国家自然科学基金(31272552)
- 作品数：16 被引量：55H指数：4
- 相关作者：杨桂连王春凤杨文涛刘博宇叶丽萍更多>>
- 相关机构：吉林农业大学吉林工程技术师范学院长春理工大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金国家高技术研究发展计划吉林省科技发展计划基金更多>>
- 相关领域：医药卫生农业科学生物学文化科学更多>>
- 猪RAG2蛋白的基因克隆及原核表达
- RAG-1和RAG-2基因是未成熟B细胞和T细胞分化所必须的,且只在初级淋巴器官中表达,而不在成熟细胞中表达,这个特征使RAG-1或RAG-2成为研究这些器官发育的一个实用的指标。然而,目前市场上人和兔的RAG蛋白的特异...
- 晋玉北杨文涛黄科谚刘晶陈宏亮刘琼姜延龙杨桂连王春凤
- 关键词：克隆原核表达
- 文献传递
- 表达A型产气荚膜梭菌FBA蛋白的延迟裂解型沙门菌载体的构建被引量：2
- 2018年
- 利用PCR技术扩增FBA基因序列，并将其克隆到表达栽体pET-30a（＋）中，获得pET-30a—FBA重组质粒。将重组质粒转化到BL21感受态细胞中，经IPTG诱导表达His—FBA蛋白，通过His—tagNi柱亲和层析纯化后，免疫新西兰大白兔制备FBA特异性多克隆抗体。再利用PCR技术将FBA基因与表达载体pYA3681连接，构建了表达载体pYA5129，电转至延迟裂解性沙门菌x11802后以制备的FBA多抗为一抗进行免疫印迹试验，验证了其免疫原性；同时比较了不同浓度阿拉伯糖对重组沙门菌生长性能的影响，优化了阿拉伯糖最佳添加浓度，为后续研究其作为肉鸡坏死性肠炎疫苗的可行性奠定基础。
- 姜延龙王占楠曾庆丰王棋姚心茹王成宇胡译文杨桂连王春凤
- 关键词：A型产气荚膜梭菌原核表达多克隆抗体
- C型凝集素受体在寄生虫感染免疫调节中的作用被引量：4
- 2015年
- C型凝集素(C-type lectin)是一类钙依赖性糖结合蛋白,其受体依赖钙离子(Ca2+)的参与来识别碳水化合物配体。目前研究发现,该类受体可识别糖蛋白并激活下游免疫。本文总结了数种C型凝集素受体在寄生虫感染中的作用。
- 刘博宇李盼杨桂连
- 关键词：C型凝集素受体寄生虫免疫逃避
- 青蒿素在原虫病治疗中的作用及机理研究进展被引量：2
- 2017年
- 原虫是一种单细胞真核生物,整个虫体由一个细胞构成,可以寄生在机体的腔道、体液、组织或细胞内。原虫病严重危害人类健康和养殖业发展。目前,广泛使用的化学药物治疗会产生耐药性、药物残留和毒副作用等弊端。青蒿素作为一种从植物黄花蒿中提取的天然物质,对多种原虫具有治疗作用,与化学药物相比更加安全、廉价甚至更高效。本文对青蒿素在原虫病治疗中的作用和机理进行综述,旨在为其应用于原虫病治疗提供理论依据。
- 杨桂连石昊林王春凤
- 关键词：青蒿素利什曼原虫艾美尔球虫弓形虫疟原虫
- 基因工程乳酸菌作为活载体表达外源蛋白及疾病防治研究进展被引量：2
- 2019年
- 乳酸菌是一类可以发酵碳水化合物产生乳酸的兼性厌氧菌总称,包括乳球菌、乳杆菌、链球菌、片球菌和双歧杆菌等,美国食品和药品监督管理局(FDA)将许多乳酸菌定义为“食品级”微生物,极少数如化脓性链球菌,肺炎链球菌是致病菌。乳酸菌可以调节肠道菌群组成从而维持肠道稳态,提高免疫力;还可竞争型地占位,定殖在肠道表面诱导黏膜液以及肠道上皮细胞抗菌肽(AMP)的产生[1].
- 刘琼陈宏亮姜延龙王春凤
- 关键词：基因工程肠道上皮细胞活载体肺炎链球菌疾病
- 猪RAG2蛋白的基因克隆及原核表达
- RAG-1和RAG-2基因是未成熟B细胞和T细胞分化所必须的,且只在初级淋巴器官中表达,而不在成熟细胞中表达,这个特征使RAG-1或RAG-2成为研究这些器官发育的一个实用的指标。然而,目前市场上人和兔的RAG蛋白的特异...
