国家自然科学基金(81172835)
- 作品数：15 被引量：27H指数：3
- 相关作者：郑配国明亮张俊华魏忠伟刘红春更多>>
- 相关机构：郑州大学第一附属医院郑州大学上海交通大学医学院附属新华医院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金河南省自然科学基金河南省医学科技攻关计划项目更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学更多>>
- EAE小鼠胸腺主要凋亡细胞群及其细胞凋亡机制的初步探讨被引量：5
- 2014年
- 目的初步探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)小鼠胸腺主要凋亡细胞群及其胸腺细胞的凋亡机制。方法用MOG35-55/CFA乳化剂背部皮下免疫C57BL/6小鼠,诱导EAE。观察实验动物的临床症状和脊髓病理改变;计数2组小鼠胸腺细胞总数;应用流式细胞仪分析2组小鼠胸腺CD4+CD8+双阳性(DP),CD4+/CD8+单阳性(SP)和CD4+Foxp3+调节性T细胞(Treg)的比例变化。结果 EAE组模型诱导成功,HE染色发现脊髓组织炎症细胞浸润;EAE小鼠发病高峰期胸腺细胞总数和胸腺DP细胞显著低于对照组(P<0.01);SP细胞的比例高于对照组(P<0.05),但是其绝对值低于对照组(P<0.01)。结论 EAE小鼠胸腺细胞的主要凋亡细胞群是CD4+CD8+DP细胞,其可能凋亡机制是通过加速DP细胞向SP细胞的分化,从而加快DP细胞凋亡和SP细胞释放入外周并浸润中枢神经系统。
- 张俊华郑配国马雪涵薛海阔明亮刘红春
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎胸腺凋亡
- 间充质干细胞治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎的疗效和免疫调节机制被引量：4
- 2015年
- 目的观察间充质干细胞(MSC)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的疗效并探讨其免疫调节机制。方法用髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG35-55)和弗氏完全佐剂诱导建立C57BL/6小鼠EAE模型,随机分为MSC治疗组和EAE组。分离纯化培养GFP-C57BL/6小鼠骨髓MSC细胞。在EAE诱导后的第15天,MSC治疗组以每只1×106/400μL的量经尾静脉注射MSC细胞,EAE组尾静脉注射400μL PBS。采用临床评分和脊髓组织切片评估小鼠的发病情况,ELISA检测小鼠外周血细胞因子肿瘤坏死因子α(TNF-α)、干扰素γ(IFN-γ)、白介素4(IL-4)和转化生长因子β(TGF-β)的含量,流式细胞术分析小鼠脾脏细胞中CD4+Foxp3+T细胞(Treg)的比例变化和GFP+细胞在受体小鼠体内的比例变化。结果与EAE组相比,MSC治疗组小鼠的临床评分降低(P<0.05);脊髓组织切片中T细胞浸润减少;血浆中细胞因子IL-4和TGF-β的含量升高,而IFN-γ和TNF-α降低;脾脏细胞中CD4+Foxp3+T细胞(Treg)的比例明显升高。移植10d后MSC消失。结论 MSC移植对小鼠EAE疗效显著。MSC通过增加血浆中抗炎因子IL-4和TGF-β的含量,降低促炎因子IFN-γ和TNF-α的含量,从而促使原始T细胞向Treg细胞分化,发挥免疫调节作用,且MSC消失后一段时间仍对EAE有一定治疗作用。
