国家自然科学基金(30771728)
- 作品数：8 被引量：53H指数：5
- 相关作者：陈凤毛叶建仁史延梅汤坚苏胜荣更多>>
- 相关机构：南京林业大学安徽省林业厅黄山学院更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金江苏省高校自然科学研究项目江苏省博士后科研资助计划项目更多>>
- 相关领域：农业科学环境科学与工程更多>>
- 松材线虫SCAR标记检测方法的建立与应用被引量：6
- 2008年
- 对南京林业大学开发的松材线虫SCAR标记检测方法的操作过程进行了规范化。介绍了SCAR标记检测松材线虫所需要的主要仪器、试剂及使用方法、线虫DNA的提取方法、PCR扩增的体系与反应程序等,对检测结果的判读方法进行了规定。规范化的检测方法灵敏度高,特异性强,应用方便。
- 苏胜荣陈凤毛叶建仁
- 关键词：松材线虫SCAR标记
- 我国松树寄生线虫分类检索被引量：5
- 2012年
- 到目前为止,在我国松树体内已经发现有寄生线虫46个已知种和一些未定种。分属于3目9科17属。其中,滑刃目(Aphelenchida)线虫数量最多,包括滑刃科(Aphelenchidae)滑刃线虫属(Aphelenchus)、伞滑刃线虫属(Bursaphelenchus),外滑刃科(Ektaphelenchidae)外滑刃线虫属(Ektaphelenchoides)、外真滑刃线虫属(Ektaphelenchus)、隐滑刃线虫属(Crytaphelenchus),长尾科(Seinuridae)长尾线虫属(Seinura)等,总共40个已知种。垫刃目(Tylenchida)包括粒科(Anguini-dae)茎线虫属(Ditylenchus),伪垫刃科(Nothotylenchidae)柱形垫刃线虫属(Cylindrotylenchus),纽带科(Hoplolaimidae)拟盘旋线虫属(Pararotylenchus),环科(Criconematidae)小环线虫属(Cri-conemella)、鞘线虫属(Hemicycliophora)等,共6个已知种。矛线目(Dorylaimida)仅有1个未定种。根据不同目、科、属、种的线虫主要形态鉴定特征,编制了46种松树寄生线虫分类检索表,从而有利于人们方便地鉴定和区分松树寄生线虫。
- 史延梅陈凤毛叶建仁方国飞潘宏阳
- 关键词：松树寄生线虫分类检索表
- 松材线虫分子检测技术研究进展被引量：7
- 2008年
- 由于松材线虫病引起松树的毁灭性危害,松材线虫的准确、快速鉴定工作被认为是松材线虫病防控的最重要的环节之一。针对松材线虫形态鉴定存在的不足,一系列松材线虫分子检测技术如限制性片段长度多态性、随机扩增多态性、特异引物PCR、实时定量PCR、核酸杂交检测等技术相继被开发利用。其中实时定量PCR检测技术与SCAR标记检测技术具有检测时间短、检测准确性高。该两项技术已广泛应用于我国生产实践中。
- 汤坚陈凤毛叶建仁苏胜荣
- 关键词：松材线虫分子检测技术
- 不同株系拟松材线虫对黄山松和黑松苗木的致病性被引量：23
- 2010年
- 采用23个不同来源的拟松材线虫株系对2年生黄山松和2年生黑松进行人工接种试验。结果表明:1)对黄山松苗具有致病作用的拟松材线虫有4个株系,分别为CFS4,SLD3,ZJ1和KOR1。其中接种ZJ1,SLD3 2个株系的黄山松苗的死亡率均为16.7%。2)对黑松具有致病作用的拟松材线虫有9个株系,分别是CFL1,SFS1,SFS4,SLD9,SDZ1,ANL5,ANL7,AHS9和HYC1。感病指数最高的ANL5达到83.3。其次是AL7,感病指数为54.2。发病率最高的拟松材线虫株系同样是ANL5,发病率达100%。死亡率最高的拟松材线虫系是ANL5和ANL7,达50%。3)根据拟松材线虫对2年生黑松苗的感病指数、发病率、死亡率等指标,将供试的23个拟松材线虫株系划分为3个致病等级:Ⅰ级(强致病性):ANL5和ANL7个株系;Ⅱ级(弱致病性):CKL1,SFS1,SFS4,SLD9,SDZ1,AHS9和HYC1 7个株系;Ⅲ级(无致病性):ANL1,JLH1,JLH10,JXY7,JYX31,CFL4,SLD3,YWF1,GBL3,ZJ1,HN1,TW1,JAP1和KOR1 14个株系。4)来自安徽的4个拟松材线虫株系,有3个株系对2年生黑松苗具有致病作用,其中2个株系(ANL5,ANL7)具有强致病作用;来自四川的5个拟松材线虫株系,有4个株系(SFS1,SFS4,SLD9,SDZ1)对2年生黑松苗具有中等强度的致病作用,而另外1个株系(SLD3)对2年生的黄山松苗具有致病作用;来自江苏的4个拟松材线虫株系(JLH1,JLH10,JXY7,JYX3)对2年生黄山松苗、2年生黑松苗均无致病性。
- 陈凤毛史延梅王姝颖汤坚孙翠云叶建仁
- 关键词：拟松材线虫黑松黄山松
- 拟松材线虫SCAR分子标记开发
- 将拟松材线虫RAPD特异片段OPY-M进行分离、回收、与载体pGEM-T Vector连接,转化大肠杆菌、培养,对目标克隆测序。根据测序结果,用Olig05.0软件设计引物。结果成功地将拟松材线虫特异片段OPY-M通过引...
