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包埋玻璃化法超低温保存怀山药种质的技术研究: ＜正＞怀山药（Dioscorea opposita Thunb．）是薯蓣科薯蓣属的多年生缠绕性藤本植物,主产于河南省温县、武陟、沁阳等地,被医学家列为四大怀药之首,是我国道地的中药材。它含有人体必需的氨基酸、蛋白质、淀粉...; 李明军周娜刘杰张晓丽赵喜亭; 关键词：怀山药超低温保存再生率; 文献传递

山药微型块茎诱导形成的影响因子研究被引量：15: 2008年; 目的探讨培养方式、碳源、氮源对山药微型块茎诱导形成的影响,以期找到适宜的微型块茎诱导形成的培养方式和培养基。方法以B号山药试管苗为材料,运用一步培养法和两步培养法筛选最佳培养方式,在此基础上于培养基中添加不同氮源和碳源进行诱导培养,定期对微型块茎的诱导情况进行统计。结果两步培养法、60g/L的碳源(白砂糖或蔗糖)、[NO3-]/[NH4+]为3∶1、总氮量为30mmol/L时有利于山药微型块茎的诱导形成。结论首次建立了两步培养法诱导山药微型块茎形成的培养模式,筛选出了适宜的碳源和氮源,为微型块茎的离体诱导形成及工厂化生产奠定了技术基础。; 李明军刘欣英李萍张晓丽赵喜亭柳俊谢从华; 关键词：山药碳源氮源

生长素和细胞分裂素对怀山药微型块茎诱导形成的影响被引量：14: 2008年; 以B号山药试管苗为材料,研究了生长素NAA,2,4-D和细胞分裂素KT,6-BA单独使用对怀山药微型块茎诱导形成的影响。结果表明,与对照相比,生长素有利于微型块茎的有效数量、总重量、单株平均微型块茎数及块茎指数的显著提高,NAA和2,4-D诱导微型块茎形成的适宜浓度分别为0.5 mg/L和0.1 mg/L,且以2,4-D 0.1 mg/L的诱导效果最好;细胞分裂素对微型块茎的形成不利,其中6-BA效果更差,微型块茎各项指标均无显著提高,且浓度大于2 mg/L时无微型块茎形成。; 李明军邓丽刘欣英赵喜亭张晓丽刘文英; 关键词：怀山药 NAA 2,4-D KT 6-BA

山药种质包埋玻璃化超低温保存再生植株的稳定性分析被引量：8: 2012年; 为了验证前期建立的包埋玻璃化超低温保存技术是山药(Dioscorea opposita)种质资源离体保存的一种有效的方法,对包埋玻璃化超低温保存后的山药再生植株的形态、生理和同工酶酶谱进行了研究。结果表明:与常温保存的植株相比,供试的铁棍山药再生植株的平均株高、叶片数、芽数和茎节长,叶片中叶绿素、可溶性蛋白和可溶性糖含量以及超氧化物歧化酶(SOD)活力在绝对值上虽有差异,但均未达到显著水平,且能移栽成活,保持了形态和生理的稳定性;供试的铁棍、太谷、怀庆和嘉祥细长毛4种山药再生植株的SOD和蛋白水解酶的同工酶条带数目及强度均未发生变化,保持了酶蛋白的稳定性。说明前期建立的包埋玻璃化法超低温保存技术是山药种质离体保存的一种有效方法。; 赵喜亭王苗邵换娟李翔李海兵李明军; 关键词：山药超低温保存稳定性

