江苏省博士后科研资助计划项目(0645)
- 作品数：7 被引量：14H指数：2
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- 相关机构：军事医学科学院吉林建筑工程学院学研究院更多>>
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- 相关领域：农业科学生物学更多>>
- 兔出血症病毒VP60蛋白T细胞表位优势区的筛选被引量：2
- 2013年
- 应用戊二醛醛化的人的"O"型红细胞纯化兔出血症病毒(RHDV),对非免兔进行3次免疫后,经分段表达的重组杆状病毒、纯化的病毒、Con A分别刺激后进行细胞增殖检测、IL-2、IL-4、IFN-γ检测。WST检测结果表明,3号重组杆状病毒刺激的值最高,所有重组杆状病毒与空白对照组差异显著;IL-2和IFN-γ检测结果表明,3号重组杆状病毒刺激的值最高,其次为2号、4号,而1号、5号重组杆状病毒刺激指数较低,但均高于对照组;IL-4检测结果表明,2号、3号、4号重组杆状病毒刺激的值低于对照组,1号、5号重组杆状病毒刺激组略低于对照组。研究结果表明,重组病毒3号区域为RHDV VP60 T细胞表位的优势区,从而为后期的试验奠定了基础。
- 金明兰侯继波郑其升鲁会军任静强刘春霞南文龙胡乐鹏金宁一
- 关键词：兔出血症病毒VP60蛋白T细胞表位IL-2IL-4
- RHDV在多种属动物体内分布及细胞免疫水平被引量：1
- 2013年
- 应用纯化兔出血症病毒(Rabbit hemorrhagic disease virus,RHDV),接种小鼠、豚鼠、SPF鸡、仔猪4d后剖杀,分离组织,通过电镜观察、血凝试验(HA)、RT-PCR,进行体内分布检测;同时将上述动物进行3次免疫,三免后10d分离外周血淋巴细胞进行IFN-γ、IL-4、WST检测病毒刺激指数(SI)。结果显示,通过电镜观察未见到病毒粒子;HA检测结果为肝脏的HA价最高,而肺脏最低;RT-PCR未检测到目的基因;WST检测结果免疫组刺激指数高于对照组;免疫组的IFN-γ和IL-4检测数高对照组。结果表明,RHDV在多种属动物分布规律相同,均能产生细胞免疫反应,为下一步试验奠定基础。
- 金明兰侯继波郑其升鲁会军刘春霞南文龙任静强韩松金宁一
- 关键词：RHDVIFN-ΓIL-4
- 在豚鼠体内筛选兔出血症病毒“通用型”T细胞表位被引量：1
- 2015年
- 为筛选兔出血症病毒T细胞表位,应用纯化的病毒与佐剂联合免疫6周龄豚鼠,三免后10 d采集血液和淋巴细胞,通过T淋巴细胞增殖试验(WST)、酶联免疫斑点(ELISPOT)、ELISA方法检测淋巴细胞增值、IFN-γ和IL-2变化,评价多肽的抗原性。结果显示,多肽P2、P7、P10、P16、P21和P22能刺激动物产生细胞免疫应答,淋巴细胞增殖、IFN-γ分泌和IL-2水平显著高于其他多肽和对照组。这表明,筛选的多肽P2、P7、P10、P16、P21和P22具有抗原特性,为多表位疫苗的构建和应用提供科学的依据。
- 金明兰霍晓伟南文龙鲁会军任静强刘春霞金宁一侯继波
- 关键词：多肽T细胞表位兔出血症病毒
- 兔出血症病毒在豚鼠体内分布及细胞免疫试验
- 2013年
- 应用纯化兔出血症病毒(RHDV)接种豚鼠,4 d后剖杀,分离组织,通过电镜观察、血凝试验(HA)、RT-PCR等方法检测病毒在体内分布情况;应用纯化RHDV间隔2周接种豚鼠,3次免疫后10 d,分离外周血淋巴细胞进行IFN-γ、IL-2、IL-4、WST检测。结果表明:电镜观察未见病毒粒子;HA检测结果为肝脏HA效价最高,肺脏效价最低;RT-PCR方法未检测到RHDV目的基因;WST检测发现免疫组刺激指数高于对照;免疫组IFN-γ、IL-2检测结果高于对照,IL-4检测结果低于对照。RHDV在豚鼠部分组织具有血凝性,电镜未见病毒粒子,能使豚鼠产生细胞免疫反应,本研究为筛选鉴定"通用型"T细胞表位奠定基础。
- 金明兰侯继波郑其升鲁会军任静强刘春霞南文龙胡乐鹏金宁一
- 关键词：RHDVVP60IFN-ΓIL-2IL-4
- RHDV VP60“通用型”T细胞表位预测被引量：1
- 2013年
- 兔病毒性出血症核衣壳蛋白VP60是兔出血症病毒的主要结构蛋白,具有很强的抗原性和免疫原性,可诱导细胞免疫,在抗病毒免疫中起着关键作用。确定T细胞所识别抗原分子上的短肽序列对T细胞表位进行定位,对于研究特异性免疫应答有着重要意义。本研究应用T细胞抗原表位分析的研究方法,预测VP60T细胞蛋白质抗原表位,为后期试验奠定了基础。
- 金明兰侯继波郑其升鲁会军韩松南文龙任静强刘春霞金宁一
- 关键词：兔病毒性出血症
- 兔出血症病毒体内分布和抗体消长规律研究被引量：3
- 2010年
- 为了了解疫苗的使用剂量与抗体消长规律的相互关系,并降低生产成本,通过对大耳白兔接种兔出血症病毒(RHDV),无菌分离各个组织后,应用血凝试验和RT-PCR方法检测各组织的血凝效价和基因;制备RHD组织灭活疫苗接种成年兔,进行1～6周抗体消长规律研究。血凝试验结果为肝脏的血凝效价最高,其次为脾脏、骨髓、心脏、肾脏、肌肉、淋巴结、脑组织,肺脏最低;对照组的组织血凝效价均为阴性。所有组织经RT-PCR检测均检出目的基因,对照组均未检测到目的基因。不同剂量接种兔后1～6周均检测到抗体。结果表明:2种试验方法检测结果相符;雌雄个体阳性检测率差异不显著;接种剂量大的试验组产生的抗体水平较高;接种血凝效价为160的疫苗时可达到保护作用;病死兔的组织均可以制备疫苗用于免疫动物。
- 金明兰侯继波郑其升朱战波金宁一
- 关键词：病毒性出血症抗体效价病毒基因
- 兔出血症病毒JL株分离鉴定及VP60基因主要抗原表位分析被引量：11
- 2012年
- 采用血凝试验、电镜观察、RT-PCR方法分离鉴定了1株JL株兔出血症病毒(RHDV),扩增衣壳蛋白VP60基因,将扩增片段克隆到pMD18-T载体上,经酶切鉴定后测序。结果显示,VP60基因全长1 740bp,编码580个氨基酸;JL株与其他RHDV分离株比较,核苷酸同源性为93.7%～99.2%,氨基酸同源性在97.3%～99.5%,在VP60 6个区中,A、B、D、F是稳定区,氨基酸变异多发生在衣壳蛋白C、E区,表明毒株具有高度保守性;将JL株与国内外标准株蛋白氨基酸变异及其亲水性、柔性区、抗原区和表面结构进行比较分析,预测RHDV VP60细胞表位。
- 金明兰侯继波郑其升鲁会军韩松南文龙金宁一
- 关键词：兔出血症病毒VP60基因
