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1株抗草甘膦棉花突变体草甘膦抗性的初步鉴定被引量：10: 2014年; 目的在于探明1株新的草甘膦抗性棉花突变体是否能用于发掘新的草甘膦抗性基因以及在农业生产中作为抗草甘膦种质的选育和利用的潜在价值。本文采用PCR的方法,在基因组和转录水平上排除了CP4-EPSPS基因对该突变棉株的污染;通过测定莽草酸含量,鉴定了该突变体草甘膦抗性的典型生理特征;通过盆栽试验研究了该突变体苗期对草甘膦抗性的表型。结果显示:不论草甘膦处理与否,突变棉株莽草酸的含量都没有显著的积累,在生理水平上显示出草甘膦抗性植株的显著特点;2叶期时草甘膦处理结果显示,突变棉株的草甘膦抗性表型同孟山都的品种对草甘膦的抗性表型基本一致。在基因组和转录水平的PCR检测结果都排除了突变棉株草甘膦抗性的获得是CP4-EPSPS基因污染造成的。结合对其他已报道的草甘膦抗性基因的类似排除,说明该抗性突变存在着自身特有的分子机理。; 巩元勇郭书巧束红梅何林池倪万潮; 关键词：棉花

转基因抗虫棉后时代棉花科技问题思考被引量：3: 2012年; 简述我国转基因抗虫棉研发的意义,分析转基因抗虫棉成功产业化以来棉花科技本身和生产上的基本问题,指出转基因抗虫棉促进了我国棉花生产高产稳产的发展,但是发展中也遇到了一系列的新问题,如抗虫资源的过度使用,遗传背景的匮乏,次生害虫的演变,农业现代化的新要求等。分析转基因抗虫棉后时代我国棉花科技取得新的重大突破的可能性。指出棉花科技要坚持生物技术为先导,在超高产的前提下,以品质改良和综合抗性为突破口,再创棉花生物技术研发的高峰,促进棉花生产再上新台阶。; 倪万潮郭书巧束红梅沈新莲张香桂徐鹏; 关键词：超高产综合抗性

陆地棉水通道蛋白GhNIP6.1基因的克隆及表达分析被引量：3: 2013年; 根据EST拼接的序列设计引物,利用RT-PCR技术,从陆地棉品种苏棉18中克隆获得了一个水通道蛋白基因GhNIP6.1。该基因开放阅读框包含903个核苷酸,编码300个氨基酸,分子量为30.97kD,理论等电点为8.99。GhNIP6.1蛋白的生物信息学分析表明:GhNIP6.1含有6个跨膜区,由5个环相连,其中环A、C和E在细胞膜外,环B、D和蛋白的N、C末端都位于细胞膜内,N末端79个氨基酸,C末端18个氨基酸,具有MIP家族典型的保守氨基酸序列;该蛋白的三级结构同拟南芥的AtNIP6.1非常相似,亚细胞定位也同AtNIP6.1一致,可能位于质膜中。进化分析发现,GhNIP6.1蛋白同拟南芥的AtNIP6.1蛋白相似性最高。进一步扩增棉花核基因组获得了2021bp的DNA序列,它包含5个外显子和4个内含子,所有外显子/内含子交接点都遵从gt/ag剪接规则。半定量分析表明,该基因在根、茎和叶中都有表达,其中真叶含量较高,子叶中没有表达。; 巩元勇郭书巧束红梅倪万潮; 关键词：陆地棉水通道蛋白表达序列标签

陆地棉GhNIP5.1基因的电子克隆及生物信息学分析被引量：7: 2013年; 水通道蛋白（Aquaporin，AQP）是古老的通道蛋白MIP（Membrane intrinsic protein）家族成员之一，是广泛存在于动植物和微生物中，负责转运水分子和某些小分子物质的一类膜嵌入式蛋白。1992年，第一个植物水通道蛋白从拟南芥中分离获得，由于其定位在液泡膜，因此被命名为液泡膜内在蛋白（TIP）。; 巩元勇郭书巧束红梅何林池倪万潮; 关键词：陆地棉水通道蛋白电子克隆生物信息学