- 张俊华郑配国马雪涵刘红春明亮
- 关键词：间质干细胞实验性自身免疫性脑脊髓炎调节性T淋巴细胞免疫调节
- 冬凌草甲素减轻实验性自身免疫性脑脊髓炎病变的免疫机制被引量：4
- 2015年
- 目的观察冬凌草甲素(ORI)对实验性自身免疫性脑脊髓炎(EAE)的预防作用,并探讨其可能机制。方法 EAE小鼠发病前给予ORI治疗,以PBS为阴性对照,观察各组小鼠发病情况。通过对EAE小鼠临床评分和脊髓病灶病理学检测判断ORI的预防效果;通过5,6-羧基荧光素二乙酸盐琥珀酰亚胺酯(CFSE)标记检测CD4+T细胞增殖,流式细胞术检测白细胞介素17(IL-17)阳性细胞占CD4+T细胞的百分比、γ干扰素(IFN-γ)阳性细胞占CD4+T细胞的百分比,ELISA检测IL-1β水平。结果 ORI能显著改善EAE的临床评分、减少脊髓病变部位炎性细胞浸润;ORI能抑制EAE小鼠髓鞘少突胶质细胞糖蛋白(MOG)反应性T细胞增殖;与PBS组相比,ORI组IFN-γ+CD4+T细胞和IL-17+CD4+T细胞减少;ORI抑制脾脏肿大、淋巴细胞增殖和IL-1β分泌。结论 ORI能减轻EAE严重程度,与减少IL-1β水平、抑制T细胞增殖及辅助T细胞分化有关。
- 郑配国魏高辉符含笑魏忠伟孙晓旭张磊孟宪春明亮
- 关键词：冬凌草甲素实验性自身免疫性脑脊髓炎Γ干扰素白细胞介素17IL-1Β
- CD11b在小鼠脾脏和淋巴结细胞中的差异表达及其功能被引量：2
- 2014年
- 目的研究CD11b在小鼠脾脏和淋巴结细胞的差异表达及其生物学特性。方法流式细胞术分析CD11b在C57BL/6小鼠脾脏和淋巴结细胞、不同T细胞亚群的表达及其与T细胞活化的关系。结果 CD11b在脾脏细胞的表达(19.9±2.5)%略高于淋巴结的细胞(16.0±4.2)%(P=0.026)。脾脏中CD11b主要表达于CD3-细胞(14.93±0.94)%,淋巴结中CD11b主要表达于CD3+细胞(12.52±1.32)%;在脾脏和淋巴结T细胞亚群中,CD11b均主要表达于CD4+T细胞。进一步分析发现,CD4+CD11b+细胞高表达CD44和CD62L,且Freund完全佐剂(CFA)激活后的CD4+T细胞高表达CD11b。结论 CD11b主要表达于脾脏的非T细胞和淋巴结的T细胞。T细胞中CD11b主要表达于CD4+T亚群,且CD11b表达与T细胞活化有关。
- 郑配国马雪涵张俊华孙晓旭明亮
- 关键词：CD44CD62LCD11B细胞活化
- 冬凌草甲素抑制小鼠皮片移植排斥反应的机制研究被引量：2
- 2013年
- 目的探讨冬凌草甲素对皮片移植排斥反应的影响及其可能机制。方法BALB／c小鼠移植C57BL／6小鼠皮肤，移植当天开始腹腔注射冬凌草甲素（冬凌草甲素组）、环孢素A（CsA组）和磷酸盐缓冲液（对照组），观察移植皮片存活时间及炎症细胞浸润情况；移植后第7天检测脾细胞中调节性T淋巴细胞（Treg细胞）表达；采用混合淋巴细胞反应分析冬凌草甲素对同种异体反应性T淋巴细胞增殖的影响。以刀豆蛋白刺激正常BALB／c小鼠的脾细胞，培养体系中加入不同浓度的冬凌草甲素，培养18h后以流式细胞仪分析T淋巴细胞凋亡情况。