国家林业公益性行业科研专项(4-38) 作品数:6 被引量:13 H指数:3 相关作者: 张欣 丁伟峰 冯颖 马涛 马艳 更多>> 相关机构: 中国林业科学研究院资源昆虫研究所 国家林业局 更多>> 发文基金: 国家林业公益性行业科研专项 引进国际先进农业科技计划 更多>> 相关领域: 农业科学 生物学 更多>>
保护剂和冻存时间对昆虫细胞系NIAS-MaBr-85冻后活性的影响 被引量:3 2010年 本文分别使用3种不同配方的冻存保护液对甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)5龄幼虫脂肪体细胞系NIAS-MaBr-85进行液氮低温冷冻保存,并在第1、3、9、17、20、28、38个月时检测细胞活力和圆度的变化情况,以评估不同冷冻保护剂和冻存时间对细胞活性的影响。研究发现,NIAS-MaBr-85细胞的冻后活性随着冻存时间的延长而降低。短期冻存时,3种冻存保护液对NIAS-MaBr-85的冻后活性影响不明显,在长期冻存条件下,以10%DMSO作为冻存保护剂的细胞冻后活力和圆度变化幅度明显小于以10%甘油为保护剂冻存的细胞。使用胎牛血清(FBS)替代培养基进行细胞冻存,对保持细胞冻后活性稳定的作用十分有限。因此,10%DMSO是长期冻存NIAS-MaBr-85细胞的优良冻存保护剂。通过对不同冻存时间的细胞活性比较发现,虽然冻存时间的长短对于细胞冻后活力和圆度变化有显著影响,但在昆虫细胞的长期低温保存过程中,冻存保护剂的差异是影响冻后细胞生物学活性的主要因素。 马艳 丁伟峰 冯颖 张欣 马涛关键词:冷冻保护剂 昆虫细胞 细胞活力 常用农药对5种昆虫细胞系的毒力测定及分析 被引量:3 2011年 自20世纪60年代Grace建立了第一个能够稳定传代的昆虫细胞系以来(Grace,1962),经过几十年的研究和发展,昆虫细胞培养已在细胞系建立、培养技术和方法、昆虫细胞培养技术的利用等方面取得了很大的进展,昆虫细胞被广泛地应用于医学、农学及生物学的各个领域(宋德伟等,2004;张佑红等,2006;Maramorosch et al.,1992)。目前。 张欣 冯颖 丁伟峰 马涛 刘荣 马艳关键词:毒力 昆虫细胞系 农药 二甲苯 致死率 长期冻存对昆虫细胞系SL2和NIH-SaPe-4活性的影响 被引量:1 2010年 对2种双翅目昆虫细胞系(黑腹果蝇胚细胞系SL2以及麻蝇胚细胞系NIH-SaPe-4)38个月长期液氮深低温保存效果进行了研究,通过对冻存时间和保护剂对2种细胞系冻后活力、圆度以及恢复时间影响的测定,比较了3种不同配方冻存保护液的效果。结果表明:2种昆虫细胞系冻后活性均随着冻存时间的增长而逐渐降低。长期冻存期中,使用90%胎牛血清(FBS)+10%二甲基亚砜(DMSO)冻存SL2效果较好,NIH-SaPe-4使用10%DMSO即可满足冻存的需要,而无需额外添加高浓度FBS。甘油不适用于这2种昆虫细胞系的长期保存。 丁伟峰 马艳 冯颖 张欣 马涛关键词:冷冻保护剂 昆虫细胞 细胞活力 离体昆虫细胞对AcNPV和BmNPV的敏感性测定与分析 被引量:2 2011年 采用来源于3个目14种昆虫的离体细胞系对苜蓿银纹夜蛾核型多角体病毒AcNPV(Autographa californica nuclear polyhedrosis virus)和家蚕核型多角体病毒BmNPV(Bombyx mori nuclear polyhedrosis virus)进行敏感性测定。试验结果表明:各昆虫细胞系对两种病毒的敏感性不同,来源于双翅目及直翅目的细胞系均不能被这两种病毒感染;AcNPV可侵染来源于鳞翅目的Sf21、Sf9、HighFive、RIRI-PX及HZ,宿主范围较广;而BmNPV仅能侵染BmN细胞,宿主专一。AcNPV对Sf9细胞的感染率最高,接种病毒10 d后感染率平均达84.0%,而RIRI-PX的AcNPV病毒产量最高,形成的多角体数目为43.9PIBs/感染细胞。接种BmNPV10 d后,BmN的感染率为72.2%,形成的多角体数目为23.1.PIBs/感染细胞。 张欣 冯颖 丁伟峰 马涛关键词:昆虫细胞系 ACNPV BMNPV 不同冷冻保护剂和冻存时间对昆虫细胞系NIAS-MaBr-85冻存后细胞活力的影响 本文分别采用3种不同配方的细胞冻存保护液对甘蓝夜蛾(Mamestra brassicae)5龄幼虫脂肪体细胞系NIAS-MaBr-85进行深度冷冻保存,并在第1、3、9、17、20、28,38个月时检测细胞活力,以评估不... 马艳 丁伟峰 冯颖 张欣 马涛关键词:冷冻保护剂 昆虫细胞 细胞活力 文献传递 密度对黑腹果蝇胚细胞系L-2/M delta 2-3冻存效果的影响 被引量:1 2012年 使用双翅目昆虫黑腹果蝇(Drosophila melanogaster Fallen)胚细胞系L-2/M delta 2-3作为研究材料,制备10个密度试验组(0.81×1062.88×107个.mL-1,每组跨度大于2.00×106个.mL-1),分别在冻后第6、10、14个月对各组细胞冻后活力、回复时间长短、以及生长状况进行观察和比较,研究密度因素对细胞系L-2/M delta 2-3长期冻存效果的影响。结果表明:冻存密度对细胞系L-2/M delta 2-3冻后活力和状态恢复均有显著影响(P<0.05)。细胞冻后活力下降速率随冻存密度增高而减慢,复苏后细胞状态恢复所需时间较短。将L-2/M delta 2-3的冻存密度提高至1.3×107个.mL-1以上有利于细胞活力的保持与冻后的恢复。 丁伟峰 冯颖 张欣 李娴关键词:昆虫细胞 细胞活力 7种鳞翅目昆虫细胞系染色体分析 被引量:5 2008年 采用直接法制备传代细胞染色体标本、常规G iem sa染色、显微镜下计数中期分裂相染色体数目的方法对7种鳞翅目昆虫细胞系进行了染色体分析,得出了各种细胞系染色体分析所需要的秋水仙素浓度与处理时间以及低渗浓度和处理时间的范围;7种鳞翅目细胞系染色体均表现出典型的鳞翅目昆虫传代细胞的核型特征:染色体数目众多,异倍化严重,多为弥散型的着丝粒的短杆状、颗粒状、点状或圆球状。 张欣 冯颖 丁伟峰 马涛 马艳关键词:鳞翅目 细胞系 染色体 核型