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国家重点基础研究发展计划(2010CB529704): 作品数：6 被引量：16H指数：3; 相关作者：姜勇刘爱华刘芸刘震西康瑞霞更多>>; 相关机构：南方医科大学南方医科大学南方医院东北林业大学更多>>; 发文基金：国家自然科学基金国家重点基础研究发展计划长江学者和创新团队发展计划更多>>; 相关领域：生物学医药卫生更多>>

细胞氧化应激过程中MK2调控磷酸化蛋白的鉴定: 目的:氧化应激反应(oxidative stress response)是当细胞内的活性氧簇水平高于细胞的抗氧化能力时产生的适应性反应。在真核细胞中,应激激活的蛋白激酶(stress-activated protein ...; 王蔚刘芸康瑞霞陈丽夏高晓邓鹏姜勇; 关键词：活性氧簇磷酸化蛋白 DIGE; 文献传递

TLR4信号通路调节单核细胞趋化机制的研究: 炎症(inflammation)是感染、非感染等多种损伤性刺激作用于机体,活化固有免疫系统的一种防御性反应,局部表现为红、肿、热、痛和功能障碍[1-3]。炎症是一把双刃剑,适度的炎症对机体是一种有效的防御措施,能起到杀灭...; 刘铮; 关键词：CCR2 G蛋白偶联受体 MCP-1; 文献传递

晚期糖基化终末产物受体存在异常定位并能促进前列腺癌细胞的增殖: 目的研究人晚期糖基化产物受体(Receptor for Advanced Glycation End Products,RAGE)在前列腺癌细胞中的亚细胞定位及其与前列腺癌细胞增殖的关系,为进一步研究RAGE在前列腺癌发...; 陆斌赵善超邓鹏姜勇; 关键词：细胞穿透肽负电荷; 文献传递

基于TAP技术的TAT-PTD相互作用膜蛋白的筛选与鉴定: 目的:基于串联亲和纯化(tandem affinity purification,TAP)技术的原理,利用硫酸乙酰肝素的类似物—肝素进行干预,筛选与人类Ⅰ型免疫缺陷病毒(HIV-1)的反式转录激活因子(trans-act...; 邓鹏冯国开刘芸吴向玲姜勇; 文献传递

沉默Toll样受体4基因表达的RNAi慢病毒载体的构建被引量：3: 2011年; 背景:Toll样受体4(toll-like receptor4,TLR4)是介导内毒素/脂多糖应答的主要受体,在由内毒素诱导的炎性反应的信号通路中发挥着重要作用。目的:构建人TLR4基因的RNA干扰慢病毒载体,并观察其对人脐静脉内皮细胞TLR4在蛋白水平的沉默效应。方法:利用Invitrogen在线软件设计人TLR4基因shRNA序列,合成、退火形成双链寡核苷酸后克隆到线性载体pENTRTM/H1/TO的黏性末端,并进行DNA测序。得到的阳性重组子再与慢病毒载体进行重组反应,从而获得干扰TLR4基因真核表达的慢病毒载体。在脂质体的介导下将慢病毒包装辅助复合体和TLR4基因的真核表达慢病毒载体导入293FT细胞包装病毒,测定病毒滴度,感染人脐静脉内皮细胞,检验其干扰TLR4基因表达的有效性。结果与结论:实验成功构建TLR4基因真核表达慢病毒干扰载体并获得相应的慢病毒,病毒滴度为8.7×106U/mL。免疫印迹杂交结果表明,所获得的慢病毒感染人脐静脉内皮细胞TLR4基因在蛋白水平的表达显著降低。实验成功构建了人TLR4基因慢病毒RNA干扰表达载体,并验证了其在人脐静脉内皮细胞上的有效性。; 阮静王旭李煜生刘爱华姜勇; 关键词：TOLL样受体4 RNA干扰慢病毒炎症

