国家自然科学基金(81270358)
- 作品数：15 被引量：56H指数：5
- 相关作者：刘勇何延政吴勇余南彬刘鑫更多>>
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- 黄连素对糖尿病大鼠血管钙化的影响及其机制研究被引量：6
- 2019年
- 目的探讨黄连素对糖尿病大鼠血管钙化的影响及其可能机制。方法将90只雄性SD大鼠随机分为空白组、单纯钙化组、单纯糖尿病组、糖尿病+钙化组、糖尿病+钙化+低浓度黄连素组、糖尿病+钙化+中浓度黄连素组、糖尿病+钙化+高浓度黄连素组、糖尿病+钙化+ERK抑制剂组、糖尿病+钙化+p38抑制剂组,每组10只。各糖尿病组采用高糖、高脂饲料喂养加链尿佐菌素腹腔注射建立2型糖尿病大鼠模型,各钙化组采用维生素D_3注射+尼古丁灌胃建立血管钙化模型。各黄连素组在糖尿病+血管钙化的基础上给予100 mg/kg、200 mg/kg、400 mg/kg黄连素灌胃,糖尿病+钙化+ERK抑制剂组、糖尿病+钙化+p38抑制剂组在糖尿病+血管钙化基础上给予1 mg/kg PD98059、2 mg/kg SB203580腹腔注射,均连续4周。实验结束后用钙离子检测试剂盒检测主动脉组织中钙含量,Von Kossa染色检测主动脉组织中钙盐沉积情况,免疫组化法检测主动脉组织中骨形态发生蛋白-2(BMP-2)蛋白表达情况,蛋白印记法检测主动脉组织中p-ERK1/2、ERK1/2、p-p38、p38蛋白表达情况。结果糖尿病模型建立成功后,糖尿病各组大鼠体质量逐渐降低,但各黄连素组大鼠体质量下降速度慢于糖尿病+钙化组(P均<0.05);药物干预4周中,糖尿病各组大鼠血糖水平比较差异均无统计学意义(P均>0.05)。与空白组比较,单纯钙化组大鼠主动脉组织中钙含量明显增加(P<0.05),黑色钙盐银染颗粒沉积,BMP-2表达明显增多(P<0.05);与单纯钙化组比较,糖尿病+钙化组大鼠主动脉组织中钙含量明显增加(P<0.05),黑色钙盐银染颗粒沉积明显增加,BMP-2表达明显增多(P<0.05);与糖尿病+钙化组比较,各黄连素组及糖尿病+钙化+ERK抑制剂组、糖尿病+钙化+p38抑制剂组大鼠主动脉组织中钙含量明显减少(P均<0.05),黑色钙盐银染颗粒沉积减少,BMP-2表达明显减少(P均<0.05),且随黄连素浓度增加作用越明�
- 曾存良张鑫鹏胥雄飞张雷何虎强曾宏何延政刘勇
- 关键词：黄连素糖尿病血管钙化MAPK信号通路
- 黄连素对人主动脉血管平滑肌细胞钙化的作用及其机制被引量：2
- 2018年
- 目的探讨黄连素影响人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化的作用及机制。方法利用糖基化终末产物(AGEs)建立HASMCs钙化模型,予以不同浓度(10、25、50μmol/L)的黄连素干预。用冯库萨、茜素红染色观察细胞钙化程度,采用细胞内钙含量试剂盒测定钙含量,Western blotting检测各组细胞骨保护素(OPG)、骨桥蛋白(OPN)及骨形成蛋白2(BMP2)、细胞外信号调节激酶(ERK)、p38蛋白表达。结果与对照组比较,AGEs组钙化程度、细胞内钙含量升高(P均<0.05),不同浓度黄连素干预HASMCs钙含量呈浓度依赖性减少(P均<0.05);AGEs组OPG、BMP2、OPN、ERK、p38蛋白表达量较对照组明显增高(P均<0.05),不同浓度黄连素呈浓度依赖性地减少HASMCs的OPG、BMP2、OPN、ERK、p38蛋白表达量(P均<0.05)。结论黄连素可抑制AGEs诱导的HASMCs钙化,其机制可能与下调ERK、p38丝裂原活化蛋白激酶信号通路导致OPG、OPN、BMP2表达减少有关。