BALB／C小鼠腹腔注射冬凌草甲素，分别于用药后6h和1、2、4、8、12和16d采取外周血，流式细胞仪测定T淋巴细胞及中性粒细胞的含量。并计数用药后第8天的脾细胞数和T淋巴细胞、吞噬细胞所占比例。结果冬凌草甲素组移植皮片的存活时间为（15．8±1．5）d，明显长于对照组的（12．3±1．2）d和CsA组的（13．3±1．1）d（P〈0．05）；冬凌草甲素组移植皮片的浸润细胞数明显少于对照组；冬凌草甲素组Treg细胞占（17．6±3．6）％，明显高于对照组的（14．8±2．3）％（P〈0．05）；在体外，冬凌草甲素抑制反应性T淋巴细胞增殖，诱导T淋巴细胞凋亡，呈剂量依耐性；在体内，使用冬凌草甲素者外周血T淋巴细胞下降约50％，中性粒细胞比例相对增加；使用冬凌草甲素第8天，小鼠脾细胞总数变化较小，但T淋巴细胞比例显著降低，吞噬细胞相对升高（P〈0．05）。结论冬凌草甲素可抑制移植排斥反应，延长移植皮片的存活时间，其机制可能为冬凌草甲素上调Treg细胞表达、抑制T淋巴细胞增殖并促进其凋亡。
- 郑配国郭文治张嘉凯张水军
- 关键词：冬凌草甲素移植排斥细胞凋亡小鼠
- T细胞定向迁移诱导实验性自身免疫性脑脊髓炎小鼠胸腺萎缩被引量：1
- 2015年
- 目的 初步探讨实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）小鼠胸腺萎缩的机制.方法 髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG）免疫C57BL/6小鼠诱导EAE,卵清白蛋白（OVA）免疫的小鼠作为对照;不同时间点计数胸腺、脾脏、淋巴结细胞总数,检测脾脏中胸腺来源细胞及中枢神经系统（CNS）浸润细胞.结果 MOG肽成功诱导EAE动物模型,小鼠出现典型的肢体运动功能障碍,脊髓可见大量炎性细胞浸润;MOG和OVA免疫均诱导胸腺细胞增加,第5天达到高峰,随后逐渐下降;EAE发病后胸腺细胞迅速减少,发病高峰期几乎完全消失,胸腺严重萎缩;MOG和OVA免疫后脾脏和淋巴结细胞总数持续升高,新近胸腺来源的T细胞增加尤其明显;EAE发病后脾脏T细胞总数减少,CNS浸润淋巴细胞总数增加.结论 大量T细胞在胸腺发育成熟并释放到外周,进而定向迁移至CNS诱导EAE是胸腺萎缩的主要原因.
- 郑配国张俊华马雪涵魏高辉魏忠伟孟宪春董锐明亮
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎胸腺萎缩凋亡小鼠
- 可溶性MOG35-55多肽预防实验性自身免疫性脑脊髓炎机制的初步研究被引量：1
- 2019年
- 目的:探讨效应T细胞在可溶性MOG35-55多肽预防实验性自身免疫性脑脊髓炎中的作用。方法:脊髓病理切片观察中枢神经系统细胞浸润情况;流式细胞术检测效应T细胞表面标志物表达情况;ELISA检测脾脏中淋巴细胞上清液中干扰素-γ、白细胞介素-17、肿瘤坏死因子-α三种细胞因子的分泌。结果:MOG多肽成功诱导自身免疫性脑脊髓炎动物模型,对照组小鼠脊髓可见大量炎性细胞浸润,脾脏中MOG组T细胞总数增加,CD44highCD62Llow表达增高;中枢神经系统中MOG组T细胞总数减少,CD44highCD62Llow表达较EAE组低,干扰素-γ、白细胞介素-17、肿瘤坏死因子-α的分泌明显高于EAE组。结论:在实验过程中,效应T细胞被束缚于外周器官,MOG35-55多肽可能有效阻止了效应T细胞向中枢神经系统迁移,这可能是MOG多肽能够预防自身免疫性脑脊髓炎的机制之一。
