河北省自然科学基金(C2010000538)
- 作品数：3 被引量：29H指数：3
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- PTEN对髓系白血病细胞VEGF及MMP表达的影响被引量：9
- 2014年
- 目的探讨在慢性髓系白血病中与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因(PTEN)对血管内皮生长因子(VEGF)及金属基质蛋白酶(MMP)相互影响及其作用机制。方法 1)研究10例慢性髓系白血病慢性期CML-CP、10例急变期CML-BC及10例正常人骨髓单个核细胞内PTEN、VEGF、MMP-2和MMP-9 mRNA表达水平变化。2)将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒(Ad-PTEN-GFP)及对照载体腺病毒(Ad-GFP)转染人慢性髓系白血病细胞系K562。MTT检测细胞增殖;荧光定量PCR(FQ-PCR)检测PTEN、VEGF、MMP-2和MMP-9 mRNA水平变化,Western blot及明胶酶谱检测PTEN、p-Akt、VEGF、MMP-2和MMP-9蛋白表达。结果 CML-BC患者中PTEN mRNA表达水平低于CML-CP及正常对照组(P<0.05),而VEGF、MMP-2、MMP-9 mRNA在CML-BC患者中均高于CML-CP及正常对照组(P<0.05)。以MOI=200转染K562细胞3d后Ad-PTEN-GFP组K562细胞内VEGF、MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平均明显低于Ad-GPF组和未转染组(P<0.05),PTEN与VEGF、MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平呈负相关,转染Ad-PTEN-GFP组与转染Ad-GFP组比较VEGF、MMP-2、MMP-9 mRNA表达水平分别降低79.12%,82.99%,82.52%,p-Akt及VEGF、MMP-2、MMP-9蛋白表达水平分别降低96.15%,80.88%,65.03%,78.99%。结论 PTEN基因可能通过抑制VEGF、MMP-2、MMP-9表达,抑制髓系白血病细胞血管新生及侵袭。
- 成志勇王亚丽王凤云韩英谷蕾梁丽青谢旭磊
- 关键词：PTEN基因血管内皮细胞生长因子金属基质蛋白酶白血病K562细胞系
- PTEN基因对慢性粒细胞白血病Survivin、Xiap、Smac调控的研究被引量：13
- 2011年
- 目的探讨肿瘤抑制基因PTEN对人慢性粒细胞白血病（CML）中生存素（Survivin）、X连锁凋亡抑制蛋白（Xiap）、线粒体促凋亡蛋白（Smae）调控的作用。方法（1）将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad-PTEN—GFP）及对照载体腺病毒（Ad—GFP）转染人慢性粒细胞白血病细胞系K562，四甲基偶氮唑盐（MTT）检测细胞增殖抑制率；流式细胞仪检测转染效率、细胞周期及凋亡率；荧光定量PCR（FQ-PCR）检测PTEN、Survivin、Xiap、Smacm RNA水平变化，Western印迹检测PTEN蛋白表达水平的变化。（2）研究10例慢性粒细胞白血病慢性期（CML-CP）、10例慢性粒细胞白血病急变期（CML-BC）及10名健康人（NC）骨髓单个核细胞内PTEN、Survivin、Xiap、Smac mRNA表达水平变化。结果以感染复数（MOI）=200转染K562细胞后，Ad—PTEN-GFP组K562细胞最大增殖抑制率为38．6％，转染3d后Ad—PTEN—GFP组K562细胞内Survivin、Xiap、Smac mRNA表达水平（0．0700±0．0059、0．0089±0．0006、0．0600±0．0039）均明显低于Ad-GPF组（0．4370±0．0790、0．0661±0．0072、0．1580±0．0078）和未转染组（0．4530±0．0810、0．0700±0．0079、0．1770±0．0085）。转染Ad—PTEN—GFP组与转染Ad—GFP相比Survivin mRNA表达水平降低6．14倍、Xiap降低7．44倍，而Smac mRNA降低2．95倍（均P〈0．01）。CML—BC患者中PTEN mRNA表达水平低于CML-CP及健康对照组，而Survivin、Xiap、Smac mRNA在CML—BC患者中均高于CML—CP及健康对照组（均P〈0．01）。结论Survivin、Xiap、Smac基因可能在PTEN介导的慢性粒细胞白血病细胞凋亡通路中参与抑制细胞增殖、促进细胞凋亡的作用。
- 成志勇万建设王亚丽梁丽青梁文同穆敬芦希潘崚
- 关键词：白血病基因肿瘤抑制PTEN基因SURVIVINXIAPSMAC
- PTEN和COX-2在髓系白血病中的表达及作用机制探讨被引量：10
- 2012年
- 目的 探讨与张力蛋白同源的10号染色体缺失的磷酸酶基因（phosphatase and tensin hemology deleted on chromosome ten gene,PTEN）及环氧化酶-2（cyclooxygenase-2,COX-2）在髓系白血病细胞中的表达及相互作用.方法 收集2007至2009年保定市第一医院及河北医科大学第二医院住院及门诊患者30例,其中10例慢性粒细胞白血病慢性期（chronic myeloid leukemia-chronic phase,CML-CP）患者、10例慢性粒细胞白血病急变期（chronic myeloid leukemia-blastic crisis,CML-BC）患者及10名健康人,分析所有研究对象骨髓单个核细胞内PTEN、COX-2信使核糖核酸（messenger ribonucleic acid,mRNA）表达水平变化.将携带有野生型PTEN和绿色荧光蛋白的腺病毒（Ad-PTEN-GFP）及对照载体腺病毒（Ad-GFP）转染人慢性粒细胞白血病（chronic myeloid leukemia,CML）细胞系K562.流式细胞仪检测转染效率；四甲基偶氮唑蓝（3-[4,5-dimethyl-2-thiazolyl]-2,5-dip,MTT）法检测细胞增殖抑制率及黏附功能；荧光定量聚合酶链反应（polymerase chain reaction,PCR）检测PTEN、COX-2 mRNA水平变化,蛋白质印迹（western blot,WB）检测PTEN、p-Akt蛋白表达水平的变化,细胞化学染色检测COX-2蛋白表达变化.结果 CML-BC患者中PTEN mRNA表达水平（0.022 ±0.021）低于CML-CP（1.134±1.124）及健康对照组（1.059±0.595,F=7.16,P＜0.01）,而COX-2 mRNA在CML-BC（0.761 ±0.418）患者中均高于CML-CP（0.211 ±0.158）及健康对照组（0.165±0.152,F=12.58,P＜0.01）.以MOI=200转染K562细胞后,Ad-PTEN-GFP组K562细胞最大增殖抑制率为38.67％ ±4.30％,明显高于Ad-GFP组抑制率（5.34％±0.31％,t=13.39,P＜0.01）,转染3d后Ad-PTEN-GFP组K562细胞内COX-2 mRNA表达水平（0.013 ±0.001）均明显低于Ad-GPF组（0.199±0.018）及未转染组COX-2 mRNA（0.217 ±0.021,F=499.45,P＜0.01）.p-Akt及COX-2蛋白表达水平亦明显减低.结论 PTEN可能通过抑制COX-2表达从而抑制白血病细胞增殖、黏附功能
- 成志勇张昕王哲王卫红孙雪姗李琳王亚丽颜晓燕潘崚
- 关键词：白血病髓样加速期PTEN磷酸水解酶环氧化酶2
