国家自然科学基金(81272982)
- 作品数:11 被引量:33H指数:4
- 相关作者:张辛燕宿颖刘曼周新莹张桂莲更多>>
- 相关机构:首都医科大学附属北京口腔医院首都医科大学更多>>
- 发文基金:国家自然科学基金北京市自然科学基金更多>>
- 相关领域:医药卫生更多>>
- DNA甲基化和组蛋白乙酰化对人口腔鳞癌细胞中KLF4基因的调控研究被引量:2
- 2016年
- 目的探讨人口腔鳞癌中DNA甲基化和组蛋白乙酰化对KLF4基因的调控作用。方法体外培养人口腔鳞癌细胞系SCC-6,分别用DNA甲基化抑制剂5-氮-2’-脱氧胞苷(DAC)、组蛋白去乙酰化酶抑制剂曲古抑菌素A(TSA)处理SCC-6细胞,并据此将SCC-6分为4组,阴性对照组(不做处理)、DAC处理组、TSA处理组、DAC+TSA联合处理组,采用荧光定量PCR方法检测SCC-6细胞经DAC或/和TSA处理前后KLF4 RNA水平的变化;用免疫细胞化学方法检测SCC-6细胞经DAC或/和TSA处理前后KLF4蛋白的变化。结果 SCC-6细胞DAC处理组、TSA处理组、DAC+TSA组的KLF4 RNA水平与阴性对照组相比均有显著升高(P<0.01)。另外,DAC处理组KLF4 RNA水平均高于其他3组(P<0.01)。SCC-6细胞DAC处理组中KLF4蛋白表达明显升高,均高于其他3组(P<0.01)。TSA处理组与DAC+TSA联合组KLF4蛋白表达也都高于阴性对照组(P<0.01);TSA处理组与DAC+TSA处理组间无显著差异(P>0.05)。结论在口腔鳞状细胞癌SCC-6细胞中导致KLF4基因沉默的主要原因可能为DNA甲基化,此外组蛋白乙酰化可能也参与了KLF4表达的调控,但组蛋白乙酰化在提高KLF4表达方面与去甲基化无明显协同作用。
- 付洁刘曼宿颖张辛燕
- 关键词:口腔鳞癌KLF4甲基化组蛋白乙酰化表观遗传学
- 基因异常甲基化早期预测口腔白斑患者癌变1例
- 2015年
- 患者,女,61岁,2011年10月26日因发现口腔白斑1周来我科就诊。检查:15到17,27腭侧牙龈分别可见大小1.5cm×2cm、1cm×1.5cm的灰白色斑块,表面略粗糙、微突出于黏膜表面、质韧、边界不规则、界清、无触痛;14到26腭侧龈缘可见条带状的浅白色斑块,部分连接成片、界清、无触痛、均质;17腭侧可见0.3cm×0.3cm充血区,无触痛。临床初步诊断:口腔白斑。血常规无明显异常。组织活检:于17腭侧病损处取病理,病理组织沿长轴一分为二,一半用于病理检测,另一半提取DNA,用于甲基化基因芯片分析和肿瘤抑制基因P16、P15、RASSF1A、RASSF2甲基化状态检测。
- 付洁宿颖关晓兵张辛燕
- 关键词:异常甲基化基因P16口腔白斑RASSF1A癌变
- 三氧化二砷对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用被引量:6
- 2013年
- 目的探讨不同剂量三氧化二砷(As2O3)对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用及机制。方法体外培养人口腔鳞癌细胞株SCC-4,将处于对数生长期的SCC-4细胞接种于24只裸鼠后腿皮下,建立裸鼠移植瘤模型。荷瘤裸鼠随机分为四组,每组6只,分别为对照组(A)、As2O3低剂量组(B组)、中剂量组(C组)和高剂量组(D组)。分别于肿瘤细胞接种第6、9、12、15、18、21天按上述剂量给予裸鼠腹腔注射As2O3,对照组注射生理盐水。停药1周后处死动物,完整取出瘤块,测量肿瘤重量和体积,计算肿瘤抑制率,免疫组织化学法检测各组标本中Ki67、cleaved caspase-3、CD31的表达情况,计数阳性细胞数及微血管密度(MVD)并进行统计学分析。结果As2O3低、中、高剂量组均能抑制裸鼠皮下移植瘤的生长,中剂量组移植瘤体积抑制率最大为64.95%,低剂量组为32.99%,高剂量组为44.33%。免疫组化结果显示,用药后As2O3中剂量组Ki67的表达及MVD值明显低于对照组,凋亡蛋白cleaved capase-3的表达显著高于对照组(P<0.01),高剂量组凋亡蛋白cleaved capase-3的表达亦显著高于对照组(P<0.01),MVD值明显低于对照组(P<0.05),低剂量组Ki67、cleaved caspase-3、CD31的表达与对照组相比均无显著性差异(P>0.05)。