- 张鑫鹏曾存良孙晓磊何虎强胥雄飞曾宏施森刘勇
- 关键词：黄连素血管钙化糖基化终末产物丝裂原活化蛋白激酶通路
- 血管腔内修复术治疗Standford B型主动脉夹层临床疗效被引量：5
- 2018年
- 目的:观察主动脉腔内修复术(TEVAR)治疗Standford B型主动脉夹层(TBAD)的临床疗效。方法:80例TBAD患者行TEVAR手术治疗,记录患者术后1月内及术后1~6个月内再次行相关手术例数、死亡率及并发症发生率,比较术前、术后1月及6月时TBAD患者主动脉峡部段、降主动脉中段、降主动脉远段、腹主动脉腹腔干段及分叉段的真、假腔管径,比较术后1月及6月时TBAD患者主动脉峡部段、降主动脉中段、降主动脉远段、腹主动脉腹腔干段及分叉段的真、假腔血栓化情况。结果:术后1个月内,再次行相关手术3例(3. 8%),主要并发症发生率12. 5%,因突发主动脉破裂死亡1例(1. 25%);术后1~6个月,再次相关手术4例(5. 08%),主要并发症发生率15. 2%,患者均存活;术后1月及6月时,主动脉峡部段、降主动脉中段、降主动脉远段真腔管径均较术前逐渐增大,假腔管径则均较术前逐渐减小(P <0. 05);腹主动脉腹腔干段和分叉段真腔管径均较术前逐渐增大(P <0. 05),假腔管径与术前比较,差异无统计学意义(P> 0. 05);术后6月时主动脉峡部段、降主动脉中段及降主动脉远段假腔血栓化患者比例高于术后1个月时(P <0. 05);术后1月及6月时腹主动脉腹腔干段与分叉段假腔血栓化患者比例比较,差异无统计学意义(P> 0. 05)。结论:TEVAR治疗TBAD并发症少、随访病死率低,术后患者主动脉各段真假腔管径改善情况及假腔血栓化情况良好。
- 陈豪刘勇伍成文王征
- 关键词：STANDFORDB型主动脉夹层
- 二肽基肽酶4通过ERK1／2信号通路促进人血管平滑肌细胞钙化被引量：5
- 2017年
- 目的探讨二肽基肽酶4（DPP4）在人血管平滑肌细胞（HVSMC）中的钙化作用及其机制。方法通过茜素红观察DPP-4对人血管平滑肌细胞（HVSMC）钙化的影响，并以Western印迹法检测细胞外信号调节激酶（ERK）1／2通路是否涉及DPP4诱导HVSMC相关钙化蛋白的表达。结果茜素红染色结果显示，DPP4组钙化结节较阴性对照组明显增多，与阳性对照组相当；且DPP4剂量和时间依赖性地促进钙化相关蛋白骨保护素（OPG）、骨桥蛋白（OPN）、Runt相关转录因子2（RUNX2）和骨形态发生蛋白2（BMP2）的表达。DPP4干预15rain明显刺激ERK1／2的磷酸化（P〈0．05），ERK1／2抑制剂可明显降低DPP4刺激的相关钙化蛋白表达（P〈0．05）。结论DPP4可能是通过ERK1／2信号通路促进HVSMC的钙化。
- 罗未聃王雪琴何虎强张雷曾宏刘鑫刘勇
- 关键词：血管平滑肌细胞钙化
- MVBs及IL-1β在2型糖尿病大鼠血管钙化中的作用被引量：4
- 2022年
