国家自然科学基金(31270337)
- 作品数:2 被引量:1H指数:1
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- 人参3-O-UGT1基因RNAi表达载体工程菌的构建
- 2018年
- 人参3-O-UGT1基因(Pg3-O-UGT1)是控制人参中二醇型单体皂苷合成的关键酶基因,而二醇型皂苷和三醇型皂苷具有相反的药理活性。本文利用RT-PCR技术和酶切连接技术成功构建人参3-O-UGT1基因RNAi(RNA interference)植物表达载体,通过热转化法将重组表达载体转化进发根农杆菌A4中,得到含有人参3-O-UGT1基因RNAi植物表达载体的工程菌,为诱导人参外植体转化和人参皂苷合成机理奠定了基础。
- 卢超赵寿经张晓佳杜芃川王雪松
- 关键词:生物工程人参皂苷糖基转移酶工程菌
- 人参发根长期冷冻保存方法的研究被引量:1
- 2013年
- 本试验对人参发根长期冷冻保存方法进行了研究。首先对人参发根预培养的培养基成分进行了选择;然后通过对人参发根预培养时间、玻璃化前处理时间和玻璃化脱水时间的正交试验,确定主次因素:玻璃化脱水时间>预培养时间>玻璃化前处理时间;最后对人参发根长期冷冻保存3种具体方式进行了研究,确定了先将人参发根在预培养基上培养7d,然后经玻璃化处理90min(前处理30min+脱水90min)后,在液氮中超低温(-196℃)速冻1d,最后转移到-80℃冰箱中长期冷冻保存的有效方法,为深入开展相关研究奠定了基础。本试验还对冷冻保存前后人参发根的生长活力、总皂苷、总蛋白和总糖的含量,以及过氧化氢酶等主要生理生化指标进行了测定。利用PCR技术对冷冻保存前后人参发根T-DNA上的主要基因进行了分析,确定该冷冻保存方法对人参发根遗传稳定性无影响。
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