用药前各组裸鼠体重无差异(P>0.05),用药后高剂量组裸鼠体重显著低于对照组和中、低剂量组(P<0.05)。结论 As2O3对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤具有一定的抑制作用,其可能的机制为抑制肿瘤细胞增殖及血管生成,诱导肿瘤细胞凋亡。As2O3对口腔鳞癌细胞裸鼠移植瘤的抑制作用与剂量有关。
- 宿颖葛丽华苗聪聪张敏张辛燕
- 关键词:三氧化二砷口腔鳞癌裸鼠移植瘤
- Garcinol对人口腔鳞癌细胞的抑制作用研究被引量:5
- 2015年
- 目的观察Garcinol对人口腔鳞癌细胞系SCC15增殖、细胞周期、凋亡和克隆形成能力的作用。方法培养人口腔鳞癌细胞系SCC15,采用不同浓度的Garcinol处理细胞后,通过MTT法检测对细胞增殖的影响,PI单染色法流式细胞仪检测对细胞周期的影响,Annexin V-FITC/PI双染色法流式细胞仪检测对细胞凋亡的影响,克隆形成实验检测对细胞克隆形成能力的影响。结果 Garcinol能显著抑制SCC15细胞增殖(P<0.01),并呈浓度和时间依赖性。Garcinol能抑制SCC15细胞周期由G1期向S期转变(P<0.01),并呈浓度依赖性。Garcinol还能够诱导SCC15细胞凋亡(P<0.01),并呈浓度依赖性。同时,Garcinol能抑制SCC15细胞的克隆形成能力(P<0.01),并呈浓度依赖性。结论 Garcinol作为一种化学预防制剂,对人口腔鳞癌细胞SCC15具有显著的抑制作用,其机制主要包括抑制SCC15细胞增殖、细胞周期和克隆形成能力,并诱导细胞凋亡。
- 周新莹张辛燕宿颖桑圣民
- 关键词:GARCINOL口腔鳞癌
- 不同抗原修复方法对KLF4在小鼠舌黏膜上皮中表达的比较被引量:2
- 2014年
- KLF4( Kruppel-like factor 4)是新发现的真核锌指蛋白转录因子,在细胞增殖和分化中发挥重要的生物学效应,其通过多种途径调节细胞的生长、分化、凋亡、增殖,被认为与肿瘤的发生、发展和转移密切相关。 KLF4主要在消化道和上皮细胞中表达,在口腔、食管、皮肤、睾丸、胸腺、角膜、淋巴细胞等处也有表达。 KLF4蛋白表达主要定位在细胞核。在检测过程中,按实验室常规免疫组化染色条件, KLF4不表达或多定位于细胞质,核表达率较低。本实验采用不同抗原修复方法比较KLF4在小鼠舌黏膜上皮的表达情况,以确定其免疫组化染色的最佳抗原修复条件,为进一步利用C57 BL/6 J小鼠口腔癌模型研究KLF4与口腔癌发生发展的关系提供技术帮助。
- 宿颖刘曼张辛燕
- 关键词:抗原修复方法黏膜上皮小鼠免疫组化染色生物学效应
- 山竹醇对癌症的化学预防作用被引量:2
- 2014年
- 山竹醇是来源于印度藤黄和其他相关种类植物的多聚异戊二烯基苯甲酮。尽管这种水果在热带地区已经使用了上百年,但它的生物活性,尤其是它的抗癌潜能是在近年来的科学研究中才发现的。一些研究显示,山竹醇对多种癌具有抗癌潜能,包括乳腺癌、结肠癌、胰腺癌、口腔癌、肝细胞癌和白血病等。山竹醇的抗癌特性通过抗氧化、抗炎、抗增殖及诱导细胞凋亡和抑制组蛋白乙酰转移酶所表现出来。目前就山竹醇的抗癌特性而言,它是一种有前途的抗癌剂,但是后期还需要相关的动物实验研究和临床试验,更充分地了解并确认其化学预防和/或治疗潜力。
- 周新莹张辛燕
- 关键词:癌症化学预防
- Krüppel-like factor 4在小鼠舌黏膜癌变过程中的表达
- 2016年