- 陈凤毛叶建仁吴小芹
- 关键词：拟松材线虫特异片段测序SCAR标记
- 文献传递
- 中国江苏、浙江和甘肃与松树相关的线虫种类调查(英文)
- 2011年
- 于2008年5月至11月在中国江苏、浙江和甘肃省进行了与松树相关的线虫种类调查。对马尾松、黑松、湿地松、赤松、油松健康树及病树和死亡树的122个样木进行了检测,将分离到的线虫进行了线虫形态学光镜和扫描电镜的研究。结果共鉴定出5个属的10个种,它们分别是Bursaphelenchus xylophilus Nickle,B.mucronatus,B.aberrans,B.hofmanni,B.sp.,Aphelench-oides macronucleatus Baranovskya,A.vaughani Maslen,A.bicaudatus,Ektaphelenchoides pini,Laimaphelenchus sp.Fuchs。大部分线虫发现于死亡或濒死的松树上,只有Aphelenchoides bicauda-tus存在于健康黑松树种。Laimaphelenchus sp.存在于油松树皮下,这是该种线虫在中国和Seinu-ra wuae以黑松为寄主的首次记录。
- Sapna Negi叶建仁
- 关键词：松材线虫拟松材线虫
- 松材线虫杂交探针制备与检测技术被引量：3
- 2011年
- 选用松材线虫特异引物对M05F2/R1(F1:5-′CGGGT CATGG CTGGA GGTAT CGT-3,′R1:5′-TG-GCT CAATG GCAAA TCCTT CGTA-3′),以D ig-11-dUTP代替部分dTTP,采用PCR技术,直接扩增松材线虫特异片段作为松材线虫地高辛探针。结果表明,地高辛探针长度一致,为600 bp。产量较高,探针质量浓度达280mg/L。采用探针D IG-F2/R1对线虫基因组DNA进行点杂交,19个松材线虫株系均表现有较强的杂交信号,而8个拟松材线虫、1个霍夫曼尼伞滑刃线虫、1个大核滑刃线虫、1个长尾属线虫均无杂交信号。且用该探针可以稳定地检测出单条松材线虫。因此,该探针特异性强,灵敏度高。该探针及其配套的杂交检测技术可以用于检测线虫样本中是否含有松材线虫。
- 陈凤毛叶建仁吴小芹郝德君
- 关键词：松材线虫核酸斑点杂交
- 松材线虫两种实用分子检测技术被引量：8
- 2011年
- 为检验已开发的SCAR标记与实时PCR两种分子检测方法鉴定松材线虫的可靠性,本文选用线虫未知种样品7个以及已知种样品3个为实验材料,采用上述两种分子检测方法进行检测,并且对7个线虫未知种样品进行形态鉴定。结果表明:1)运用SCAR标记检测,第2、3、4、7号4个未知种样品与8号松材线虫样品出现了一条清晰、明亮的860bp特异条带,第1、5、6号样品与9号拟松材线虫、10号大核滑刃线虫均未出现扩增谱带,表明第2、3、4、7号4个待测样品中含有松材线虫,而第1、5、6号3个待测样品中不含有松材线虫;2)运用实时PCR检测,第2、3、4、7号4个样品与8号松材线虫样品表现有明显的阳性扩增信号,其余样品均未出现扩增信号,也无循环阈值(Ct值);3)对7个未知种样品的形态鉴定结果为:第2、4、7号样品为松材线虫样品,3号样品中除松材线虫外还含有其他线虫,第1、5、6号3个样品不含松材线虫。对于松材线虫的检测,两种分子检测结果与形态鉴定结果完全一致,且两种分子检测方法对松材线虫都具有很强的特异性,都可以在较短时间内对松材线虫进行鉴定。其中SCAR标记检测方法约需2h,实时PCR检测方法约需1h。实现了对松材线虫幼虫快速检测目标,检测结果便于判读。
- 陈凤毛叶建仁吴小芹谈家金黄麟
- 关键词：松材线虫SCAR标记实时PCR
- 拟松材线虫致病性研究
- 采用23个不同来源的拟松材线虫株系对2年生的黄山松和2年生的黑松进行人工接种试验,探讨拟松材线虫的致病性问题。取得了以下主要结论:(1)23个拟松材线虫株系中,对2年生黄山松苗具有致病作用的拟松材线虫有4个株系,分别为C...
- 陈凤毛史延梅王姝颖汤坚孙翠云叶建仁
- 关键词：拟松材线虫黑松黄山松
- 文献传递
- 拟松材线虫及其致病性被引量：11
- 2010年
- 对拟松材线虫的形态以及致病性方面的研究进行了综述。拟松材线虫在形态上与松材线虫十分相似。两者之间的主要区别在于拟松材线虫的尾部形态为圆锥形,而松材线虫的尾部为指形。形态鉴定上支持将尾尖突短于1μm的定性为松材线虫,长于3.5μm的定为拟松材线虫。拟松材线虫和松材线虫交合伞都有多种变化,不宜作为分类特征。关于拟松材线虫对松树的致病性,主要存在3种观点:①无致病性;②有微弱致病性或潜在致病性;③具有致病性分化,有的株系具有较强的致病性。
- 魏素珍史延梅陈凤毛
- 关键词：拟松材线虫
