天津市应用基础与前沿技术研究计划(08JCYBJC08400)
- 作品数：6 被引量：13H指数：2
- 相关作者：宋红丽沈中阳刘涛杨洋张静更多>>
- 相关机构：天津市第一中心医院天津医科大学总医院天津医科大学更多>>
- 发文基金：天津市应用基础与前沿技术研究计划国家自然科学基金天津市卫生局科技基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 骨髓间充质干细胞促进大鼠80%肝切除后残肝再生及修复作用的研究被引量：3
- 2011年
- 目的:观察骨髓间充质干细胞(BMSCs)对大鼠自体80%肝切除后残余肝脏再生及修复的作用。方法:采用密度梯度离心联合贴壁筛选法分离纯化鉴定BMSCs,取6～8周体质量200～220g的大鼠,建立大鼠80%肝切除模型,实验组16只,术后即刻经门静脉注射BMSCs;对照组20只,注射等量生理盐水。采用生物化学方法检测肝功能,流式细胞仪和免疫组化检测肝细胞周期和增殖细胞核抗原(PCNA)。结果:体外成功分离培养、扩增BMSCs;实验组术后生存15只,死亡1只,对照组生存15只,死亡5只;肝脏组织显示,实验组术后1、3和7d时肝窦轻度扩张,较少的炎性细胞浸润,少见坏死,坏死程度明显轻于对照组,术后3d差异尤为明显;实验组术后1、3和7d时血ALT和AST水平较对照组明显降低,差异有统计学意义(P<0.05);实验组术后1、3和7d时肝细胞周期中S期细胞比例与对照组相比均明显增高(P<0.05);残肝免疫组化显示实验组PCNA表达水平明显高于对照组(P<0.05)。结论:BMSCs可以促进大鼠80%肝切除后残余肝脏细胞的再生及修复。
- 龚慧宾沈中阳宋红丽郑卫萍董冲宋晓静张静
- 关键词：骨髓间质干细胞移植肝切除术肝再生增殖细胞核抗原
- 表达microRNA-203tough decoy的慢病毒载体构建及应用
- 2014年
- 目的建立表达microRNA(miRNA)tough decoy(TuD)的慢病毒载体构建方法,并检测其对细胞内miRNA表达水平及细胞表型的影响。方法在慢病毒表达质粒pSIH1-H1-copGFP中通过两步克隆,首先构建miRNA TuD通用骨架质粒,进一步构建特异性针对大鼠miR-203的TuD表达载体。在293T细胞中包装成慢病毒后,感染大鼠骨髓间充质干细胞(BM-MSCs),同时用pSIH1-H1-copGFP空质粒包装慢病毒,感染BM-MSCs作为对照。定量RT-PCR检测细胞中miR-203的水平变化,并用CCK-8法和Annexin V-PI双标记法分别检测BM-MSCs的活性和凋亡。结果成功构建了基于pSIH1-H1-copGFP质粒的miR-203 TuD表达载体,并对其序列进行了验证。用表达miR-203 TuD的重组慢病毒感染BM-MSCs后第3、6、9天检测细胞内源性miR-203表达水平降低,同时细胞活性增高,凋亡比例降低,与对照组相比差异有统计学意义。结论两步克隆法构建miRNA TuD表达载体是一种简便高效的方法,其表达产物能够有效抑制细胞内源性miRNA水平,同时影响细胞表型。
- 刘涛王玉亮宋红丽付楠楠吴本娟沈中阳
- 关键词：间质干细胞慢病毒属微RNASTOUGHDECOY
- 干细胞示踪技术在动物实验中的应用及进展被引量：2
- 2017年
- 干细胞是一类具有自我复制能力的多潜能细胞。在一定条件下,它可以分化成多种功能细胞,具有再生各种组织器官的潜能,这些特性是干细胞治疗的基础。近年来,干细胞移植治疗已在动物模型和部分临床试验中取得了巨大进步。为了实现干细胞的治疗潜力,干细胞必须在移植后迁移到损伤或病变部位,分化为靶细胞然后定植于病变部位并存活。
- 曹欢宋红丽沈中阳
- 关键词：干细胞治疗动物实验示踪技术病变部位组织器官
- 小肠移植排斥反应对肠道紧密连接蛋白表达的影响被引量：2
- 2014年
- 目的 观察大鼠小肠移植排斥反应对肠道紧密连接蛋白表达的影响.方法 建立大鼠异位小肠移植模型,分为3组：假手术组、无排斥反应组和排斥反应组.通过大鼠活动状态及病理评分确定排斥反应程度.采用酶联免疫吸附试验（ELASA）法检测血浆中二胺氧化酶（DAO）、D-乳酸（D-LA）、肿瘤坏死因子（TNF）-α、白细胞介素（IL）-2的水平.透射电镜观察肠道紧密连接的超微结构改变.应用实时定量聚合酶链反应（Real-time PCR）、Westem blot法检测紧密连接蛋白Occludin和ZO-1 mRNA和蛋白表达水平的变化.结果 排斥反应组随时间延长,病理评分增加[3 d：（32.67±2.34）分;5 d：（43.50 ±±2.07）分;7 d：（69.50±2.43）分],肠黏膜屏障功能损伤加重[DAO：3 d：（35.84±5.60）U/ml;5 d：（46.50±O.80） U/ml;7 d：（54.01±1.70） U/ml],TNF-α和IL-2大量释放,肠道紧密连接损伤严重,紧密连接蛋白Occludin和ZO-1 mRNA和蛋白表达水平降低.线性相关分析发现,病理评分、TNF-α、IL-2与紧密连接蛋白Occludin和ZO-1的表达呈负相关（P＜0.01）.结论 大鼠小肠移植排斥反应可使肠道功能受损、紧密连接断裂、紧密连接蛋白Occludin和ZO-1表达水平降低,且其蛋白表达水平与排斥反应程度呈负相关.