带有负电荷的Hela细胞穿透肽内化机制及生物学功能的初步研究: 目的:细胞穿透肽是近年来发现的具有穿透哺乳动物生物膜功能,并能介导大分子物质跨膜转导的一类小分子肽段,大多含有较多的碱性氨基酸。生理状态下,穿透肽分子的正电荷残基可与细胞表面蛋白聚糖多糖链的负电荷发生作用,介导了穿透肽与...; 刘芸刘爱华吴向玲江力玮罗海华邓鹏姜勇; 关键词：细胞穿透肽负电荷; 文献传递

髓样相关蛋白8的内化机制研究: 目的:MRP8蛋白是钙结合蛋白S100家族成员之一,其单体包含两个EF手型基序。MRP8具有丰富的生物学功能,与炎症高度相关,是许多急性和慢性炎症的重要调控因子。MRP8参与炎症、应激等反应的分子基础,尤其是相关信号过程...; 吴丽琼刘铮刘爱华邓鹏姜勇; 关键词：内化机制; 文献传递

带FLAG标签小鼠HuR真核表达载体的构建及其生物学功能的鉴定被引量：3: 2011年; 目的构建人抗原R(HuR)的真核表达载体,观察其在NIH3T3细胞中的表达并初步分析其生物学功能。方法提取NIH3T3细胞总RNA并反转录为cDNA,以cDNA为模板PCR扩增得到小鼠HuR编码序列,酶切后克隆至pcDNA3.1-FLAG载体;重组载体经PCR、酶切、测序鉴定正确后瞬时转染NIH3T3细胞,采用Western blotting分析HuR在细胞中的表达,并采用Real-time PCR检测HuR过表达对DUSP1mRNA水平的影响。结果成功构建了重组质粒pcDNA3.1-HuR-FLAG,Western blotting显示该质粒能在NIH3T3细胞中高效表达,Real-time PCR结果表明HuR过表达可提高细胞内DUSP1基因的mRNA水平。结论成功构建了带FLAG标签的HuR真核表达载体,该载体能在NIH3T3细胞中有效表达,并具有相应的生物学功能,为深入研究肿瘤细胞中HuR对DUSP1基因表达的调控机制奠定基础。; 李涛于文燕欧小利刘爱华梅柱中姜勇; 关键词：基因表达

不含POU结构域的八聚核苷酸结合蛋白(NONO)真核表达载体的构建及其细胞内定位被引量：1: 2011年; 目的构建小鼠的不包含POU结构域的八聚核苷酸结合蛋白(NONO)真核表达载体,并观察其在NIH3T3细胞中的表达和定位。方法提取BALB/c小鼠肝脏组织总RNA,通过RT-PCR扩增得到NONO编码序列,将该序列克隆至带有血凝素(HA)标记的载体pcDNA3-HA上,构建质粒pcDNA3-NONO-HA。通过PCR、双酶切鉴定构建正确后以脂质体为媒介转染NIH3T3细胞,采用荧光显微镜观察该融合蛋白在细胞内的表达及定位情况。结果重组质粒经PCR、酶切和测序鉴定证明构建正确,且能在NIH3T3细胞中得到大量表达。荧光显微镜观察发现NONO-HA融合蛋白在静息状态下主要分布于胞质中。结论成功构建带HA标签的NONO真核表达载体,该载体能在哺乳动物细胞中有效表达NONO-HA融合蛋白。; 吴翠玲张秀娟王娟刘爱华姜勇; 关键词：血凝素类基因表达重组融合蛋白质类

PRAK与Septin 8的相互作用研究: 目的:丝裂原活化蛋白激酶(mitogen-activated protein kinase,MAPK)是真核细胞中介导细胞外信号至细胞内反应的重要信号系统。p38是MAPK亚族之一,可通过磷酸化不同的底物参与不同的生物学...; 王丹梅柱中欧小莉邓鹏姜勇; 关键词：信号通路蛋白质-蛋白质相互作用丝裂原活化蛋白激酶应激刺激免疫共沉淀; 文献传递

国家重点基础研究发展计划(2010CB529704)