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人源TNF-α抗体基因的克隆与表达: 2009年; 目的:在原核系统中高效表达抗TNF-α单克隆抗体VH/K21,以便进一步研究其生物学功能,预测临床应用前景。方法:以已筛选获得的TNF-α抗体基因VH/K21为模板进行PCR扩增,产物与其表达质粒进行双酶切,连接后克隆进入PET22b(+)/BL21(DE3)感受态中并在该原核系统中实现可溶性表达;对表达产物进行Western blotting、ELISA鉴定。结果:成功克隆与表达出可溶性的高效表达的人源TNF-α单克隆抗体。序列分析表明该克隆具有全新的人源TNF-α抗体基因,它可以特异识别人TNF-α。结论:人源TNF-α单克隆抗体的获得为进一步研制应用于临床的TNF-α人源抗体奠定了基础,也将为其他人源抗体的制备提供理论依据和技术基础。; 田露芳赵小玲张克军杨志华; 关键词：抗体 TNF-Α 变应性鼻炎

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天津市科技攻关项目(06YFGPSH03600)