转基因抗除草剂棉花的创制及产业化前景被引量：9: 2012年; 除草剂是现代农业生产体系的重要组分,根据其作用机理,可分为3类:第1类除草剂影响生物合成过程中酶或蛋白质的合成,如草甘膦、草铵膦、磺酰脲类除草剂和咪唑啉酮除草剂;第2类除草剂抑制植物光合作用,如百草枯、溴苯腈、阿特拉津等;第3类除草剂是影响植物生长发育的植物生长调节剂,如2,4-D等。针对除草剂的分子作用机理创制转基因抗除草剂作物,是现代育种学家和生产者追逐的热点之一。近年来,已成功开发出了一大批抗/耐除草剂相关的基因,部分基因已赋予作物抗除草剂特性。本文阐述了棉田常用除草剂的作用机理,以及近年来克隆的抗除草剂基因及其在棉花分子育种中的应用,指出转基因抗除草剂棉花的使用可能会引起杂草对除草剂产生抗性。同时对转基因抗除草剂棉花的发展前景进行了预测。; 郭书巧倪万潮王庆南沈新莲束红梅张香桂徐鹏巩元勇; 关键词：除草剂棉花转基因创制

抗草甘膦杂草的抗性机理研究进展被引量：16: 2012年; 草甘膦因其独特而优异的理化特性,自上市起便受到广泛的关注,现在已经成为全世界应用最广的除草剂之一。但是随着草甘膦抗性杂草的不断出现,草甘膦的应用前景受到严峻的挑战。文章综述了草甘膦生产及应用现状、草甘膦作用机理和草甘膦抗性杂草的发展,重点阐述了草甘膦抗性杂草的抗性机理。最后对如何通过延缓草甘膦抗性杂草的出现,保护草甘膦提出建议。; 巩元勇郭书巧束红梅王庆南倪万潮; 关键词：草甘膦

油菜素内酯对NaCl胁迫下棉花幼苗生理特性的影响被引量：18: 2011年; 该试验采用水培方法,探讨外施油菜素内酯对NaCl胁迫下棉花幼苗叶片光合速率、根系活力、叶片和根系抗氧化酶活性等生理指标的影响。结果显示:NaCl胁迫下棉花幼苗叶片光合速率下降、MDA含量上升、抗氧化酶(SOD、POD、CAT)活性降低,外施油菜素内酯可提高NaCl胁迫下棉花叶片中抗氧化酶活性、降低MDA含量、增强叶片光合能力;NaCl胁迫下棉花根系活力降低、MDA含量上升、SOD和CAT活性升高,外施油菜素内酯对根系活力、MDA含量、内源保护酶活性则影响较小。表明,油菜素内酯通过提高叶片抗氧化酶活性,减轻叶片膜脂过氧化程度,提高叶片光合性能,从而有效缓解盐胁迫对棉花叶片的伤害。; 束红梅郭书巧沈新莲倪万潮; 关键词：棉花 NACL 油菜素内酯生理特性

植物表达载体pCAMBIA2300-35S-GUS-CaMVterm的构建及验证被引量：4: 2013年; 为拓宽pCAMBIA2300表达载体的使用范围,进一步方便植物基因工程科研工作者在构建表达载体时的需要,利用SacⅠ和XhoⅠ双酶切pJIT166载体获取"35S-GUS-CaMVterm"片段,将该片段插入到pCAMBIA2300表达载体的多克隆位点区,构建完成了pCAMBIA2300-35S-GUS-CaMVterm表达载体。所构建的表达载体通过农杆菌介导转化拟南芥,获得拟南芥转基因植株,转基因植株的GUS染色结果进一步验证了本文所构建表达载体的正确性和实用性。该表达载体的成功构建,方便了构建基因超表达载体,以及使得研究启动子的活性及GUS组织化学定位成为可能,还可以通过GUS染色对转基因植物进行鉴定,为植物基因工程科研工作提供了一个较好的备选植物表达载体。; 巩元勇冯永坤倪万潮束红梅郭书巧刘来华; 关键词：植物表达载体

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江苏省自然科学基金(BK2010465)