教育部“春晖计划”(Z2010023)
- 作品数：9 被引量：60H指数：6
- 相关作者：李建民王业秋张宁陈巧云耿放更多>>
- 相关机构：黑龙江中医药大学哈尔滨师范大学黑龙江中医药大学附属第一医院更多>>
- 发文基金：教育部“春晖计划”黑龙江省教育厅科学技术研究项目哈尔滨市科技创新人才研究专项资金更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型TYR及其相关蛋白mRNA表达的影响被引量：6
- 2014年
- 目的:探讨逍遥散有效部位对A375与HacaT细胞共培养模型黑素合成的影响及机理。方法:制备逍遥散AB-8大孔树脂柱层析富集物,将其作用于以1∶2的比例构建的A375细胞与HacaT细胞共培养模型,采用Hunt法检测黑素含量,RT-PCR法测定TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA的表达。结果:逍遥散大孔树脂柱层析40%乙醇洗脱部位对细胞共培养模型作用显著,与阴性对照组比较,逍遥散4、2 g/L组黑素量分别下调82.23%、93.01%;TYR、TRP-1、TRP-2 mRNA表达量分别下调29.11%、23.78%、20.05%和25.13%、15.02%、11.64%(P<0.01)。结论:逍遥散有效部位提取物可能通过下调TYR、TRP-1和TRP-2 mRNA的表达而降低人黑素瘤细胞的酪氨酸酶活性和黑素合成量。
- 张宁刘慧张明磊刘斌任燕冬王雪李建民
- 关键词：逍遥散黄褐斑
- 绿原酸对转化生长因子-β1诱导人肝星形细胞分泌炎性细胞因子的影响被引量：7
- 2017年
- 目的探讨绿原酸(CGA)对转化生长因子(TGF)-β1诱导肝星形细胞(HSC)分泌肿瘤坏死因子(TNF)-α、白细胞介素(IL)-6的影响,以及P38MAPK、核转录因子(NF)-κB信号通路调控机制。方法不同质量浓度CGA作用于正常和转化生长因子(TGF)-β1诱导肝星形细胞,确定合适药物质量浓度;指数生长期的细胞随机分为正常HSC组、正常HSC+CGA组:细胞培养48 h后,换含终质量浓度0、50、100 mg·L^(-1)CGA的DMEM培养液培养24 h。HSC(TGF-β1)组、HSC(TGF-β1+CGA)组,细胞培养24 h后,用含终质量浓度为10μg·L^(-1)TGF-β1的DMEM培养液刺激24 h,换含终质量浓度0、50、100 mg·L^(-1)CGA的DMEM培养液培养24 h。免疫细胞化学法检测细胞中α-SMA蛋白的表达,Western-blot检测p-P38、P65表达,实时定量聚合酶链反应(PCR)检测TNF-α、IL-6 mRNA的表达,ELISA法检测上清液中TNF-α、IL-6的含量。结果确定合适CGA质量浓度为50、100 mg·L^(-1),50及100 mg·L^(-1)的CGA对正常HSC无影响(P>0.05);10μg·L^(-1)TGF-β1诱导后,细胞中α-SMA、p-P38、P65、TNF-α、IL-6的表达显著增加(P<0.01),50及100 mg·L^(-1)的CGA处理TGF-β1诱导HSC细胞,α-SMA、p-P38、P65、TNF-α、IL-6的表达显著降低(P<0.05,P<0.01)。结论 CGA能抑制TGF-β1诱导HSC的增殖,调控P38 MAPK、NF-κB信号通路,调节TNF-α,IL-6炎性因子的分泌,抑制肝纤维化的发生。
- 王业秋张丽宏陈巧云李建民
- 关键词：绿原酸肝星形细胞炎性细胞因子
- 逍遥散对急性肝损伤小鼠的肝脏保护作用被引量：2
- 2014年
