国家自然科学基金(39870757)
- 作品数：15 被引量：33H指数：3
- 相关作者：王新华傅强石学银张宏刘立伟更多>>
- 相关机构：第二军医大学同济大学附属东方医院中国人民解放军总医院更多>>
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- 相关领域：医药卫生更多>>
- 吗啡处理后原代培养的海马神经元CREB_1蛋白的改变被引量：1
- 2007年
- 目的研究急、慢性吗啡处理后原代培养的海马神经元cAMP反应元件结合蛋白(CREB1蛋白)的改变。方法取原代培养7d的成熟海马神经元,随机分为吗啡急性作用组、纳洛酮急性戒断组、吗啡慢性作用组、纳洛酮慢性戒断组和空白对照组,每组6皿细胞。采用细胞免疫荧光染色法检测CREB1蛋白相对含量。结果吗啡急性作用组和纳洛酮急性戒断组原代培养的海马神经元内CREB1蛋白表达没有影响,而吗啡慢性作用组海马神经元内CREB1蛋白表达明显增强(P<0.01),且纳洛酮慢性戒断组免疫荧光强度进一步增加(P<0.01),但与吗啡慢性作用组比较差异无统计学意义。吗啡慢性作用组海马神经元内CREB1蛋白较吗啡急性作用组表达明显增强(P<0.01),纳洛酮慢性戒断组较急性戒断组CREB1蛋白表达差异有统计学意义(P<0.01)。结论慢性、多次使用成瘾药物才引起CREB1蛋白表达增加,其机制可能是多次使用吗啡通过反复对细胞内信号转导途径的影响引起神经元细胞核CREB1蛋白的改变。
- 傅强王新华张宏
- 关键词：原代培养吗啡海马神经元
- 吗啡成瘾时脑细胞凋亡数目增加被引量：3
- 2012年
- 目的观察吗啡成瘾大鼠脑细胞凋亡数目的变化。方法将24只体重为190～210g的成年Sprague-Dawley大鼠随机分为吗啡依赖组、吗啡戒断组和对照组,每组8只。依据药物递增原则,吗啡依赖组和吗啡戒断组大鼠腹腔内注射吗啡13d,建立吗啡成瘾模型。吗啡戒断组大鼠在成瘾后予腹腔内注射纳洛酮5mg/kg,诱导戒断30min。对照组大鼠在相同的治疗时间予腹腔内注射0.9%氯化钠溶液。应用脱氧核苷酸末端转移酶介导的生物素化dUTP缺口末端标记技术(TUNEL)检测细胞凋亡,采用免疫组织化学方法检测Caspase-3蛋白表达情况。结果吗啡依赖组的戒断症状评分与对照组的差异无统计学意义(P>0.05),但显著低于吗啡戒断组(P<0.01),表明吗啡成瘾模型建立成功。吗啡依赖组和吗啡戒断组的大鼠海马区脑细胞凋亡百分率均显著高于对照组(P值均<0.01),吗啡依赖组与吗啡戒断组间的差异无统计学意义(P>0.05)。吗啡依赖组和吗啡戒断组的大鼠海马区脑细胞内Caspase-3蛋白表达阳性细胞百分率均显著高于对照组(P值均<0.01),吗啡依赖组与吗啡戒断组间的差异无统计学意义(P>0.05)。结论长期应用吗啡可诱发大鼠脑细胞异常凋亡,这可能是阿片类药物引起脑内神经改变的机制之一。
- 刘立伟王新华傅强吴青华傅舒昆
- 关键词：吗啡鼠脑细胞凋亡
- 脊髓麻醉联合硬膜外麻醉行肾移植术时合理脊髓麻醉平面的探讨被引量：2
- 2002年
- 目的 :探讨脊髓麻醉联合硬膜外麻醉行肾移植术时脊髓麻醉平面与麻醉效果的关系。 方法 :90名肾移植患者随机分为 3组 ,均采用硬膜外麻醉联合脊髓麻醉。 A组 (n=30 )脊髓麻醉平面调至 T3- 4,B组 (n=30 )为 T5- 7,C组 (n=30 )为 T8以下。观察和比较各组术中自脊髓麻醉开始至硬膜外麻醉开始用药时间和用药量、血压波动幅度和多巴胺用量以及术中不良反应的发生情况。结果 :自脊髓麻醉开始至硬膜外开始用药的时间 A组 >B组 >C组 (P<0 .0 5 )。硬膜外用药总量 A组
- 朱秋峰沈宏亮徐海涛袁红斌钟雪萍刘刚王新华
- 关键词：脊髓麻醉硬膜外麻醉肾移植术
- 吗啡成瘾大鼠四个脑区μ阿片受体的变化被引量：12
- 2002年
