国家自然科学基金(81273429)
- 作品数：10 被引量：51H指数：6
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- Cav-1mRNA、S100A4mRNA和CD31的表达与前列腺癌转移及生存率关系的研究被引量：2
- 2012年
- 目的研究前列腺癌组织中Car-1mRNA、S100A4mRNA和CD31的表达，探讨其与前列腺癌转移及生存率的关系。方法选取2004年1月至2006年5月行前列腺癌根治术切除的癌组织标本42例和癌旁组织12例。患者年龄58—86岁，平均（71．6±7．6）岁。Gleason评分≤6分17例，7分12例，≥8分13例。TNM分期：T，16例，T：9例，T，11例，T。6例。骨转移8例，无骨转移34例。术前PSA〈4I．zg／L4例，4～10μg／L10例，〉10Ixg／L28例。12例前列腺癌旁组织作为对照组，取自距离肿瘤1～2em或另一叶（镜下验证无癌细胞）的正常前列腺组织。采用原位杂交法检测42例前列腺癌切除标本和12例癌旁组织中Cav-1mRNA、S100A4mRNA的表达；用CD，，标记血管内皮细胞，计数肿瘤组织的微血管密度（mierovesseldensity，MVD）；结合临床资料分析三者与前列腺癌Gleason评分、TNM分期、PSA值及有无骨转移等特性的关系。结果前列腺癌组织中Cav-1mRNA和$100A4mRNA阳性表达率分别为35．7％（15／42）和47．6％（20／42），癌旁组织分别为0和8．3％（1／12），各组比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。Cav—lmRNA和S100A4mRNA阳性表达率均与前列腺癌Gleason评分、TNM分期及骨转移呈正相关。Cav一1mRNA、S100A4mRNA阴性表达者MVD分别为（62．8±10．4）／mm。和（63．3±12．0）／mm2，阳性表达者分别为（83．5±6．7）／mm。和（77．9±11．0）／mm。，组间比较差异均有统计学意义（P〈0．05）。Cav．1mRNA表达阳性组和阴性组5年生存率分别为46．7％（7／15）、85．2％（23／27），组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。S100A4mRNA表达阳性组和阴性组5年生存率分别为50．O％（10／20）、90．9％（20／22），组间比较差异有统计学意义（P〈0．05）。结论Cav-1mRNA和S100A4mRNA阳性表达、MVD增高可能与前列腺癌进展、骨转移有关。Car-1、S100A4均可能促进前列
- 庄黛娜闫海强杨最素丁国芳
- 关键词：前列腺癌原位杂交
- 乌贼墨多肽诱导人前列腺癌DU-145细胞凋亡的机制研究被引量：8
- 2014年
- 本文探讨了乌贼墨多肽(SHP)诱导DU-145细胞凋亡机制。采用CCK-8法检测SHP对DU-145细胞增殖的影响;采用HE染色和AO/EB荧光染色观察DU-145细胞的形态学的变化;采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率;并通过Western Blotting检测细胞中p53、Bcl-2、Bax、Caspase-3、VEGF的蛋白表达变化。结果表明,SHP对DU-145细胞的增殖具有明显的抑制作用且呈现剂量和时间依赖性;SHP作用后的DU-145细胞出现凋亡的形态学特征;流式细胞术结果显示,随着SHP浓度和作用时间的增加,DU-145细胞的早期凋亡率从12.25%增加到34.20%;Western Blotting结果显示,当SHP作用24 h后,VEGF、Bcl-2蛋白表达量降低,p53、Bax、Caspase-3蛋白表达量增加。综上可知,SHP能够诱导DU-145细胞凋亡,其机制有可能是通过激活抑癌基因p53,下调Bcl-2/Bax比例;下调VEGF,激活凋亡蛋白酶Caspase-3,诱发凋亡级联反应来实现的。
- 景奕文杨最素黄芳芳郁迪丁国芳
- 关键词：多肽凋亡
- LPS致肝细胞损伤模型的建立研究被引量：3
