷的动态柱容量达1.91μg·ml-1床体积,当标样溶液中三唑磷含量为2ng·ml-1时,经IAC柱富集的效率近250倍。稻米中添加三唑磷0.1μg·g-1,提取液以IAC柱分离富集,洗脱液采用高效液相色谱(HPLC)法测定,5次重复测定的平均回收率为102.5%,相对标准偏差4.44%。结论成功建立了三唑磷IAC-HPLC分析技术并用于稻米中三唑磷残留的测定。
- 韦林洪王莲刘曙照
- 关键词：稻米
- 克百威的免疫亲和色谱分析研究被引量：26
- 2005年
- SepharoseCL 4B经碳酰二咪唑(CDI)活化后与纯化的克百威抗体共价偶联,合成了免疫亲和色谱 (IAC)固定相,并用其制备了对克百威具有特异性亲和力的IAC柱。对IAC条件进行了优化,选择 0 02mol/LpH7 2磷酸盐缓冲液(PB)作为吸附与平衡介质,60% (体积分数 )甲醇水溶液作为洗脱剂。结果表明:在优化条件下,IAC柱对克百威的动态柱容量达 1 58mg/L。当标样溶液中克百威质量浓度低于 2μg/L时,经IAC柱富集的效率高于167倍。在河水中按 0 1mg/L水平添加克百威标准品,经IAC柱分离富集,洗脱液采用包被抗体直接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)法检测,5次重复测定的平均回收率为 89 8%,相对标准偏差为 4 8%。同时采用高效液相色谱(HPLC)法测定洗脱液,与ELISA法测定结果基本一致。
- 刘曙照韦林洪徐维娜
- 关键词：酶联免疫吸附分析高效液相色谱克百威
- 免疫亲和色谱-高效液相色谱法测定土壤中氯磺隆残留被引量：4
- 2006年
- 采用碳酰二咪唑(CDI)将SepharoseCL-4B活化并与纯化的抗氯磺隆抗体共价偶联,合成免疫亲和吸附剂并制备对氯磺隆具有特异性亲和力的免疫亲合色谱(IAC)柱。对IAC条件进行优化,选择0.02mol.L-1pH7.2磷酸盐缓冲液作吸附与平衡介质,80%(体积分数)甲醇水作洗脱剂。结果表明,在实验条件下,IAC柱对氯磺隆的动态柱容量达2.6!g.mL-1床体积。当标样溶液中氯磺隆含量为2.0ng.mL-1时,经IAC柱富集后浓度提高近250倍。土壤中添加氯磺隆0.10!g.g-1、5.0ng.g-1,提取液以IAC柱分离富集,洗脱液采用高效液相色谱(HPLC)法测定,5次重复实验的平均回收率分别为92.9%、94.8%,相对标准偏差分别为8.46%、8.41%。成功建立了氯磺隆IAC-HPLC分析技术并用于土壤中痕量残留氯磺隆的测定。
- 冯大和邵秀金韦林洪刘曙照
- 关键词：土壤氯磺隆
- 三唑磷的免疫分析技术研究被引量：7
- 2005年
- 将合成的三唑磷半抗原采用活性酯法分别与牛血清白蛋白和卵清蛋白共价偶联制备突出三唑磷分子结构特征的人工抗原与包被抗原.以人工抗原免疫新西兰白兔获得抗血清,采用硫酸铵分步盐析和DEAE 纤维素反相吸附法从抗血清中分离纯化对三唑磷具特异性亲合力的抗体,以辣根过氧化物酶采用混合酸酐法标记半抗原.在此基础上,首次成功建立了对三唑磷具高特异性的间接竞争、包被抗体直接竞争酶联免疫吸附分析(ELISA)技术.在优化条件下,三唑磷测定的线性浓度范围为0.001～1.0 mg/L,检出限0.11 μg/L,其他类似结构的常用有机磷酸酯类杀虫剂和苯唑醇不干扰三唑磷的测定.
- 刘曙照王莲韦林洪
- 关键词：三唑磷半抗原人工抗原抗体酶联免疫吸附分析
