国家自然科学基金(81071321)
- 作品数：10 被引量：64H指数：4
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- 双向电泳结合质谱分析长双歧杆菌XY01分泌蛋白质图谱被引量：2
- 2013年
- 菌体的分泌蛋白质在宿主和菌体的相互作用之间起着重要的作用.本研究采用双向凝胶电泳的方法建立了长双歧杆菌XY01分泌蛋白质图谱,通过MALDI-TOF/TOF质谱鉴定和数据库搜索,对鉴定到的分泌蛋白进行了分析.共检测到21个蛋白质点,成功鉴定18个蛋白质点,分别代表14个不同的蛋白质,等电点分布在4.5～7.0之间,分子质量分布在20～65 kD之间;通过COGs分类和功能分析,信号肽和细胞定位及KEGG代谢通路分析.结果表明,这些蛋白质对菌体细胞壁/膜的形成、生物信号传导和物质代谢等起着重要作用.研究结果为长双歧杆菌蛋白质组学和基因组学的研究提供了参考.
- 尚伟邹大阳王思淼袁静廖祥儒
- 关键词：双向凝胶电泳蛋白质图谱
- 泛耐药基因NDM-1在大肠杆菌中的克隆表达及耐药性检测
- 2012年
- 目的:构建bla(NDM-1)基因重组质粒,表达新德里金属β内酰胺酶1(NDM-1),并检测携带bla(NDM-1)基因重组质粒的大肠杆菌的耐药状况。方法:PCR扩增编码NDM-1的基因bla(NDM-1),构建表达载体pGEX4T-1-NDM-1,并转化至大肠杆菌,转化子经PCR后测序,以确认构建和转化成功;用Western印迹验证重组蛋白的表达;用药敏纸片法检测含重组质粒pGEX4T-1-NDM-1的大肠杆菌的耐药谱;用E-test法测定其最低抑菌浓度(MIC)。结果:PCR及测序结果显示载体构建和转化成功;含重组质粒pGEX4T-1-NDM-1的大肠杆菌在37℃时,经1 mmol/LIPTG诱导5 h后,SDS-PAGE可见目的条带;除对替加环素和粘菌素敏感外,该重组子对多种碳青霉烯类抗生素耐药,E-test检测其对亚胺培南的MIC为64μg/mL。结论:构建了含泛耐药基因bla(NDM-1)的重组质粒,转入大肠杆菌后表达了融合蛋白,并对多种碳青霉烯类抗生素耐药。为进一步研究bla(NDM-1)基因和蛋白的功能奠定了基础。
- 邹大阳刘威尚伟魏晓李雪莲王雪松尹志涛袁静黄留玉
- 关键词：克隆表达耐药性
- 群体感应与病原菌致病性研究进展被引量：7
- 2011年
- 群体感应是细菌根据细胞密度变化进行基因表达调控的一种生理行为。当细菌密度达到临界阈值时能释放一些特定的自诱导信号分子,从而调节本种群或同环境中其他种群的群体行为。细菌群体感应参与包括人类、动植物、病原菌在内的多种生物的生物学功能调节,如生物膜的形成、毒力因子的产生、病原菌的耐药性等。深入研究病原菌群体感应系统的调控机制,将提高对病原菌发病机制的认识,有利于以群体感应作为防治疾病策略的研究。系统阐述了群体感应系统的组成类型、群体感应与病原菌致病性的关系,及其在抑制病原菌致病方面的应用。
- 邵长林孙忠科廖祥儒袁静
- 关键词：病原菌生物膜毒力因子
- 肝硬化患者肠道微生物代谢功能的宏基因组学研究被引量：4
- 2013年