- 目的 :观察吗啡成瘾大鼠下丘脑、额叶皮质、海马和纹状体内μ阿片受体数量和基因表达的变化。方法 :剂量递增腹腔注射吗啡建立大鼠成瘾模型 ,断头处死大鼠后分离四个脑区 ,以 3H - DAGO为标记配体进行放射配体测定 ;以β- actin为内参照进行 RT- PCR。结果 :腹腔注射吗啡 9d后成功建立成瘾大鼠模型。在放射配体实验中 ,对照组下丘脑、额叶皮质、海马、纹状体的μ受体数量 (fm ol/ mg)分别为 12 6 .5± 2 7.9、12 2 .6± 2 1.2、135 .3± 12 .6、178.7± 2 6 .7;在成瘾组分别为 76 .9± 2 7.3、95 .9± 2 0 .1、6 7.8± 15 .6、138.9± 19.8,较对照组显著下降 (P<0 .0 5 )。 RT- PCR结果显示 ,对照组下丘脑、额叶皮质、海马、纹状体内μ受体 m RNA表达量分别为 9.3± 1.2、3.2± 0 .8、3.7± 0 .3、5 .0± 1.7;成瘾组分别为 1.0± 0 .7、2 .5± 1.1、1.3± 0 .5、1.7± 0 .8,除额叶皮质外均较对照组显著降低 (P<0 .0 5 )。结论 :大鼠在吗啡成瘾过程中脑内出现 μ受体基因表达的下降和 μ受体的下调。推测 μ受体的下调可能是引起吗啡成瘾的原因之一 。
- 孙雪峰王新华傅强石学银
- 关键词：放射配位体测定吗啡成瘾Μ阿片受体
- 急性或慢性吗啡依赖和戒断对大鼠脑组织CREB-1表达的影响
- 2006年
- 目的研究急性或慢性吗啡依赖和戒断大鼠脑组织环腺苷酸反应元件结合蛋白-1 (CREB-1)表达的变化。方法雄性SD大鼠30只,随机分为5组(n=6):空白对照组、急性吗啡依赖组、急性吗啡戒断组、慢性吗啡依赖组、慢性吗啡戒断组。急性吗啡依赖组每次背部皮下注射吗啡5 mg/kg,间隔2 h,连续8次;急性吗啡戒断组在急性吗啡依赖后3 h腹腔注射纳洛酮5 mg／kg,催促戒断30 min后处死大鼠。慢性吗啡依赖组每日吗啡用量分3次腹腔注射,从第一天用量5 mg/kg起,直到第12天递增至260 mg／kg,慢性吗啡戒断组在慢性吗啡依赖后的次日腹腔注射纳洛酮5 mg/kg,催促戒断24h后处死大鼠。用Western-blot法测定大脑皮层、伏隔核及海马CREB-1表达。结果与空白对照组比较,急性吗啡依赖、戒断组皮层、伏隔核和海马CREB-1表达差异无统计学意义(P>0．05),慢性吗啡依赖、戒断组皮层、海马CREB-1表达上调,伏隔核CREB-1表达下调(P<0．05);与慢性吗啡依赖组比较,慢性吗啡戒断组伏隔核CREB-1表达下调(P<0．05)。结论急性吗啡依赖、戒断对脑组织CREB-1表达无影响;而慢性吗啡依赖、戒断后不同脑区CREB-1表达不同。
- 傅强王新华傅骁勇张宏米卫东
- 关键词：吗啡依赖物质戒断综合征
- 吗啡依赖与戒断大鼠脑组织μ阿片受体的变化(英文)被引量：1
- 2004年
- 背景:内源性阿片肽-阿片受体系统的改变是阿片类药物成瘾的一个重要机制。在离体条件下,给予μ阿片受体拮抗剂或激动剂可以调节阿片受体水平。但不同的实验结果差别很大。目的:用光学放射自显影术对吗啡依赖与戒断大鼠脑组织μ阿片受体进行定位和定量研究。设计:完全随机分组实验研究。地点和对象:实验在第二军医大学长征医院麻醉科完成,对象为雄性SD大鼠30只,体质量180～220g,由第二军医大学动物实验中心提供。干预:30只SD大鼠随机分为吗啡依赖组、吗啡戒断组和生理盐水对照组,每组10只。依赖组和戒断组大鼠以腹腔注射吗啡的方法建立吗啡依赖模型,戒断组在成瘾后腹腔注射纳洛酮5mg/kg诱导戒断24h,对照组注射生理盐水。主要观察指标:大鼠不同脑区μ阿片受体特异性结合密度。结果:依赖组大鼠与对照组大鼠相比,额叶皮质、海马、纹状体、丘脑、下丘脑的μ受体特异性结合密度发生非常显著下降(t=11.54,17.82,15.80,8.35,13.78,P<0.01),下降幅度分别为22%,49%,21%,28%,39%;戒断组大鼠与吗啡依赖组比较,额叶皮质、海马、纹状体、丘脑、下丘脑的μ受体特异性结合密度发生了显著的上调(t=3.72,7.77,5.84,3.06,11.24,P<0.01),上调幅度分别为10%,38%,12%,13%,58%。但除下丘脑外(t=1.64,P>0.05)。
- 傅强王新华邹最宋建刚陈杞蒋健强