- 2014年
- [目的]探索LPS体外致人Chang Liver细胞损伤模型的建立方法和意义。[方法]分别用20、40、60、80、100μg/ml浓度的LPS作用Chang Liver细胞24 h,采用MTT法检测LPS对Chang Liver细胞存活率的影响,分别测定Chang Liver细胞上清中谷草转氨酶(AST)、谷丙转氨酶(ALT)、碱性磷酸酶(ALP)、γ-谷氨酰转肽酶(γ-GT)、乳酸脱氢酶(LDH)的活性,并通过Hoechst 33258荧光染色观察用药24 h后Chang Liver细胞形态的变化。[结果]80和100μg/ml浓度的LPS作用后Chang Liver细胞存活率显著性降低,胞外AST、ALT、ALP、γ-GT、LDH酶活性升高,细胞数目减少,细胞形态发生改变,呈现细胞核固缩等细胞凋亡现象。[结论]用80μg/ml的LPS与Chang Liver细胞共培养24 h,可以建立理想的体外肝细胞损伤模型。
- 滕芳芳胡晓斐刘晨晨杨最素黄芳芳丁国芳
- 关键词：LPSCHANGASTALT
- 海洋头足类活性物质的功能特性研究进展被引量：6
- 2013年
- 头足类盛产于我国东海地区,海洋头足类作为辅食和药物已具有悠久的历史。随着生物技术的进步和海洋资源的不断开发和利用,头足类动物的研究也逐渐深入;有学者对头足类动物加工的副产品提取物的功能特性,如抗肿瘤、抗氧化、免疫功能调节、降血脂血压等作了大量的深入研究。近年来,头足类动物成为功能食品和新型海洋药物开发和利用热点而备受人们的青睐。因此,本文将对近年来常见的几种头足类活性物质的功能特性研究进行综述。
- 景奕文曾丽王加斌杨最素黄芳芳丁国芳
- 关键词：活性物质功能食品海洋药物
- 鳕鱼皮胶原蛋白肽制备及其对肝细胞损伤的保护作用被引量：4
- 2017年
- 目的:研究鳕鱼皮胶原蛋白肽的制备工艺及不同浓度的鳕鱼皮胶原蛋白多肽对经LPS诱导损伤的Chang Liver细胞的修复作用。方法:以料液比、加酶量、酶解时间和酶解温度为因素,MTT试验所得细胞OD值为指标,通过正交试验探讨鳕鱼皮胶原蛋白肽的最佳酶解工艺,并经超滤、阴离子交换、分子层析对其纯化。通过试剂盒法检测该纯化肽作用Chang Liver细胞后,细胞内抗氧化酶和细胞上清液中转氨酶变化情况;采用Hoechst 33258染色法和Annexin V-FITC/PI双标流式细胞术观察鳕鱼皮胶原蛋白肽作用损伤Chang Liver细胞后的细胞凋亡情况。结果:最优酶解条件:以胰蛋白酶为水解酶,酶解温度50℃,p H 6,加酶量2 000 U/g,酶解时间8 h,经纯化得到蛋白肽GM2-2-3;GM2-2-3作用经LPS诱导损伤的Chang Liver细胞后,细胞氧化损伤明显减轻,细胞内SOD、CAT、GSH-PX活性上升,MDA的含量下降,并呈剂量依赖性;细胞上清液中AST、ALT、ALP、γ-GT、LDH活性有所下降,且呈剂量依赖性;与损伤组细胞相比,Chang Liver细胞形态较舒展,细胞染色质出现明显的聚集及边集化,细胞核皱缩现象减少,早期凋亡率降低,早期凋亡细胞变少。
- 滕芳芳胡晓斐刘晨晨杨最素黄芳芳丁国芳
- 关键词：鳕鱼皮胶原蛋白肽
- 水产胶原蛋白肽功能活性及其制备工艺研究进展被引量：10
- 2013年
- 概述了水产胶原蛋白及其肽的特点和制备技术,并阐述了水产胶原蛋白肽的多种功能特性,包括抑制血管紧张素转化酶、抗氧化、免疫调节、抑制酪氨酸酶及其它活性,揭示了其在食品、化妆品及医药制备等领域的广阔应用前景。
- 曾丽李丽王加斌杨最素丁国芳
- 关键词：酶解活性
- 沙蚕活性蛋白酶诱导人肺癌SPC-A-1细胞凋亡的机制研究被引量：7
- 2015年
