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中国博士后科学基金(2013M53139)
作品数:
1
被引量:8
H指数:1
相关作者:
时杨
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姚敏
钱琦
王理
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2014
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干预GPC-3基因转录对高转移潜能肝癌细胞增殖的抑制作用
被引量:8
2014年
目的探讨特异性磷脂酰肌醇蛋白多糖3(GPC-3)小发夹RNA(shRNA)转染对高转移潜能肝癌细胞增殖和肝癌生长的抑制作用。方法将构建与筛选GPC.3shRNA最有效序列转染MHCC-97H细胞,以荧光定量聚合酶链反应(PCR)或Western印迹分析mRNA或蛋白表达;以5-乙炔基-2’脱氧尿嘧啶核苷(EdU)、划痕和Transwell试验评估肝癌细胞增殖、迁移和侵袭能力;以Caspase-Glo@3/7荧光法分析细胞凋亡;以裸鼠移植瘤观察对肝癌形成与生长的影响,免疫组化分析瘤组织GPC-3、13-环连蛋白(catenin)、p-GSK3β及细胞周期蛋白(cyclin)D1表达。结果shRNA,质粒转染MHCC-97H细胞效率〉80%,GPC-3mRNA下降75.6%(t=15.473,P〈0.001),蛋白表达受抑;细胞增殖抑制71.1%(t=10.468,P〈0.001)、迁移抑制80.1%(t=32.697,P〈0.001)与侵袭抑制69.1%(t=39.647,P〈0.001);β-cateninmRNA抑制67.7%(t=18.4,P〈0.001);GlilmRNA上调53.3%(t=-4.824,P=0.008);干预组裸鼠肿瘤形成平均11.2d,显著长于阴性组5.5d和空白组5.3d(P〈0.001),瘤体积65.5mm3明显小于空白组404.8mm3和阴性组365.7mm3(P〈0.001);且瘤组织GPC-3、B-catenin、P-GSK313及cyclinDl等信号分子表达显著下调(P〈0.01)。结论干预GPC-3转录抑制肝癌细胞增殖、迁移和肿瘤生长,提示GPC-3为潜在的肝癌治疗分子靶目标。
姚敏
王理
时运
钱琦
蔚丹丹
时杨
陆少林
姚登福
关键词:
移植瘤
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