国家自然科学基金(30771616)
- 作品数：16 被引量：71H指数：6
- 相关作者：刘毅李芬刘伟刘国华陈文承更多>>
- 相关机构：湖南农业大学湖南省畜禽水产品质量检验检测中心湖南第一师范学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金长沙市科技计划项目湖南省科技计划项目更多>>
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- 火鸡组织滴虫检测方法研究进展
- 2009年
- 火鸡组织滴虫病是由火鸡组织滴虫引起的禽类盲肠和肝脏机能紊乱的一种急性原虫病。常规的组织滴虫诊断方法有光学显微镜法、血清学检测法等，但这些方法存在费时、灵敏度不高、特异性不强等缺点，容易出现漏检、错检现象。分子生物学、免疫组织化学和酶联免疫吸附试验等方法为组织滴虫病的临床诊断提供了快速、高效的检测方法，可为组织滴虫病的流行病学研究提供重要的参考依据。
- 宋海燕刘毅
- 关键词：组织滴虫PCR原位杂交免疫组化酶联免疫吸附试验
- 湖南省猬迭宫绦虫的线粒体nad5和rrnS基因的序列测定及种系发育分析被引量：7
- 2012年
- 本研究旨在阐明猬迭宫绦虫湖南分离株线粒体烟酰胺腺嘌呤二核苷酸(NADH)脱氢酶亚单位5基因(nad5)部分序列(pnad5)和核糖体小亚基基因(rrnS)部分序列(prrnS)的遗传变异情况,并用pnad5和prrnS序列重构猬迭宫绦虫与其他绦虫的种群遗传关系。利用聚合酶链反应(PCR)扩增猬迭宫绦虫的pnad5和prrnS,应用ClustalX 1.81程序对序列进行比对,再用Phylip3.67程序MP法和Mega4.0程序NJ法绘制种系发育树,并用Puzzle5.2程序构建最大似然树。结果显示,所获得的pnad5和prrnS序列与预期(片段的)长度一致,分别为531bp和328bp。种系发育树表明,湖南分离株与已知猬迭宫绦虫位于同一分枝。结果表明,由于猬迭宫绦虫pnad5和prrnS序列种内相对保守,种间差异较大,均可作为种间遗传变异研究的标记。
- 刘自逵赵光辉刘国华宋海燕李芬刘毅
- 关键词：线粒体DNA
- 黄鳝胃瘤线虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析
- (目的)研究黄鳝胃瘤线虫湖南分离株的核糖体DNA内转录间隔区(ITS)及5.8S rDNA序列的遗传变异情况,并用ITS序列重构胃瘤线虫与其它线虫的种群遗传关系。(方法)利用聚合酶链反应(PCR)扩增胃瘤线虫rDNA的I...
- 段柳春刘伟何鑫周小军刘智连郑艳琼刘毅
- 文献传递
- 10株火鸡组织滴虫18S rRNA基因的克隆及进化分析被引量：6
- 2011年
- 应用聚合酶链反应(PCR)鉴定湖南娄底(简称HMLD1-3)、湘潭(HMXT1-2)、永州(HMYZ1-3)和宁乡(HMNX1-2)共10株火鸡组织滴虫,并用18SrRNA部分序列重构火鸡组织滴虫与其它相近原虫的种群遗传关系。作者通过PCR扩增火鸡组织滴虫虫株的18S rRNA部分序列,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析。结果表明,来自湖南省的10株火鸡组织滴虫18SrRNA序列长度一致,均为532bp,与GenBankTM公布的火鸡组织滴虫序列相似性在97.5%以上,与其它原虫差异均大于20%。种系发育树分析表明,10个分离株与已知火鸡组织滴虫位于同一分枝。本研究证实该病原为火鸡组织滴虫,从分子生物学水平证明了湖南省存在火鸡组织滴虫。本研究为火鸡组织滴虫病诊断及火鸡组织滴虫种群体遗传学研究奠定了良好基础。
- 刘进辉彭俊宇宋海燕刘毅
- 关键词：RRNA
- 湖南省部分地区商品鸡异刺线虫感染情况调查被引量：3
- 2009年