- 目的检测Krüppel-like factor 4(KLF4)在小鼠舌黏膜癌变模型中的表达,探讨KLF4与口腔黏膜癌变的关系。方法选用C57BL/6J小鼠75只,其中阴性对照组15只,饮用纯净水;实验组小鼠60只,饮用4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)水溶液(50μg/ml)。实验组分别在第8、12、16、24周末各处死15只小鼠,取舌组织,观察并记录标本的大体损害,将其固定在10%中性福尔马林溶液中,用于HE染色及KLF4免疫组织化学染色。结果在4NQO的诱导下,成功构建了小鼠舌黏膜癌变模型。HE染色结果显示,随着4NQO处理时间的延长,小鼠舌黏膜病变逐步加重,呈现出从单纯增生、异常增生到癌的变化。免疫组化结果显示,KLF4在口腔癌变过程中呈现动态变化,与正常口腔黏膜上皮相比,KLF4在单纯增生、异常增生上皮中的表达没有明显变化,但在鳞癌中,KLF4的表达量明显下降,具有显著性差异(P<0.01)。结论 KLF4可能在口腔黏膜上皮癌变过程中发挥抑癌基因的作用。
- 宿颖刘曼孙丽丽孙正张辛燕
- 关键词:KLF4口腔鳞癌
- KLF4对口腔鳞癌细胞增殖的抑制作用被引量:9
- 2016年
- 目的探讨KLF4对人口腔鳞癌细胞CAL27的增殖抑制作用。方法构建KLF4慢病毒表达载体,并转染人口腔鳞癌细胞系CAL27,转染不含KLF4开放读码框的慢病毒载体LV105作为对照。采用RT-PCR、免疫细胞化学法对KLF4表达进行鉴定。MTT实验、流式细胞术检测KLF4对口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖抑制作用。结果 RT-PCR、免疫细胞化学实验均表明实验组细胞KLF4的表达明显高于对照组(P<0.01)。MTT实验结果表明与对照组CAL27/LV105组相比,CAL27/KLF4能够抑制细胞的增殖能力(P<0.01)。CAL27/KLF4主要通过使细胞周期中的G2/M期阻滞来抑制CAL27细胞的增殖(P<0.01)。结论 KLF4转染能够抑制口腔鳞癌细胞系CAL27的增殖能力,可能在口腔鳞状细胞癌中作为抑癌基因发挥作用。
- 李文文宿颖张桂莲张辛燕
- 关键词:KLF4口腔鳞状细胞癌
- Krüppel样因子5在小鼠舌黏膜癌变过程中的表达被引量:2
- 2014年
- 目的检测Krüppel样因子5(Krüppel-like factor 5,KLF5)在小鼠舌黏膜癌变模型中的表达,探讨KLF5与口腔黏膜癌变的关系。方法将42只C57BL/6J小鼠随机分为阴性对照组、4-硝基喹啉-1-氧化物(4NQO)处理组。阴性对照组不做任何处理,4NQO组以4NQO水溶液(50μg/ml)代替饮用水饲养,共16周。实验第24周末处死全部动物,取舌组织进行HE染色及KLF5平均光密度值分析。结果 HE染色显示,对照组小鼠舌背上皮为正常角化的复层鳞状上皮,饮用4NQO水溶液的小鼠舌黏膜上皮出现了不同程度的异常增生及鳞癌。平均光密度测定显示,与正常口腔黏膜上皮相比,KLF5在重度异常增生和鳞癌中的表达明显下降(P<0.01)。结论 KLF5可能在口腔黏膜上皮癌变过程中作为肿瘤抑制基因发挥重要作用。
- 刘曼宿颖蓝爱仙张辛燕孙正
- 关键词:口腔鳞癌动物模型
- KLF4转染对口腔鳞癌细胞侵袭能力的影响被引量:2
- 2015年
- 目的观察KLF4转染对人口腔鳞癌细胞系SCC15侵袭能力的影响。方法培养人口腔鳞癌细胞系SCC15,构建pReceiver-Lv105/KLF4慢病毒表达载体,包装病毒颗粒,感染SCC15后,puromycin筛选KLF4稳定表达的细胞系。荧光显微镜和免疫荧光细胞化学鉴定病毒感染成功。然后通过划痕实验检测KLF4转导对细胞体外迁移能力的影响。Transwell细胞侵袭实验检测KLF4转导对细胞侵袭能力的影响。实时荧光定量PCR检测与细胞侵袭和迁移密切相关的因子MMP-9和Twist1的表达。结果与对照载体转导组SCC15/Lv105细胞相比,SCC15/KLF4细胞中KLF4的表达明显增强。SCC15/KLF4细胞的相对迁移率显著高于SCC15/Lv105细胞(P<0.01)。SCC15/KLF4组的侵袭穿膜细胞数明显多于SCC15/Lv105组(P<0.05)。另外,SCC15/KLF4细胞中MMP-9和Twist1 RNA的表达也高于对照组SCC15/Lv105细胞,其中MMP-9 RNA的表达升高更为显著(P<0.01)。结论KLF4转导SCC15细胞后,可能通过增强MMP-9和Twist1的表达促进细胞的迁移和侵袭能力。
- 周新莹刘曼宿颖李文文张辛燕
- 关键词:口腔鳞癌KLF4慢病毒转染