山东省卫生厅科技基金(HZ154)
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- rhIL-12逆转录病毒双亚基共表达载体的转化和鉴定
- 2008年
- 目的以人白细胞介素-12(IL-12)双亚基共表达载体pL35P40SN转化大肠杆菌DH5α,并对转化载体进行鉴定。方法以构建好的IL-12双亚基共表达载体pL35P40SN及其对照载体pLXPXSN转化大肠杆菌DH5α,氨苄抗性平板筛选阳性克隆,提取阳性克隆质粒并对其进行酶切及PCR鉴定。结果以XhoI酶切后鉴定,对照载体和IL-12共表达载体的条带分别在6490bp和8800bp的位置,以IL-12 p35和p40引物PCR扩增后电泳鉴定,在700bp和1000bp处可见清亮电泳条带。结论含IL-12 p35和p40双亚基基因的pL35P40SN载体成功转入大肠杆菌DH5α,经多项鉴定结果正确。为以其转染细胞并对IL-12的功能研究打下良好基础。
- 李娜曲春枫吕娥苗乃法吴国庆
- 关键词：IL-12
- IL-12基因转染B细胞的抗原提呈功能研究
- 2007年
- 目的 以IL-12双亚基共表达载体pL35P40SN转染B细胞,并检测其对Th细胞发育分化和CTL功能的影响。方法 尼龙毛法分离T,B细胞,以pL35P40SN转染B细胞,并以ELISA检测其IL-12的分泌,以IFN-γ的合成分泌检测其对Th1细胞发育分化的影响,以^3H-TdR法检测其对CTL特异杀伤HepG2细胞功能的影响。结果 以pL35P40SN转染B细胞后,pL35P40SN基因转染的B细胞IL-12分泌量、Th应答细胞上清IFN-γ分泌量和CTL的杀伤功能显著高于pLXPXSN和未转染的细胞。结论 pL35P40SN转染B细胞后,可刺激Th1细胞发育分化和CTL的特异性杀伤功能。
- 李娜曲春枫吕娥苗乃法吴国庆
- 关键词：IL-12APC肝癌
