国家自然科学基金(81071201)
- 作品数：5 被引量：13H指数：3
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- 神经干细胞移植治疗APP／PS1小鼠磁共振波谱及行为学对照研究被引量：5
- 2013年
- 目的应用氢质子磁共振波谱（Protonmagneticresonancespectroscopy，1H—MRS）技术及Mor-ris水迷宫（Morriswatermaze，MWM）检测，探讨神经干细胞（NSCs）移植治疗APP／PS1转基因阿尔茨海默病（Alzheimerdisease，AD）小鼠的效果。方法C57BL／6小鼠NSCs培养、扩增。12月龄APP／PS1转基因AD小鼠（实验组）30只与野生型小鼠（对照组，C组）15只作为实验对象。实验组小鼠随机数字表法分为A、B两组，分别移植NSCs（A组）及PBS（B组）至AD双侧海马CA1区，对照组不作处理。移植前及移植后4周行1H．MRS成像及MWM测试，并与组织病理学结果进行对照研究。结果1H—MRS显示移植前A、B及c组小鼠的NAA／Cr值分别为1．01±0．08、1．03±0．05及1．21±0．05，mI／Cr值分别为0．69＋0．05、0．71±0．06及0．58±0．06，A、B组间差异均无统计学意义（P〉O．05），但均较c组差异有统计学意义（P〈0．05）。移植4周后A组NAA／Cr值升高（1．18±0．09），mI／Cr值降低（0．53±0．04），均较B组相同时点差异有统计学意义（P〈0．05），与c组相比差异无统计学意义（Jp〉0．05）。行为学检测显示移植后A组逃避潜伏期明显缩短，较B组差异有统计学意义（P〈0．05）；移植后A组小鼠平台停留时间[（35．21±5．44）S]、穿越平台次数[（5．75±3．23）次]也较B组明显增加（P〈0．05）。Nissl＇s染色显示AD小鼠在NSCs移植后海马区神经元细胞数较未移植AD小鼠明显增多（P〈0．05）。结论NSCs移植可明显改善AD小鼠的学习、记忆能力，1H—MRS可从功能代谢水平有效的评价NSCs移植治疗AD的效果。
- 陈双庆蔡庆沈玉英王培军滕皋军臧风超
- 关键词：神经干细胞阿尔茨海默病磁共振波谱
- 用RNA干扰沉默P2X7受体抑制小胶质细胞释放炎性介质的探讨被引量：2
- 2014年
- 目的观察RNA干扰（RNAi）沉默小胶质细胞内的P2X7受体（P2X7R）对小胶质细胞释放炎性介质白细胞介素10（IL-1β）、肿瘤坏死因子α（TNF-α）和一氧化氮（NO）的影响。方法构建靶向P2X7 R基因的小干扰RNA（siRNA）。以脂质体为转染剂将siRNA转染到经8淀粉样蛋白（Aβ1-42）激活的原代培养的小胶质细胞内。根据刺激物不同分为Aβ1-42、Aβ1-42／siNC、Aβ1-42／siP2X7R及空白对照组。处理48h后，收集各组小胶质细胞，用CCK-8检测细胞存活率，用Real-Time PCR和Western blot检测P2X，R的mRNA和蛋白表达水平，用免疫细胞化学染色观察细胞形态及P2X7R免疫反应强度；收集各组细胞上清液测定IL-1β、TNF-α和NO浓度。结果 Aβ1-42和siRNA对小胶质细胞存活率没有影响，与空白对照组比较差异无统计学意义。RNA干扰后Aβ1-42／siP2X，R组P2X7R的mRNA和蛋白表达均显著下降，免疫细胞化学染色该组小胶质细胞活性和P2X7R免疫反应强度均降低。沉默P2X7R后，Aβ1-42、Aβ1-42／siNC、Aβ1-42／siP2X，R及空白对照组细胞上清液IL-1β浓度分别为（52．54±3．21）μg／L、（54．94±2．54）μg／L、（28．70±3．58）μg／L和（24．55±4．34）μg／L；TNF-α浓度分别为（64．40±4．80）μg／L、（60．94±1．63）μg／L、（25．69±3．13）μg／L和（19．21±1．97）μg／L。Aβ1-42／siP2X7R组细胞上清液IL-1β及TNF—α浓度均低于Aβ1-42和Aβ1-42／siNC组（P〈0．05），与空白对照组比较差异无统计学意义。Aβ1-42／siP2X7R组细胞上清液NO浓度为（1．33±0．19）μmol／L，低于A艮42组（4．49±0．28）μmol／L和Aβ1-42／siNC组（4．78±0．33）μmol／L，与空白对照组（1．07±0．36）μmol／L比较差异无统计学意义。结论RNA干扰可有效沉默小胶质细胞内的P2X7R抑制小胶质细胞释放炎性介质IL-1β、TNF—α和NO。P2X7R有望成为RNA干扰治疗阿尔茨海默病的一个新靶点�
- 倪炯王培军王国良梁梃
- 关键词：小神经胶质细胞
- 如何规范进行磁共振临床和基础研究
- 2014年