- 目的分析肝硬化患者远端肠道微生态菌群代谢功能的变化。方法选取16例肝硬化患者及20例正常人,提取其肠道微生物宏基因组DNA进行高通量Solexa测序,对测序基因进行代谢功能的注释,比较肝硬化患者与正常人之间的差异,找出疾病相关的肠道微生物代谢功能的变化。结果肝硬化患者肠道菌群功能多样性降低,对药物、必需氨基酸、丙酸盐等的代谢能力以及炎性反应显著增强,而对丁酸盐、胆汁酸的代谢能力以及细胞周期相关的功能显著降低。结论在肝硬化的影响下,肠道微生物的生长环境被破坏,肠道菌群为了适应环境,在功能和代谢方面表现出一定程度的代偿。
- 魏晓邹大阳闫夏贝杨展崔茜王思淼黄留玉袁静
- 关键词：宏基因组学谷胱甘肽必需氨基酸胆汁酸
- 万古霉素耐药相关VanS/VanR双组分调控系统研究进展
- 2012年
- 万古霉素耐药基因簇(van)存在于多种人类致病菌中,如粪肠球菌、屎肠球菌、金黄色葡萄球菌;此外,还存在于产糖肽类抗生素放线菌纲(actinomycetes)等菌体中。菌体中万古霉素抗性的表达是通过VanR/VanS双组分调控系统对胞外环境中的糖肽类抗生素做出应答而实现的。该系统包括两个基本组分:传感器激酶(kinase)蛋白VanS和应答调节蛋白VanR。目前研究较多的两类VanR/VanS双组分调控系统为与VanA型耐药有关的Van-RA/VanSA双组分系统及与VanB型耐药有关的VanRB/VanSB双组分系统。本文综述了VanS/VanR双组分调控系统的类型、生化特性、双组分调控系统间交互作用及VanS蛋白识别的效应子配体等方面的研究进展。
- 王雪松刘威魏晓邹大洋黄留玉袁静
- 关键词：万古霉素耐药耐万古霉素肠球菌
- 粪肠球菌群体感应系统luxS基因的研究被引量：4
- 2011年
- 目的研究粪肠球菌群体感应系统luxS基因的功能并体外合成AI-2信号分子,为研究粪肠球菌LuxS/AI-2依赖的群体感应系统提供依据。方法以哈氏弧菌BB170作为报告菌株,检测3株粪肠球菌培养上清的AI-2活性,然后从粪肠球菌中扩增出luxS和pfs基因,测序和比对氨基酸序列,并将两基因插入到pGEX-4T-1表达载体中,转化至大肠杆菌BL21(DE3)中实现表达与纯化,进而以S-腺苷高半胱氨酸为底物、纯化的蛋白或构建的大肠杆菌菌体蛋白为反应酶,体外合成AI-2。结果 3株粪肠球菌均能够分泌有活性的AI-2信号分子;LuxS蛋白序列分析发现其与哈氏弧菌、沙门菌、大肠杆菌具有高度同源性;SAH均可以与纯化的蛋白或构建的大肠杆菌菌体蛋白合成出有活性的AI-2分子。结论粪肠球菌存在LuxS/AI-2依赖的群体感应系统,AI-2的产生依赖于luxS基因。
- 邵长林孙忠科尚伟袁静廖祥儒
- 关键词：粪肠球菌LUXS基因
- 清开灵注射液提取物及清开灵注射液与抗生素联合对含blaNDM-1超级细菌的抑菌效果被引量：6
- 2013年
- 目的体外初步研究清开灵注射液主成分提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药分别对含产新德里金属β-内酰胺酶-1(New Delhi metallo-β-lactamase1,NDM-1)基因的耐药细菌(blaNDM-1细菌)的抑菌性。方法采用琼脂稀释法和K-B法对清开灵注射液主成分板蓝根、金银花、栀子、黄芩苷4种药物提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药分别对耐药超级细菌进行抑菌实验。并测定各提取液的最小抑菌浓度(MIC)值。