- 关键词：吗啡依赖阿片样放射自显影术物质禁断综合征
- 吗啡对原代培养海马神经元内Gi_2蛋白水平的影响
- 2006年
- 目的观察吗啡对原代培养海马神经元内Ⅱ型抑制性鸟苷酸结合蛋白(Gi2蛋白)水平的影响。方法取培养7天的成熟海马神经元,随机分为吗啡处理4h组(M4)、8h组(M8)、16h组(M16)、24h组(M24)、48h组(M48)和空白对照组(C),每组6孔。吗啡处理组加入终浓度为10μmol/L的吗啡,C组加入生理盐水。免疫荧光技术检测神经元内的Gi2蛋白水平。结果与C组比较,M16组、M24组和M48组海马神经元内Gi2蛋白水平显著降低(P<0·01),而M4和M8组无明显变化(P>0·05)。M48组海马神经元内Gi2水平明显低于M16、M24组(P<0·05)。结论吗啡可降低原代培养的海马神经元内Gi2蛋白水平,降低程度与吗啡处理时间密切相关。
- 吴青华傅强王新华刘立伟赵建华唐时荣
- 关键词：吗啡海马神经元荧光免疫测定
- 慢性吗啡依赖大鼠脑内G_(i2)蛋白的改变
- 2006年
- 目的研究慢性吗啡依赖大鼠腹侧背盖区(Ventraltegmentalarea,VTA)、伏隔核(Nucleusaccumbens,NAc)、前额皮质(Prefrontalcortex,PC)、海马(Hippocampus)及去甲肾上腺能神经中枢蓝斑(Locuscoeruleus,LC)五个脑区Gi2蛋白的改变,探讨慢性吗啡依赖的可能机制。方法18只SD大鼠随机分为三组:慢性吗啡依赖组、戒断组和空白对照组。慢性吗啡依赖组和戒断组腹腔注射吗啡,建立吗啡成瘾模型,戒断组腹腔注射纳络酮(5mg/kg)30min后断头处死各组大鼠,取出脑组织,进行冰冻切片。用免疫组化技术检测NAc、PC、LC、VTA和Hippocampus五个脑区相对Gi2蛋白水平。结果慢性吗啡成瘾组和戒断组与空白对照组相比,NAc区Gi2蛋白水平明显降低(P<0.01),LC区Gi2蛋白水平却明显升高(P<0.01),其它脑区未发现明显变化。结论慢性吗啡成瘾可引起大鼠脑内Gi2蛋白水平发生改变,但各脑区Gi2蛋白水平的改变并不相同。Gi2蛋白水平的改变可能是吗啡耐受和依赖潜在的分子机制。
- 吴青华傅强王新华刘立伟唐时荣
- 关键词：前额皮质伏隔核蓝斑
- 慢性吗啡处理对大鼠不同脑区前强啡肽原mRNA表达水平的下调作用被引量：1
- 2002年
- 目的·· :观察慢性腹腔注射(ip)吗啡对大鼠下丘脑、海马、纹状体中前强啡肽原mRNA(PPDmRNA)表达的影响。方法·· :20只SD大鼠随机分为吗啡依赖组和对照组;依赖组大鼠ip 吗啡12d,建立吗啡依赖模型 ,对照组注射生理盐水。于d13断头处死大鼠 ,取出下丘脑、海马、纹状体组织,以NorthernBlot印迹杂交检测其中PPDmRNA的表达水平。结果·· :依赖组大鼠下丘脑、海马、纹状体中PPDmRNA的表达水平分别下降至51.5 %±s4.7 %、81.3 %±s4.5 %、62.3%±s4.5 % ,明显低于生理盐水对照组 (P<0.05)。结论·· :吗啡依赖大鼠下丘脑、海马、纹状体中PPDmRNA的表达水平较生理盐水对照组有显著下降。
- 傅强王新华卢洋石学银袁红兵
- 关键词：吗啡阿片依赖
- CREB_1蛋白在大鼠急、慢性吗啡依赖和戒断中的表达变化被引量：2
- 2006年
- 目的研究急、慢性吗啡依赖和戒断对大鼠脑组织cAMP反应元件结合蛋白(CREB1)的表达调节作用。方法雄性SD大鼠36只,随机分为急性对照组、急性吗啡依赖组、急性吗啡戒断组、慢性对照组、慢性吗啡依赖组、慢性吗啡戒断组,每组6只。采用免疫组化方法测定不同脑区和核团CREB1蛋白表达水平。结果急性吗啡依赖和戒断抑制蓝斑CREB1蛋白表达。慢性吗啡依赖和戒断增加皮质、海马、蓝斑等脑区核团CREB1蛋白的表达,但是在慢性吗啡依赖和戒断时,伏隔核CREB1蛋白表达下降。结论急、慢性吗啡依赖和戒断时CREB1在大鼠皮质、海马、下丘脑、蓝斑、伏隔核等脑区的表达存在差异,可能与介导阿片类药物依赖信号转道通路的反应性不同有关。
- 傅强王新华张宏郝怡鑫
- 关键词：海马伏隔核蓝斑