- 近年来应用磁共振（MR）技术进行临床和基础研究的论文越来越多，本文针对一些共性问题，就如何选题、如何规范实验设计提出若干建议。
- 王培军王湘彬
- 关键词：磁共振
- 磁标记神经干细胞在APP／PS1转基因阿尔茨海默病小鼠脑内迁移的MRI研究被引量：4
- 2013年
- 目的利用MRI示踪研究超顺磁性氧化铁（SPIO）标记的神经干细胞（NSCs）在APP／PS1转基因阿尔茨海默病（AD）小鼠脑内的迁移特点。方法培养、扩增C57BL／6小鼠NSCs，制备菲立磁（Feridex）和左旋多聚赖氨酸复合物对NSCs进行标记，透射电镜进行鉴定。取12月龄APP!PSI转基因AD小鼠24只，随机数字表法等分为A、B两组，分别移植磁标记NSCs（A组）和未标记NSCs（B组）至小鼠右侧海马区，相同月龄同窝出生的野生型小鼠12只作为对照组（C组），移植磁标记NSCs。移植后1、2、4及6周分别运用7．0T高场强MR扫描仪对移植的NSCs进行活体示踪，并对照组织病理学检测结果进行对照研究。结果C57BL／6小鼠NSCs培养及扩增成功，透射电镜可见标记细胞胞质内大量含铁颗粒。MRI显示移植后1周，在T，wI及T2＊WI上可见A组小鼠海马区注射点处出现类圆形低信号影，以EWI最明显；移植后2周，观察到低信号沿移植点向周围弥漫扩散，范围逐渐变大；移植后4周，低信号范围更大，几乎遍及整个海马区，但低信号强度减低；移植后6周，MRI显示低信号影基本消失。B组小鼠各时点移植区均无明显的低信号改变。C组小鼠尽管在移植磁标记NSCs后在海马区显示低信号影，但其大小和位置未出现明显的改变。普鲁士蓝染色观察到磁标记NSCs在AD小鼠海马区的迁移在各时点基本上与MR影像相对应。结论NSCs移植到APP／PS1转基因AD小鼠海马区后向周围发生弥散性、不定向迁移，利用MRI技术可以对移植后的磁标记NSCs进行活体示踪。
- 陈双庆蔡庆沈玉英李铭华臧风超王培军滕皋军
- 关键词：阿尔茨海默病干细胞移植
- 神经干细胞移植治疗APP—PS1转基因阿尔茨海默病小鼠的1H—MR波谱研究被引量：3
- 2012年
- 目的 探讨1 H-MRS评价神经干细胞（NSCs）移植治疗APP-PS1转基因阿尔茨海默病（AD）小鼠疗效的应用价值.方法 C57BL/6小鼠NSCs培养、扩增.12月龄的APP-PS1转基因AD小鼠30只随机数字表法等分为A、B2组,分别移植NSCs及磷酸盐缓冲液（PBS）至双侧海马CA1区；正常小鼠15只（野生型）作为对照组（C组）不作处理.应用7.0T高场强MR仪分别在移植前及移植后6周行1 H-MRS,测量海马区N-乙酰天冬氨酸（NAA）、谷氨酸（Glu）、肌醇（mI）、胆碱（Cho）及肌酸（Cr）的峰下面积,分析NAA/Cr、Glu/Cr、mI/Cr及Cho/Cr的变化并与Nissl染色与电镜检查结果进行对照研究.组间各指标的比较采用单因素方差分析.结果 C57BL/6小鼠NSCs培养成功.1HMRS显示移植前A、B、C3组的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr分别为0.89 ±0.05、0.88 -±0.04、1.15±0.05,0.40±0.03、0.39±0.03、0.45±0.05,0.67±0.05、0.67±0.05、0.52±0.04,差异有统计学意义（F值分别为148.918、7.529、59.468,P值均＜0.01）.其中A、B2组AD小鼠的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr值差异无统计学意义（t值分别为0.147、0.006、0.207,P值均＞0.05）,但均较C组差异有统计学意义（t值分别为0.255、0.467、0.171及0.269、0.527、0.151,P值均＜0.05）.移植6周后A、B、C3组的NAA/Cr、Glu/Cr及mI/Cr分别为1.13±0.07、0.86±0.05、1.14±0.05,0.45±0.04、0.38±0.02、0.44±0.03,0.58±0.04、0.67±0.04、0.53±0.04,差异有统计学意义（F值分别为112.092、23.076、44.367,P值均＜0.01）.其中A组NAA/Cr及Glu/Cr值升高,mI/Cr值降低,较B组差异均有统计学意义（t值分别为0.271、0.071、0.089,P值均＜0.05）,与C组相比NAA/Cr及Glu/Cr值差异无统计学意义（t值分别为0.013、0.012,P值均＞0.05）,但mI/Cr值差异有统计学意义（t=0.046,P＜0.05）.各组小鼠Cho/Cr值在移植前后差异均无统计学意义（P值均＞0.05）.Nissl染色显示AD小鼠在NSCs移植后海马区神经元细胞数较未移植AD小鼠明显增多.电镜�
- 陈双庆蔡庆沈玉英李铭华张炜臧风超王培军滕皋军
- 关键词：阿尔茨海默病干细胞磁共振波谱学小鼠转基因