- 目的探究2型糖尿病血管钙化中基质囊泡(MVBs)的变化及MVBs、白介素-1β(IL-1β)在糖尿病血管钙化中的作用。方法建立2型糖尿病大鼠钙化模型和体外细胞高糖钙化模型;用PET/CT成像、Von Kossa染色或茜素红染色检测钙的沉积;免疫荧光染色、实时定量PCR或Western blot检测骨形态发生蛋白2(BMP-2)、核心结合因子2(RUNX 2)、MVBs标志物annexin-Ⅵ及IL-1β的表达。结果与对照组相比,2型糖尿病大鼠主动脉或高糖钙化细胞中有明显钙沉积,且BMP-2、RUNX 2的表达显著升高(P<0.01,P<0.05);同时,annexin-Ⅵ和IL-1β的表达也明显上调(P<0.01,P<0.05),且存在共定位;用雷帕霉素诱导细胞自噬后,RUNX 2、annexin-Ⅵ和IL-1β的表达均降低(P<0.01);而用氯喹抑制自噬后,RUNX 2的表达轻微上调,而annexin-Ⅵ高表达(P<0.01)。结论自噬通过减少MVBs的释放,并降低炎性因子IL-1β的表达,从而减轻2型糖尿病主动脉钙化。
- 郑杨魏海军申嘉陵刘润禹刘勇孙晓磊
- 关键词：2型糖尿病血管钙化白介素-1Β
- GSK3β抑制剂TWS119对晚期糖基化终末产物诱导的人主动脉血管平滑肌细胞迁移的影响
- 2020年
- 目的探讨糖原合成酶激酶3β(GSK3β)选择性抑制剂TWS119对晚期糖基化终末产物(AGEs)诱导的人主动脉血管平滑肌细胞(HAVSMCs)迁移的作用及其可能机制。方法通过细胞划痕和Transwell实验筛选出最适促HAVSMCs迁移的AGEs浓度后,将HAVSMCs随机分为对照组、AGEs组、AGEs+TWS119组和AGEs+DMSO组。采用Transwell实验检测各组细胞迁移能力,细胞骨架染色激光共聚焦显微镜下观察纤维肌动蛋白表达,Western blot检测GSK3β、磷酸化GSK3β和MMP-2蛋白表达。结果AGEs组HAVSMCs迁移能力较对照组增强(P<0.01);与AGEs组相比,AGEs+TWS119组HAVSMCs迁移能力受到抑制,纤维肌动蛋白表达减弱,磷酸化GSK3β蛋白表达增加,MMP-2蛋白表达减少(P<0.01)。结论TWS119可能通过降低GSK3β活性和下调MMP-2蛋白表达,进而抑制AGEs诱导的HAVSMCs迁移。
- 袁罡徐燕能侯青春王伟明许凯强王寓平胥雄飞刘勇
- 关键词：糖原合成酶激酶3Β血管平滑肌细胞
- 晚期糖基化终末产物调控平滑肌细胞钙化的机制研究
- 2017年
- 目的探讨晚期糖基化终末产物(AGEs)调控其受体促进人股动脉平滑肌细胞钙化的机制。方法2014年1月—2015年3月,将股动脉中膜平滑肌层剪成1~2 mm组织块培养,选取3~8代平滑肌细胞用于实验。将平滑肌细胞分为4组,A组单纯于DMEM培养基中培养,B组于含10 mmol/Lβ磷酸甘油钠的DMEM培养基中培养,C、D组分别于含10 mmol/Lβ磷酸甘油钠的DMEM培养基中加入20、40 mg/L AGEs,各组平滑肌细胞干预培养96 h。合成3对随机AGEs受体(RAGE)siRNA,以50 nmol/L转染C组平滑肌细胞,24 h后进行siRNA沉默效果检测,选取转染效率较高的序列用于实验。分别取转染前后平滑肌细胞,采用Von Kossa染色实验观察平滑肌细胞内钙沉积情况,采用Western blotting法检测RAGE、β-catenin、骨保护素(OPG)表达水平。结果未转染的平滑肌细胞中,A组无钙化斑块形成,B组可见明显的钙化斑块;C、D组细胞质、细胞核呈现粉红色的数量增加,钙化斑块明显增多。经转染后,C组平滑肌细胞细胞质、细胞核呈现粉红色的数量较未转染细胞减少,钙化斑块形成受到抑制。