- 为了了解湖南省商品鸡异刺线虫感染情况,2007年2月～9月,笔者应用寄生虫学完全剖检法,对湖南省长沙、湘潭、永州、常德和娄底五个地区的275羽商品鸡,进行了鸡异刺线虫的感染情况调查。结果显示,商品鸡总体感染率为42.2%(116/275),平均感染强度为10.4。丘陵区鸡异刺线虫的感染率最高,感染率介于70%～100%之间;湖区和市区的感染率依次居后,分别只有36.4%和32.3%。
- 彭俊宇宋海燕陈文承刘国华陈江李芬刘伟刘毅
- 关键词：异刺线虫
- 蛇钩口线虫长沙分离株ITS基因的克隆及序列分析被引量：1
- 2012年
- 为研究蛇钩口线虫长沙分离株的核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区(ITS)序列的遗传变异情况,并利用ITS序列构建蛇钩口线虫与其它线虫的种群遗传关系,本研究利用PCR扩增蛇钩口线虫rDNA的ITS片段,并克隆至pGEM-T载体中进行序列测定及分析。结果显示,长沙市各分离株的ITS序列长度均为734 bp,与其它线虫的同源性均低于83.9%,而与十二指肠钩口线虫的同源性较高。本研究为蛇钩口线虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定了基础。
- 王挺李芬何鑫段柳春林源盛晓枫刘伟刘毅
- 关键词：ITSPCR
- 火鸡组织滴虫体外微量培养方法的改进被引量：2
- 2011年
- 本研究通过改进火鸡组织滴虫在M199培养液中的体外微量培养方法,为进一步研究其诊断、生活史及致病机制奠定基础。通过将人工体外培养的组织滴虫在显微镜下反复检查、稀释后用毛细吸管吸取单个虫体至1.5mL的离心管中,于40℃恒温箱中进行培养,并用镜检和PCR技术检查虫体是否增殖。结果显示有2个离心管有虫体增殖。
- 何静丁颖彭俊宇李芬
- 关键词：组织滴虫PCR
- 湖南省猬迭宫绦虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析被引量：4
- 2011年
- 利用聚合酶链反应（PCR）扩增猬迭宫绦虫rDNA的ITS-1、5.8S及ITS-2片段,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析。结果显示,所获得的ITS及5.8S rDNA序列总长存在一定差异,为1 369~1 393 bp,包含部分的18、28S及全部的ITS-1（662~687 bp）5、.8S（138 bp）及ITS-2（457~475 bp）序列。由于猬迭宫绦虫ITS序列种内相对保守,种间差异较大,故可作为种间遗传变异研究的标记。
- 刘自逵刘国华戴荣四刘伟李芬徐平原胡涛刘毅
- 关键词：RDNA
- 黄鳝胃瘤线虫ITS及5.8S rDNA的克隆及序列分析被引量：6
- 2012年
- 本研究旨在阐明黄鳝胃瘤线虫湖南分离株的核糖体DNA(rDNA)内转录间隔区(ITS)及5.8SrDNA序列的遗传变异情况,并用ITS序列重构胃瘤线虫与其它线虫的种群遗传关系。利用聚合酶链反应(PCR)扩增胃瘤线虫rDNA的ITS-1、5.8S及ITS-2片段,将PCR扩增出的片段纯化后克隆至pGEM-T Easy载体,重组质粒通过菌落PCR鉴定后,对阳性菌落进行序列测定并进行序列分析。结果显示所获得的胃瘤线虫ITS及5.8SrDNA序列总长存在一定差异(922～927bp),其中包含部分的18S、28S及全部的ITS-1(350～351bp)、5.8S(102bp)及ITS-2(340～344bp)序列。本研究系国内首次报道胃瘤线虫的ITS序列,其结果为黄鳝胃瘤线虫的分类鉴定以及进一步的分子流行病学调查和群体遗传研究奠定了基础。
- 段柳春刘伟徐平源何鑫周小军刘智连郑艳琼刘毅
- 关键词：黄鳝
- 蛇寄生线虫的种类、分布与危害被引量：2
- 2013年
- 目前对蛇寄生线虫的报道显示共有14个科、分属于9个目,分布于东亚、东南亚、澳洲、欧美、非洲等地区,对蛇甚至人类造成很大的危害。本文对蛇寄生线虫的种类、分布与危害进行综述,以期对相关研究有所启发或提供参考。
- 王挺刘伟刘毅
- 关键词：寄生线虫