- 目的：观察逍遥散对四氯化碳（CCl4）致小鼠急性肝损伤的肝脏保护作用。方法将30只小鼠按照随机数字表法分为空白对照组、模型组、逍遥散组，逍遥散组灌胃逍遥散，其余2组灌胃等量蒸馏水。给药后7 d，腹腔注射CCl4花生油溶液诱导小鼠急性肝损伤，16 h后取材，检测小鼠血清丙氨酸转氨酶（ALT）、天冬氨酸转氨酶（AST）、肝组织丙二醛（MDA）、超氧化物歧化酶（SOD）浓度，并取肝组织做病理学观察。结果模型组小鼠 ALT、AST、MDA 水平明显升高，SOD 水平明显降低[分别为（136.46±15.75）U/L、（145.37±16.39）U/L、（17.48±3.45）nmol/mg、（261.60±20.29）U/mg]，与空白对照组比较[分别为（22.96±6.23）U/L、（31.89±7.26）U/L、（4.22±1.08） nmol /mg、（336.73±25.34）U/mg]，差异有统计学意义（P＜0.01）。逍遥散组ALT、AST、MDA水平明显降低，SOD水平升高[分别为（89.38±6.96）U/L、（119.04±20.44）U/L、（10.30±2.22）nmol/mg、（304.77±31.71）U/mg],与模型组比较差异有统计学意义（P＜0.01或0.05）。结论逍遥散对CCl4致小鼠急性肝损伤有保护作用。
- 李建民杨袆楠张宁王业秋李铁男王发善刘海洋
- 关键词：逍遥散药物性肝损伤
- 逍遥散的GC-MS特征图谱研究被引量：2
- 2013年
- 目的:应用气相色谱-质谱(GC-MS)法建立逍遥散挥发性成分的特征图谱。方法:采用5HP-MS色谱柱(0.25 mm×30 m,0.25μm),He为载气,流速为1.0 mL·min-1,进样量为1μL,分流比为1∶30。电子轰击(EI)离子源,辅助线温度为280℃,离子源温度为230℃,四极杆温度为150℃;质量扫描范围m/z 30～600;Chemstation和Nist 05a谱库检索,对10批逍遥散样品进行了分析。结果:通过分析10个批次的逍遥散,确定了29个共有色谱峰,鉴定了其中28个。采用中药色谱指纹图谱相似度评价系统软件(2004A版)对其特征性图谱分析的结果显示,10批逍遥散样品相似度均在0.90以上。结论:逍遥散的GC-MS特征图谱特征性及专属性强,该特征图谱为逍遥散挥发性成分质量控制提供了重要依据。
- 刘海洋王盈盈于茜李建民张宁耿放
- 关键词：逍遥散气相色谱-质谱柴胡炮姜
- 逍遥散对“肝郁脾虚证-肝病”的干预作用研究被引量：13
- 2013年
- 目的研究肝郁脾虚证与肝病的相关性及逍遥散的干预作用机制。方法夹尾苦寒药泻下制备肝郁脾虚证模型,灌胃给予逍遥散后,观察大鼠的行为状态、皮肤色泽、饮食、饮水、睡眠以及粪便情况,检测肝组织病理学变化。测定大鼠尿中D-木糖、血清中丙氨酸氨基转移酶(ALT)、天门冬氨酸氨基转移酶(AST)、白蛋白(ALB)、总蛋白(TP)、总胆红素(T-BIL)、胆碱酯酶(CHE)、一氧化氮(NO)、胃泌素(GAS)、胃动素(MTL)的水平。结果与空白组大鼠相比,模型组大鼠各种行为状态均出现明显变化,大部分肝细胞出现中央静脉扩张、局部出现炎性润灶,局部肝细胞核发生萎缩、崩解、变性坏死并伴有淋巴细胞浸润,个别出现胆管增生。模型组D-木糖排泄率(P<0.01)、MTL(P<0.01)、CHE(P<0.01)、ALB(P<0.01)明显降低,AST(P<0.01)明显升高。灌胃给予逍遥散后各种变化明显恢复。与模型组相比,逍遥散组D-木糖排泄率(P<0.05)、MTL(P<0.01)、CHE(P<0.01)、ALB(P<0.05)升高,AST(P<0.05)降低。结论肝郁脾虚证与肝病有本质联系,逍遥散能够有效缓解"肝郁脾虚证-肝病"关联指标,推测其机制可能是改善细胞膜通透性,促进肝细胞再生、合成蛋白及加快肝细胞修复。
- 陈丹丹杨祎楠耿放王业秋王发善张宁
- 关键词：逍遥散肝郁脾虚证肝病
- 补骨脂酚对TGF-β诱导人肝星状细胞损伤的保护作用被引量：7
- 2018年
- 目的：探讨补骨脂酚对转化生长因子-β（TGF-β）诱导人肝星状细胞损伤的保护作用及其机制。方法：通过噻唑蓝（MTT）比色法检测各组人肝星状细胞活性,筛选出补骨脂酚安全有效浓度;本实验分为空白组、模型组、补骨脂酚组（1×10^-5mol·L^-1）及雌二醇组（1×10^-6mol·L^-1）,同样检测各组细胞的活性,除空白组外,其余各组均加入10μg·L-1TGF-β诱导人肝星状细胞损伤;分别采用酶联免疫吸附测定法（ELISA）检测各组细胞中超氧化物歧化酶（SOD）,谷胱甘肽过氧化物酶（GSH-Px）,丙二醛（MDA）的水平;实时荧光定量聚合酶链式反应（Real-time PCR）检测细胞中基质金属蛋白酶-1（MMP-1）,胶原蛋白-Ⅰ（Col-Ⅰ）mRNA表达水平;蛋白免疫印迹法（Western blot）检测细胞中MMP-1,Col-Ⅰ蛋白的表达水平。结果：与模型组比较,1×10^-5mol·L^-1补骨脂酚显著提高TGF-β诱导人肝星状细胞及细胞中SOD,GSH-Px活性,显著降低细胞中MDA含量及Col-Ⅰ,MMP-1 mRNA和蛋白的表达（P〈0.01）。结论：补骨脂酚对TGF-α诱导人肝星状细胞损伤的保护作用,主要是通过提高细胞中抗氧化酶的活性、降低细胞中MMP-1,Col-ⅠmRNA和蛋白的含量。