未转染的各组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平比较,差异均有统计学意义(P<0.05);其中,C组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平高于B组,D组平滑肌细胞RAGE、β-catenin、OPG表达水平高于B、C组(P<0.05)。C组平滑肌细胞转染后RAGE、β-catenin、OPG表达水平均低于转染前(P<0.01)。结论 AGEs通过与其受体结合而介导平滑肌细胞钙化,其机制可能为RAGE激活Wnt/β-catenin信号通路,使β-catenin下游蛋白OPG表达水平升高。
- 何虎强曾宏孙晓磊张雷王伟明胥雄飞何延政刘勇
- 关键词：糖尿病血管钙化晚期糖基化终末产物骨保护素
- AKT/GSK-3β-Wnt/β-catenin信号通路调控糖尿病血管钙化的研究新进展被引量：4
- 2017年
- 在全世界范围内,糖尿病的发病率越来越高,而血管钙化作为糖尿病的并发症之一,在2型糖尿病患者的疾病发生、发展过程中占据着越来越重要的地位。血管钙化是一个与炎症相关的类似于骨组织中的成骨分化形式的大型的主动调控的过程。有研究表明,在糖尿病血管钙化中,PI3K/AKT信号通路能通过直接或者间接的方式激活wnt/β-catenin信号通路,从而促进了血管平滑肌细胞的成骨分化。本文分别从AKT、GSK-3β、Wnt/β-catenin等三个方面阐述其与血管钙化之间的联系。
- 许凯强刘勇
- 关键词：血管钙化AGESAKTGSK-3ΒWNT/Β-CATENIN
- 人股动脉平滑肌细胞体外培养及钙化模型的建立被引量：2
- 2016年
- 目的:建立人股动脉平滑肌细胞体外培养及血管钙化模型。方法:运用组织块贴壁法进行人股动脉平滑肌细胞体外原代和传代培养,倒置相差显微镜和免疫荧光染色方法对培养细胞进行鉴定,并建立血管钙化模型。结果:原代和传代培养的细胞生长良好。光镜下细胞呈长梭形"峰-谷"样生长,具有典型的平滑肌细胞特征。经传代培养至第8代,细胞生长特性未见异常改变,免疫荧光染色证实为平滑肌细胞。通过钙化培养后,VON KOSSA染色进一步验证平滑肌细胞钙化。结论:组织块贴壁法可成功进行人股动脉血管平滑肌细胞的体外培养,传代后细胞生物学特征稳定,钙化培养后可建立良好的平滑肌细胞钙化模型,为心血管疾病动脉粥样硬化的机制研究奠定了实验基础。
- 何虎强何延政刘勇
- 关键词：平滑肌细胞血管钙化
- 晚期糖基化终末产物通过AKT信号通路促进人主动脉血管平滑肌细胞钙化被引量：3
- 2017年
- 目的探讨蛋白激酶B在晚期糖基化终末产物(AGEs)引起的人主动脉血管平滑肌细胞(HASMCs)钙化中的作用。方法体外培养HASMCs,随机分为对照组、DMSO组、AGEs组和AGEs+LY294002组,冯库萨染色检测各组钙化情况;Western blot检测相关蛋白的表达。结果与对照组相比,AGEs组钙化相关蛋白骨形成蛋白-2(BMP-2)、骨保护素(OPG)表达量明显升高(P<0.05),且呈浓度依赖性;与对照组相比,AGEs组P-AKT表达量明显升高(P<0.05),且呈时间和浓度依赖性;与AGEs组相比,AGEs+LY294002组钙化相关蛋白BMP-2、OPG的表达量明显降低(P<0.01)。结论 AKT信号通路在AGEs引起的HAVSMCs钙化中可能起重要作用。
- 侯青春曾宏孙晓磊何虎强张雷袁罡刘勇
- 关键词：晚期糖基化终末产物血管平滑肌细胞钙化AKT