结果清开灵主成分提取液对含blaNDM-1基因的耐药细菌均有不同程度的抑制效果,其中以黄芩苷为最好,对含blaNDM-1基因的耐药菌不动杆菌属/乙酸钙不动杆菌(WD)、鲍曼不动杆菌(WX)、嗜麦芽寡养单胞菌(WJ)和大肠杆菌pGEX-4T-NDM-1/DH5α(GST-NDM-1)的MIC分别为0.015、0.020、0.005、>0.020g/mL,而各提取液的MIC值的大小依次为黄芩苷、金银花、栀子、板蓝根;清开灵注射液与抗生素联合用药后,对含blaNDM-1基因多重耐药菌的抑菌效果非常明显,大大提高了各类抗生素单独用药的抑菌能力,其中以与青霉素类(青霉素G、美洛西林、哌拉西林/他唑巴坦、氨苄西林/舒巴坦)效果最好,抑菌效果提高10倍左右,其他抗生素类药物抑菌效果都有不同程度的提高。结论清开灵注射液主成分提取液和清开灵注射液与抗生素联合用药对含blaNDM-1耐药基因细菌都有很好的抑菌效果,此研究为药物开发及对blaNDM-1超级耐药细菌的用药和治疗提供了理论依据。
- 尚伟王雪松邹大阳张状年廖祥儒袁静
- 关键词：抑菌效果
- 志贺菌属逃避宿主固有免疫系统的机制研究进展
- 2013年
- 肠黏膜上有多重先天免疫防御系统,当发生细菌感染时,可以向免疫系统传递信号,抵御细菌的入侵,而且使被破坏或衰老的上皮细胞再生;然而肠黏膜致病菌具有的多重致病机制可以适应宿主的炎性反应和免疫反应,能使宿主细胞死亡并操控宿主细胞存留的信号通路。这些特性使致病菌能够适应肠黏膜环境,破坏细胞功能和免疫功能,从而使致病菌对宿主的感染更易发生。本文综述了宿主对细菌感染的抵抗机制和志贺菌属逃避宿主固有免疫系统的机制。
- 杨展王思淼崔茜刘威王雪松邹大阳李雪莲李环王玉飞黄留玉袁静
- 关键词：志贺菌属宿主免疫系统细菌感染
- 人类肠道菌群与疾病关系的元基因组学研究进展被引量：36
- 2011年
- 人体的生理健康除受自身基因的调控外,还受到肠道菌群的影响。人体肠道内的细菌有1 000～1 150种,其中160种为优势菌种,存在不同类型的生态学相互作用。肠道细菌的300多万个基因被视为人类的"第二基因组",在正常人体健康状态下,肠道微生物种群处于平衡状态,而在宿主患病期,菌群失调或紊乱。采用元基因组学研究能在更高更复杂层次上揭示肠道菌群之间的生命运动规律。本文系统综述了元基因组学对肠道菌群与肥胖、糖尿病、炎症性肠病等疾病之间关系的研究进展。
- 魏晓刘威袁静黄留玉
- 关键词：肠道菌群疾病
- 乙肝肝硬化患者肠道微生物元基因组学的研究被引量：5
- 2011年
- 目的比较分析乙肝肝硬化患者与正常人远端肠道微生物群的差异,探讨乙肝肝硬化与肠道微生物群变化的关系。方法选取11例乙肝肝硬化患者及20例正常人,提取其肠道微生物元基因组,采用高通量Solexa测序方法,通过基因比对、主成分分析、属种定量及功能代谢组成等生物信息学分析方法,找出疾病相关的属种和基因信息。结果与结论属种定量及组成分析发现,乙肝肝硬化患者存在不同程度的肠道菌群失调,表现为肠杆菌科(尤其是大肠杆菌、肺炎克雷伯菌和志贺菌属)以及韦荣球菌属富集(P<0.05),拟杆菌属缺失(P<0.05);功能及代谢分析发现,乙肝肝硬化患者富集较多的执行氨基酸和碳水化合物膜转运及代谢功能的基因。
- 魏晓王雪松邵长林刘威邹大阳黄留玉袁静
- 关键词：乙肝肝硬化肠杆菌科拟杆菌属