- 陈巧云杨柳王业秋李孟张建辉李建民
- 关键词：补骨脂酚人肝星状细胞
- 绿原酸对TGF-β_1刺激人肝星形细胞凋亡的影响被引量：4
- 2016年
- 目的:探讨绿原酸对TGF-β_1刺激人肝星形细胞凋亡的影响。方法:取指数生长期细胞,随机分为空白对照组、TGF-β_1组及绿原酸高、中、低浓度组,以MTT检测细胞活力,流式细胞术检测细胞凋亡率,实时定量PCR检测α-SMA、Bax、Bcl-2 mRNA的表达,免疫细胞化学检测α-SMA蛋白的表达,Western-blot检测Bax、Bcl-2蛋白表达。结果:10μg/L TGF-β_1刺激HSC细胞后,HSC-LX2细胞中α-SMA、Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著升高,Bax mRNA及蛋白表达显著降低(P<0.05)。与模型组比较,绿原酸高、中剂量组细胞活力、α-SMA、Bcl-2 mRNA及蛋白表达显著降低,细胞凋亡率、Bax mRNA及蛋白表达显著升高(P<0.05或P<0.01)。结论:绿原酸通过调控Bax、Bcl-2的表达,诱导活化的HSC-LX2凋亡,清除活化的肝星形细胞,抗肝纤维化。
- 王业秋张丽宏陈巧云李建民
- 关键词：绿原酸肝星形细胞BAX细胞凋亡
- 逍遥散干预肝损伤小鼠的代谢组学研究被引量：13
- 2014年
- 目的通过代谢组学方法研究逍遥散干预肝损伤小鼠血清内源性代谢物的变化,探索与肝损伤密切相关的代谢模式及逍遥散的作用机制。方法以CCl4致小鼠肝损伤模型为研究对象,测定小鼠血清ALT、AST,肝组织匀浆SOD、MDA。检测小鼠血清中内源性代谢物的变化情况,并运用主成分分析方法对这一变化过程进行模式识别。结果与对照组小鼠相比,模型组小鼠血清ALT和AST明显升高(P<0.01),肝组织匀浆SOD显著降低,MDA明显升高(P<0.01);与模型组小鼠相比,给药组小鼠血清ALT和AST显著降低(P<0.01),肝组织匀浆SOD明显升高,MDA显著降低(P<0.01)。模型组、给药组与对照组的血清内源性代谢物均发生了明显变化,模型组血清中甘氨酸、丙氨酸、丝氨酸、苏氨酸、氨基丙二酸、苹果酸、谷氨酰胺、天门冬氨酸、赖氨酸、鸟氨酸均明显升高(P<0.01),肌醇升高(P<0.05)。给药组中显示逍遥散对其有调节作用。结论逍遥散干预肝损伤的作用显著,推测其机制是清除自由基,抑制脂质过氧化,恢复部分氨基酸代谢、三羧酸循环、尿素循环等代谢通路。
- 张宁杨祎楠刘海洋王业秋李建民耿放
- 关键词：逍遥散肝损伤代谢组学气相色谱-质谱
- 逍遥散保护受损肝细胞和抗肝纤维化的作用机理研究被引量：6
- 2014年
- 目的探讨逍遥散保护受损肝细胞和抗肝纤维化的作用机制。方法观察不同浓度的逍遥散对CCI4诱导的肝细胞（HL7702）损伤模型及HSC—LX2细胞0D值，ALT，AST，SOD，MDA，LDH，Hyp和TIMP-1的影响。结果0．008-0．200mg·ml^-1逍遥散治疗组的OD值，SOD活力，ALT，AST，LDH，MDA含量，与模型对照组相比差异具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）；0．200，0．040mg·ml^-1逍遥散组的OD值、Hyp、TIMP-1含量与空白对照组相比，差异具有统计学意义（P〈0．05或P〈0．01）。结论逍遥散通过提高SOD活性，降低ALT，AST，LDH，MDA含量保护受损的肝细胞，通过抑制肝星形细胞增殖，降低上清液中Hyp和TIMP-1的含量起到抗肝纤维化的作用。
- 李建民王业秋张宁陈巧云
- 关键词：逍遥散肝纤维化