- 张文宋红丽杨洋刘涛沈中阳
- 关键词：小肠移植排斥反应肠屏障
- 骨髓间充质干细胞在淋巴细胞参与下对 HBV 作用的体外研究被引量：2
- 2015年
- 目的：探讨骨髓间充质干细胞（ bone marrow mesenchymal stem cells，BM MSCs）在体外淋巴细胞参与下对乙型肝炎病毒（ hepatitis B virus，HBV）复制的影响及其机制。方法选择培养状态良好的HepG2．2．15细胞，提取BN大鼠BM MSCs及新鲜脾淋巴细胞做共培养。实验分5组，分别于培养24 h、48 h及72 h后，采用MTT检测脾淋巴细胞及HepG2．2．15细胞活性，实时定量PCR测定HBV DNA及HBV cccDNA水平，流式细胞术检测T细胞亚群比例变化， ELISA检测细胞因子水平。结果在体外细胞培养的环境下，HBV DNA及HBV cccDNA在24 h、48 h及72 h时，与单纯HepG 2．2．15细胞组、BM MSCs＋HepG2．2．15细胞组及脾淋巴细胞＋HepG2．2．15细胞组比较，脾淋巴细胞＋BM MSCs＋HepG2．2．15细胞组表达水平明显降低，且在48 h 时差异有统计学意义， HBV DNA：（181．000±177;14．731） IU／ml vs （6270．000±177;300．450） IU／ml、（2564．000±177;231．058） IU／ml、（2433．300±177;302．379） IU／ml；HBV cccDNA：（4．330±215;105±177;0．464±215;105） IU／ml vs （11．100±215;105±177;0．375±215;105） IU／ml、（8．930±215;105±177;0．778±215;105） IU／ml、（9．850±215;105±177;0．810±215;105） IU／ml（P＜0．01）。细胞因子：IFN-γ与HBV DNA水平呈负相关，IL-10及IL-22分泌水平与HBV DNA水平呈正相关。 T细胞亚群：CD4＋／CD8＋升高，CD8＋细胞百分率与HBV DNA水平呈正相关。结论 BM MSCs可以抑制HBV DNA的表达，提高对HBV的清除能力，是通过调节Tc1／Tc2平衡和自身分泌方式，进而调节细胞因子表达水平实现的。
- 张博雅宋红丽尹明丽曹毅刘涛杨洋沈中阳
- 关键词：乙型肝炎病毒骨髓间充质干细胞淋巴细胞细胞因子
- 自噬在肝移植缺血再灌注损伤中的研究进展被引量：4
- 2015年
- 自噬是真核生物依赖溶酶体途径降解蛋白质、受损细胞器和不被需要的生物大分子的保守生物学过程，参与生物的生长、发育、免疫调节等过程。近几年，为满足供者器官不断增长的需求，边缘性供肝和心脏死亡供肝已广泛使用，这些移植物易发生缺血再灌注损伤，极大地影响肝移植受者术后的生存质量和存活率；研究表明，移植肝缺血再灌注损伤与自噬密切联系。现拟就自噬在移植肝缺血再灌注损伤中的作用做如下综述，以期进一步认识自噬在肝移植中的重要影响和潜在的治疗价值。
- 王绕绕宋红丽
- 关键词：肝缺血再灌注损伤肝移植受者自噬真核生物生物学过程心脏死亡
