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应用DIGE与MS技术分离和鉴定乳热奶牛血浆差异表达蛋白: (目的)本研究旨在分离和鉴定奶牛乳热血浆差异表达蛋白,为乳热发生机理和防治提供新的线索.(方法)收集乳热与健康奶牛血浆各8份,同组等量混合,去除血浆中高丰度蛋白,应用荧光差异双向差异凝胶电泳(differencegel ...; 杨龙蛟夏成徐闯吴凌张洪友; 关键词：奶牛血浆差异表达蛋白 DIGE MS; 文献传递

奶牛亚临床低血钙症的蛋白质组学分析被引量：2: 2017年; 根据奶牛血浆钙浓度将奶牛分为试验组和对照组,并设置2个平行试验组。应用iTRAQ/LC-MS/MS技术对2组奶牛样品进行差异表达蛋白的筛选和鉴定,并结合生物信息学软件对试验结果进行分析。试验共得到398个差异表达蛋白,其中2个平行试验组重叠的蛋白为265个,经过筛选共得到14种具有统计学差异的表达蛋白。结合生物信息学分析中的基因功能分析,结果得到74个注释结果,细胞组成、分子功能和生物过程分别为6,12,55个。根据结果分析可知,奶牛亚临床低血钙症生理和病理现象能够从3个方面解释其生理和病理现象,分别是血钙调节、免疫与炎症反应和血液凝固与补体途径。本试验首次应用iTRAQ结合LC-MS/MS技术对亚临床低血钙症奶牛进行蛋白质组学分析,填补该技术对亚临床低血钙症的空白,并提供科学依据。; 舒适肖鑫焕王刚白云龙范子玲夏成吴凌张洪友杨威; 关键词：奶牛蛋白质组学 ITRAQ LC-MS/MS

基于SELDI-TOF-MS技术的奶牛乳热血浆蛋白质组学分析被引量：1: 2016年; 奶牛乳热是围产期奶牛营养代谢性疾病,对于奶牛乳热在病理方面少有血浆蛋白质组学的研究。本研究目的是探究奶牛乳热在蛋白质组学层面的变化。试验21头患有奶牛乳热的奶牛和59头健康奶牛作为试验动物。试验通过SELDI-TOF-MS技术检验得到24个差异肽段的峰值,其中10个肽段经过Swissport Protein数据库搜索鉴定为10种差异蛋白。结果相对于对照组,乳热组中表达上调的蛋白4个;表达下调的蛋白2个;还有既表达上调又表达下调的蛋白4个。结论本次试验应用SELDI-TOF-MS技术鉴定了几个在奶牛发生乳热时表达的差异蛋白质。这些发现也为以后揭示奶牛乳热代谢性改变提供了依据。; 舒适夏成张洪友许楚楚李昌盛肖鑫焕王刚; 关键词：SELDI-TOF-MS技术蛋白质组学奶牛

比较蛋白质组学技术及其在奶牛乳热研究方面的展望被引量：3: 2010年; 人类基因组计划被誉为20世纪的三大科技工程之一，其划时代的研究成果——人类基因组序列草图的完成，宣告了一个新的纪元——“后基因时代”的到来。人们认识到基因仅仅是遗传信息的载体，基因的功能主要通过其编码的蛋白质来实现，蛋白质是生命活动的真正执行者。蛋白质组学被认为是后基因组研究中的最主要部分，与基因组相比，蛋白质组的组成更为复杂，功能更为活跃，更直接切近生命活动的本质，其研究的应用前景也更广泛和直接。; 夏成杨龙蛟张洪友徐闯郑家三; 关键词：蛋白质组学技术人类基因组计划基因组序列草图牛乳生命活动

基于2D-DIGE/MALDI-TOF-MS技术筛选奶牛低血钙症生物标志物被引量：3: 2015年; 奶牛乳热(MF)是一种严重的营养代谢性疾病,通常被分为临床型及亚临床型低血钙症(SH)。奶牛乳热的诊断通常是应用奶牛血浆中的钙浓度进行判定的,但是在奶牛乳热整个发生发展的过程中,发病的具体机制仍是研究的盲点。在本试验中通过筛选奶牛乳热、亚临床低血钙症及健康奶牛间生物标志物进而解释可能的发生机制。选取27头奶牛作为实验动物,并根据其血浆钙浓度及有无临床症状分为乳热组(MF组)、亚临床低血钙组(SH组)和正常组(C组)。在组内每3个样品混合成为1个混合样本应用于2D-DIGE试验。结果得到110个差异蛋白质点,选取其中80个点进行MALDI-TOF-MS质谱分析,得到66个阳性结果并整合成为16种蛋白质。根据试验结果,选取A2M、HP和PON1进行Western blotting验证试验。本试验首次证实A2M、HP和PON1是奶牛乳热症3种新的生物标志物,并分析了其在乳热症发生过程中的可能作用机制。; 舒适夏成张洪友许楚楚李昌盛肖鑫焕王刚白云龙; 关键词：奶牛 WESTERN

丝氨酸蛋白抑制剂与围产期奶牛血钙的关系: 2012年; 本研究旨在了解围产期低血钙奶牛与正常奶牛的血浆Serine peptidase inhibitor(SERPIN)与血钙之间的关系。在分娩当天、产前14～7d和产后7～14d根据血钙浓度将实验牛分为正常对照组(2.20～3.5mmol/L,C)和低血钙组(<2.20mmol/L,T),每组3头。利用Westernblotting检测试验牛血浆SERPIN丰度。结果显示:SPI蛋白在奶牛发生低血钙时,表达上调。结论:本试验首次证明了血浆SERPIN与血钙浓度呈负关联,血钙可能通过SERPIN途径调节机体的凝血过程和免疫功能。; 舒适夏成徐闯张洪友吴凌郑家三杨龙蛟; 关键词：免疫印迹

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国家自然科学基金(30840060)