- 本文探讨了沙蚕活性蛋白酶(Nereis active protease,NAP)诱导SPC-A-1细胞凋亡机制。采用MTT法检测NAP对SPC-A-1细胞的抑制作用,倒置显微镜及AO/EB染色观察SPC-A-1细胞的形态学的变化,采用流式细胞术检测细胞早期凋亡率和细胞膜电位的变化;并通过Western Blotting检测细胞中凋亡相关蛋白的表达变化。NAP对SPC-A-1细胞活性具有明显的抑制作用且呈现剂量和时间的依赖性;NAP作用后细胞出现凋亡的形态学特征;经流式细胞术检测结果显示,随着NAP作用浓度的增加,SPC-A-1细胞的早期凋亡率从13.50%提高到22.98%,且线粒体膜电位下降所占的百分率从12.95%提高到25.28%。Western Blotting结果显示,50μg/mL NAP作用24h后,Bax/Bcl-2的比率相对对照组明显增加了6.05倍;Cyt-C、Cleaved-Caspase 9、Cleaved-Caspase 3、Cleaved-PARP等含量显著上调,相对表达量分别达到对照组的2.32、3.07、3.68、1.36倍。NAP诱导SPC-A-1细胞凋亡的作用机理有可能是通过下调Bcl-2蛋白的表达、上调Bax蛋白的表达,进而诱导线粒体膜电位的下降,促使Cyt-C的转移以及激发Caspase家族发生级联反应最终导致SPC-A-1细胞的凋亡。
- 张国梅杨最素丁国芳黄芳芳赵玉勤
- 关键词：海洋药物沙蚕
- 鱿鱼墨多肽制备及其诱导DU-145和PC-3细胞早期凋亡研究被引量：7
- 2014年
- 目的:研究鱿鱼墨多肽酸法提取工艺及不同浓度鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞的增殖抑制和诱导凋亡作用。方法:以料液比、加酸量、酸解时间和酸解温度为因素,以酸解液的氨基氮含量为指标,通过正交试验确定提取鱿鱼墨多肽的酸解条件。采用CCK-8法检测其对DU-145和PC-3的生长抑制作用。采用Annexin V-FITC/PI双标记流式细胞术检测和AO/EB双染法,观察鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞的早期凋亡情况。结果:酸法提取鱿鱼墨多肽最佳组合为0.02 mol/L盐酸、酸提料液比1∶1、酸解时间2 h、酸解温度35℃;鱿鱼墨多肽对DU-145和PC-3细胞有增殖抑制作用,能诱导DU-145和PC-3细胞凋亡。结论:鱿鱼墨多肽能抑制DU-145和PC-3细胞增殖,并诱导其细胞凋亡。
- 李丽朱亚珠胡晓斐黄芳芳丁园芳丁国芳
- 关键词：PC-3细胞株
- 菲律宾蛤仔寡肽体外抗氧化、抗肿瘤活性研究
- 2013年
- 目的:研究菲律宾蛤仔酶解寡肽的体外抗氧化、抗肿瘤活性。方法:采用分光光度法测定寡肽对2,2'-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑啉-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、超氧阴离子(O2-.),羟自由基(.OH)的清除能力和寡肽的金属离子螯合能力,及四甲基偶氮唑蓝(MTT)法检测寡肽对肿瘤细胞DU-145的增殖抑制效应。结果:菲律宾蛤仔酶解寡肽有较显著的ABTS自由基[半数有效浓度(EC50)0.204 g.L-1]、羟自由基(EC500.815 g.L-1)和超氧阴离子自由基(EC500.066 g.L-1)清除能力和金属离子螯合能力(EC501.554 g.L-1)及有效的DU-145细胞增殖抑制活性(半数抑制浓度(IC50)5.202 g.L-1)。结论:菲律宾蛤仔酶解寡肽具有较好的抗氧化及抗肿瘤活性,可能与其低相对分子质量及蛋白酶酶解构成寡肽的结构相关。
- 李荣李丽王加斌丁国芳
- 关键词：菲律宾蛤仔寡肽抗氧化抗肿瘤自由基
- 乌贼墨多肽体外抗氧化活性研究被引量：7
- 2013年
- [目的]研究乌贼墨多肽体外抗氧化活性。[方法]采用分光光度法测定多肽对2,2’-连氮基-双-(3-乙基苯并二氢噻唑林-6-磺酸)二铵盐(ABTS)、1,1-二苯基-2-三硝基苯肼(DPPH)、羟自由基(·OH)的清除能力和还原能力,利用琼脂糖凝胶电泳检测多肽对羟自由基诱导的DNA损伤的保护作用。[结果]乌贼墨多肽具有明显清除ABTS自由基(半数有效浓度EC50为3.45 mg/ml)、·DPPH自由基(EC50为4.34 mg/ml)和羟自由基(EC50为3.30 mg/ml)的能力;当乌贼墨多肽的浓度达到5.00 mg/ml时,还原力达到0.387。[结论]乌贼墨多肽具有较好的抗氧化活性。
- 景奕文杨最素丁国芳黄芳芳
- 关键词：多肽抗氧化
