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去乙酰化酶SIRT1在猪不同组织中的表达规律性分析被引量：4: 2012年; 【目的】分析去乙酰化酶SIRT1在猪不同组织中的表达规律性,为研究猪SIRT1基因功能奠定基础。【方法】采用RT-PCR和Western blotting方法检测猪脑、肝脏、胰脏、脂肪、卵巢、肾脏、心脏、脾脏等组织中SIRT1基因mRNA和蛋白的表达量。【结果】在猪脑、肝脏、胰脏、脂肪、卵巢、肾脏、心脏、脾脏等组织中均有SIRT1mRNA和蛋白表达,且以卵巢组织中的表达量最高,心脏中的表达量最低。【结论】去乙酰化酶SIRT1在猪不同组织中的表达具有一定规律性,可能与猪的脂肪代谢和繁殖活动密切相关,直接或间接调节猪的能量代谢和生殖活动。; 李碧侠赵芳任守文王学敏方晓敏付言峰涂枫王金玉; 关键词：SIRT1 表达量

去乙酰化酶SIRT1及其对细胞凋亡调控的研究进展被引量：3: 2012年; 细胞凋亡在机体生理功能中起着重要作用,是机体清除体内损伤、衰老及具有潜在威胁性细胞的一种基本方式。沉默信息调节因子2相关酶1(silent information regulator 2homolog 1,SIRT1)作为哺乳动物Sirtuin家族的一员,自发现以来作为重要的调控因子被广泛研究;最近研究报道SIRT1调控一系列转录因子如p53、FOXO家族和NF-κB,在细胞凋亡中起关键的作用。作者主要阐述了SIRT1的分子生物学特性、表达调控及SIRT1与细胞凋亡的关系。; 赵芳李碧侠任守文刘红林王学敏方晓敏; 关键词：细胞凋亡 SIRT1

猪SIRT1基因荧光定量PCR检测方法的建立被引量：5: 2011年; SIRT1基因对细胞的生存、衰老、凋亡等生理活动起着十分重要的调节作用。为了建立荧光定量PCR技术检测猪SIRT1基因表达量,根据GenBank中猪SIRT1 mRNA序列设计引物,建立基于SYBR Green I染料技术的荧光定量PCR检测方法。结果表明,所建立的荧光定量PCR检测方法具有快速、敏感和特异性强等特点,为猪SIRT1基因定量分析提供了技术平台。; 李碧侠赵芳任守文王学敏方晓敏; 关键词：SIRT1 荧光定量PCR

去乙酰化酶SIRT1基因在猪不同发育阶段卵泡颗粒细胞中的表达规律研究被引量：1: 2014年; 【目的】分析去乙酰化酶SIRT1基因在猪不同发育阶段卵泡颗粒细胞中的表达规律,为进一步了解SIRT1基因在猪卵泡发育中的调控机制奠定基础。【方法】采集猪卵巢,分离卵泡颗粒细胞,根据直径将其分为≤1.5mm,〉1.5~≤3.0mm,〉3.0~≤5.0mm,〉5.0mm 4个组,利用免疫组织化学方法分析SIRT1蛋白在不同发育阶段卵泡颗粒细胞中的表达定位,利用qRT-PCR和Western blotting方法分析SIRT1基因在不同直径卵泡颗粒细胞中mRNA和蛋白的表达量。【结果】SIRT1蛋白在不同发育卵泡颗粒细胞中均有表达,随着卵泡的发育,SIRT1蛋白表达量逐渐升高,其在原始卵泡中表达量最低,在其余卵泡中表达量较高。SIRT1mRNA及其蛋白在不同直径的卵泡中表达趋势一致,在直径〉1.5~≤3.0mm卵泡中的表达量极显著高于其他直径卵泡（P〈0.01）。【结论】SIRT1基因在不同卵泡中的表达具有规律性,与猪卵巢卵泡发育具有潜在的相关性。; 李碧侠赵芳付言峰任守文王金玉; 关键词：卵泡发育

白黎芦醇诱导的去乙酰化酶SIRT1高表达对猪卵巢颗粒细胞凋亡的影响被引量：7: 2013年; 本研究旨在分析体外白藜芦醇对去乙酰化酶SIRT1表达量的影响,探讨去乙酰化酶SIRT1表达量与颗粒细胞凋亡间的相关性。采用qRT-PCR方法进行SIRT1 mRNA分析,Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒和流式细胞仪检测猪卵巢颗粒细胞凋亡率。结果表明:培养液中白黎芦醇浓度达到50μmol/L时,处理组颗粒细胞中SIRT1 mRNA表达量极显著高于空白对照组(P<0.01);与颗粒细胞中SIRT1表达量规律相同,随着白黎芦醇浓度的升高,颗粒细胞活力逐渐降低,凋亡率逐渐升高。综合分析,白藜芦醇可诱导猪卵巢颗粒细胞中去乙酰化酶SIRT1的表达,加速猪卵巢颗粒细胞凋亡,SIRT1表达与猪卵巢颗粒细胞凋亡存在一定相关性。; 李碧侠赵芳任守文王学敏方晓敏付言峰涂枫王金玉; 关键词：白黎芦醇颗粒细胞 SIRT1 凋亡

猪卵巢颗粒细胞中SIRT1基因表达量对卵泡闭锁的影响: 2013年; SIRT1是一种二氢尿嘧啶脱氢酶(NAD)依赖的具有去乙酰化酶活性的多功能转录调节因子。本研究分析不同闭锁阶段卵泡颗粒细胞中SIRT1基因表达规律性,探讨SIRT1基因表达量与卵泡发育的关系。采用免疫组织化学方法分析SIRT1蛋白表达定位,qRT-PCR方法分析SIRT1 mRNA表达量。结果表明,SIRT1蛋白在晚期闭锁卵泡中最高,健康卵泡中最低,SIRT1 mRNA表达规律性与SIRT1蛋白表达规律性一致。综合分析,颗粒细胞中SIRT1基因随着卵泡的闭锁表达量逐渐升高,SIRT1表达与猪卵巢卵泡发育存在一定相关性。; 李碧侠赵芳任守文王学敏方晓敏付言峰涂枫王金玉; 关键词：卵泡发育基因表达

猪卵巢颗粒细胞中SIRT1基因表达量与雌激素分泌的相关性被引量：3: 2013年; SIRT1是一种二氢尿嘧啶脱氢酶依赖的具有去乙酰化酶活性的多功能转录调节因子。为分析体外白黎芦醇和尼克酰胺诱导的猪卵巢颗粒细胞中SIRT1 mRNA表达量的变化与颗粒细胞分泌雌激素的相关性,采用qRT-PCR方法进行SIRT1 mRNA分析,猪雌激素酶联免疫分析试剂盒检测培养液中雌激素浓度。结果表明,培养液中白黎芦醇浓度达到50μmol/L时,颗粒细胞中SIRT1 mRNA表达量极显著高于空白对照组(P<0.01);相反,尼克酰胺浓度达到50μmol/L时,处理组颗粒细胞中SIRT1 mRNA表达量极显著低于空白对照组(P<0.01);培养液中,颗粒细胞分泌雌激素的变化规律与SIRT1 mRNA表达规律一致,相关分析表明,两者存在较强的正相关,相关系数为0.966 8。; 李碧侠赵芳付言峰王学敏方晓敏涂枫任守文王金玉; 关键词：卵巢颗粒细胞雌激素

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江苏省自然科学基金(BK2010466)