- 魏忠伟郑配国李付广
- 关键词：自身免疫性脑脊髓炎效应性T细胞脾脏
- CD4＋Foxp3＋调节性T细胞表达升高提示免疫应答而非移植耐受被引量：2
- 2017年
- 目的 探讨诱导CD4＋Foxp3＋调节性T细胞（regulatory T cells ，Tregs）表达的机制及其在移植耐受中可能的作用。方法 构建新生移植耐受小鼠动物模型，分析移植耐受与同种异体反应性T细胞、Tregs表达及嵌合体的关系；运用过继转移实验、EGFP转基因小鼠，研究移植排斥过程中Tregs表达及抗原特异性。结果 新生耐受小鼠形成嵌合体，同种异体反应性T细胞被克隆清除，但Tregs表达与初始小鼠相同；同种异体反应性T细胞识别抗原诱导免疫反应，Tregs在移植排斥反应中表达升高，且不仅同种异体反应性Tregs表达升高，非同种异体反应性Tregs表达也升高。结论 Tregs在移植排斥中非特异性诱导产生，可能为一种负反馈免疫调控机制。
- 杨潇郑欣怡马攀红符含笑郑配国
- 关键词：移植耐受移植排斥
- 可溶性MOG35-55对实验性自身免疫性脑脊髓炎的作用分析被引量：1
- 2017年
- 目的探讨可溶性髓鞘少突胶质细胞糖蛋白（MOG35-55）预防和治疗实验性自身免疫性脑脊髓炎（EAE）的机制。方法通过临床评分、免疫组化、细胞计数等方法，评价腹腔注射可溶性MOG35-55的治疗效果，卵清白蛋白（OVA）作为对照；运用过继转移试验、Transwell试验、流式细胞术，分析体内、体外MOG35-55、OVA对MOG-T细胞迁移、脾脏抗原提呈细胞（APCs）活化的作用。结果MOG35-55抑制中枢神经系统（CNS）淋巴细胞浸润，预防EAE；MOG35-55抑制MOG-T细胞向CNS迁移，抑制外周淋巴器官萎缩；MOG35-55诱导脾脏APCs活化，活化APCs可招募MOG-T细胞、影响MOG-T细胞迁移。结论MOG35-55通过诱导脾脏APCs活化、APC-T相互作用，抑制MOG-T细胞向CNS迁移，预防EAE。
- 郑配国马攀红董锐魏忠伟符含笑明亮
- 关键词：实验性自身免疫性脑脊髓炎免疫耐受抗原提呈细胞细胞迁移
- 新生期移植耐受依赖嵌合体的形成被引量：1
- 2012年
- 目的研究新生期移植耐受机制，探讨免疫系统发育程度、嵌合体在诱导移植耐受中的作用。方法雄性C57BIM6（或GFP-C57BL／6）小鼠与雌性BALB／c小鼠杂交获得F1（或GFP—F1）小鼠，不同剂量F1或GFP—F1小鼠脾脏细胞（辐照处理的细胞作为对照）静脉注射到新生24hC57BL／6小鼠体内诱导耐受，6周后皮肤移植、混合淋巴细胞反应实验检测小鼠耐受程度，流式细胞分析小鼠外周血细胞嵌合程度。结果具有增殖活性的F1小鼠脾脏细胞可诱导新生C57BL／6小鼠嵌合体和针对F1小鼠皮肤移植物的特异性耐受；辐照处理的F1小鼠脾脏细胞不能诱导嵌合体，也没有耐受产生；长期耐受小鼠的嵌合程度明显大于慢性排斥小鼠的嵌合程度（分别为6．48％±4．02％和1．57％±0．89％），两组间的差异具有统计学意义；供体细胞剂量高则诱导小鼠的耐受程度高，3×10^7剂量F1小鼠脾脏细胞可诱导80％的小鼠长期耐受，0．7×10^7剂量诱导仅使移植物生存时间轻度延长。结论新生期移植耐受依赖嵌合体的形成，嵌合体使同种异体反应性T细胞特异性克隆清除。
- 郑配国全志伟明亮张水军
- 关键词：嵌合体