玻璃化法超低温保存怀山药种质的技术研究被引量：10: 2006年; 目的研究怀山药种质资源的玻璃化超低温保存技术。方法以B号怀山药带芽茎段为材料进行玻璃化超低温保存，并采用培养法检测保存后材料的成活率，从而筛选出最佳的玻璃化超低温保存技术体系。结果 B号怀山药带芽茎段玻璃化超低温保存较佳的技术体系是继代生长60d的怀山药无菌苗置4C冰箱低温锻炼7d；在无菌条件下切取1～1．5cm的带芽茎段，转至含5％蔗糖＋3％甘露糖的培养基内，置4（？冰箱预培养2d；用60％的PVS1（22％甘油＋13％乙二醇＋13％聚乙二醇＋10％二甲基亚砜）在0℃处理60rain，再用100％的PVS。在0C条件下处理60min，随即迅速投入液氮；保存24h后，在37℃水浴中快速化冻，用含7％蔗糖的MS培养液洗涤4次，每次停留10min；转至再生培养基（MS＋KT2mg／L＋NAA0．02mg／L）再培养，成活率可达75％以上，再生苗与常温苗形态指标差异不大。结论本试验成功地建立了怀山药种质资源玻璃化法超低温保存的技术体系，为怀山药种质资源的长期保存提供了一条有效途径。; 洪森荣李明军; 关键词：怀山药种质资源玻璃化法超低温保存

PP333对怀地黄种质离体保存的影响被引量：8: 2009年; 研究了PP333对怀地黄“85-5”脱毒苗离体保存的影响．结果表明：适宜浓度PP333（1-2mg·L^-1，单位下同）可以延缓脱毒苗的生长速度，延长其保存时间，减少其继代次数；高浓度PP333（4～8）对其生长产生毒害作用，不利于种质保存．适宜怀地黄脱毒苗离体保存的培养基为Ms＋NAA0．02＋6-BA0．2＋PP3331，在该培养基上保存180d后，存活率达68％，恢复培养时生长正常，成活率达100％．; 张晓丽刘文英张楠周彩云李明军; 关键词：怀地黄脱毒苗离体保存 PP333

怀山药种质超低温保存技术的比较研究: ＜正＞怀山药（Dioscorea opposita Thunb.）为著名的"四大怀药"之一,富含皂苷、粘液质、胆碱、山药碱、淀粉、蛋白质、脂肪、糖类、氨基酸、无机盐、植酸、多巴胺和钙等营养物质,; 李明军赵喜亭张晓丽李海兵宋萍萍刘文英赵姣; 关键词：怀山药超低温保存玻璃化法; 文献传递

怀山药种质资源的包埋玻璃化超低温保存与植株再生被引量：20: 2010年; 通过对怀山药(Dioscorea opposita)种质资源的包埋玻璃化超低温保存与植株再生进行研究,结果表明:将低温下锻炼7天的怀山药试管苗带芽茎段放入预培养基中,低温下培养3天,然后在室温下用3%的海藻酸钠和0.5mol·L-1CaCl2包埋,包埋珠用MS+0.2mol·L-1蔗糖+2mol·L-1甘油+50g·L-1二甲基亚砜在0°C下装载60分钟,用30%甘油+15%乙二醇+10%二甲基亚砜+15%聚乙二醇+0.4mol·L-1蔗糖在0°C下脱水60分钟,迅速投入液氮,24小时后立即用40°C水浴快速化冻,再用MS+0.5mol·L-1蔗糖溶液洗涤2次,转入再生培养基中培养,可获得再生植株。再生植株成活率因基因型而异,铁棍山药、太谷山药、怀庆1号山药和B号山药的成活率分别为64.29%、49.21%、13.11%和39.81%。; 李海兵周娜赵姣李翔冯秋妍赵喜亭李明军; 关键词：超低温保存怀山药再生植株

山药基因组DNA的提取和RAPD反应条件的优化被引量：18: 2007年; 研究了山药基因组DNA的提取方法;对Mg2+浓度、dNTPs浓度、引物浓度和Taq酶用量进行了优化,建立了最佳的RAPD反应体系:在25μL反应体系中Mg2+浓度为2.0 mmol.L-1,dNTPs浓度为0.25 mmol.L-1,引物浓度为20 pmol.L-1,Taq酶1.5 U,模板DNA为200 ng.扩增程序为:95℃预变性7 min;94℃变性30 s,36℃退火45 s,72℃延伸2 min,共35个循环;72℃终延伸10 min.; 李明军徐鑫张晓丽刘永康; 关键词：山药 DNA RAPD

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国家自然科学基金(30670208)