- 晋玉北杨文涛黄科谚刘晶陈宏亮刘琼姜延龙杨桂连王春凤
- 关键词：克隆原核表达
- 利用网络教学资源提高动物寄生虫病学教学效果被引量：1
- 2017年
- 《动物寄生虫病学》是动物医学专业主干课程之一,原有教学方法已难以适应教学需求。互联网技术的迅猛发展和网络普及为利用网络资源提高教学效果提供了平台。介绍了如何合理利用寄生虫学网络教学资源提高教学效果,旨在为动物寄生虫病学教学改革提供参考。
- 杨桂连
- 关键词：网络资源动物寄生虫病学教学
- 旋毛虫感染小鼠树突状细胞相关C型凝集素-2动态变化被引量：4
- 2016年
- 目的探讨旋毛虫(Trichinella spiralis)感染小鼠树突状细胞(DC)的C型凝集素-2(dectin-2)的变化情况。方法 72只雌性BABL/c小鼠随机分成两组,实验组每鼠灌服200条旋毛虫肌幼虫,分别于感染后7、14、21、28、35和42 d各取小鼠6只,分离脾脏和肠系膜淋巴结(MLN),制备单细胞悬液,用流式细胞术检测脾脏和MLN内DC上dectin-2的表达情况;对照组不感染旋毛虫肌幼虫。取C57BL/6小鼠骨髓,体外条件下用粒细胞-巨噬细胞集落刺激因子(GM-CSF)和白细胞介素4(IL-4)诱导培养髓源树突状细胞(BMDC)。培养成熟后加入旋毛虫肌幼虫排泄/分泌抗原(ES)100μg/ml,同时设PBS对照组,分别于第6、12、24、36和48小时用流式细胞术检测dectin-2的表达量。结果流式细胞术检测结果显示,实验组BABL/c小鼠感染旋毛虫肌幼虫后7 d,脾脏中DC的dectin-2表达量为(7.0±0.7)%,对照组为(15.1±1.6)%,实验组明显降低,差异有统计学意义(P<0.01)。实验组小鼠感染旋毛虫肌幼虫后7、21和28 d MLNDC的dectin-2表达量分别为(11.1±3.5)%、(12.4±1.4)%和(6.9±1.0)%,对照组分别为(6.6±0.4)%、(4.9±0.4)%和(4.0±1.4)%,差异有统计学意义(P<0.05)。体外实验结果显示,ES抗原刺激BMDC后,第6、12、24、36、48小时dectin-2的表达量分别为(9.4±2.2)%、(6.9±1.8)%、(6.9±0.7)%、(9.1±1.9)%和(15.9±1.9)%。PBS组为(21.3±6.3)%。第6、12、24、36小时组与PBS组比较表达量降低,差异有统计学意义(P<0.01)。结论旋毛虫感染可以引起小鼠树突状细胞上的dectin-2受体表达量发生改变。
- 刘博宇王丞邢鑫陈宏亮姜晶蔡亚南王春凤杨桂连
- 关键词：旋毛虫分泌抗原树突状细胞
- 嗜酸乳酸杆菌对自主活动受限型应激小鼠肠道黏膜免疫状态的影响被引量：1
- 2015年
- 目的:探讨嗜酸乳酸杆菌(Lactobacillus acidophilus,LA)对自主活动受限型应激小鼠肠道黏膜免疫状态的影响。方法:以健康雌性BALB/c小鼠为受试动物,分为常规饲养组(NC组)、常规饲养条件灌胃LA组(NC+LA组)、应激组(S组)、应激条件灌胃LA组(S+LA组),小鼠的LA灌胃剂量为10~8CFU/d;应激组小鼠每天被限制自主活动3 h;15 d后取材,采用流式细胞术、酶联免疫吸附(enzyme-linked immunosorbem assay,ELISA)等方法,对肠系膜淋巴结(mesenteric lvmph nodes,MLN)中CD4^+T细胞、CD8^+T细胞和CDllc^+树突细胞(CDllc^+dendritic cell,CDllc^+DC)比例,结肠组织白细胞介素-10(intefleukin-10,IL-10)和白细胞介素-17(intefleukin-17,IL-17)水平,以及小肠总分泌型免疫球蛋白A(secreted immunoglobulin A,sIgA)水平进行检测。结果:常规饲养条件下,LA能极显著提高小鼠MLN中CD4^+T细胞比例(P<0.01),显著提高MLN中CDllc^+DC比例、小肠总sIgA水平和结肠组织IL-10水平(P<0.05),显著降低结肠组织IL-17水平(P<0.05),而对MLN中CD8^+T细胞比例无显著影响(P>0.05);应激条件能极显著降低小鼠MLN中CD4^+T细胞比例和CDllc^+DC比例(P<0.01),显著降低CD8^+T细胞比例(P<0.05),极显著降低小鼠结肠组织IL-10水平和小肠总sIgA水平(P<0.01),极显著提高结肠组织IL-17水平(P<0.01);应激条件下,LA能显著提高小鼠MLN中CD4^+T细胞比例和CDllc^+DC比例(P<0.05),显著提高小鼠结肠组织IL-10水平和小肠总sIRA水平(p<0.05),并显著降低结肠组织IL-17水平(p<0.05),而对小鼠MLN中CD8^+T细胞比例无显著影响(P>0.05)。结论:给予自主活动受限型应激小鼠LA干预,可提高小鼠MLN中CD4^+T细胞和CDllc^+DC比例,上调结肠IL-10和小肠总sIgA分泌水平,下调结肠IL-17分泌水平,调节应激小鼠的肠道黏膜免疫状态。
- 郝凤奇李景梅杨桂连
- 关键词：应激肠道黏膜免疫
- H9N2亚型禽流感病毒HA-DCpep融合基因重组乳杆菌的构建及免疫原性分析被引量：3
- 2014年
- 为了构建HA-DCpep融合基因重组乳杆菌并检测其表达产物的免疫原性,以pSIP409-HA质粒为模板,采用PCR方法将HA基因和DCpep基因融合。将目的基因克隆至pGEM-T载体中,进行测序。再将阳性基因亚克隆至大肠杆菌-乳杆菌穿梭表达载体pSIP409中,电转化入植物乳杆菌NC8中,经SppIP诱导后对表达产物进行Western-blot分析。结果显示,重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep的裂解物中出现大小约为64ku的反应条带,大小与预期结果相符,表明重组融合蛋白具有良好的反应原性。重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep口服免疫SPF雏鸡后,在免疫后第14天可被检出特异性HI抗体,28d后达到高峰。结果表明,应用重组菌NC8-pSIP409-HA-DCpep免疫雏鸡能刺激机体产生特异性体液免疫应答反应,这为研制预防禽流感的重组乳杆菌口服制剂奠定了基础。
- 石少华杨文涛叶丽萍黄海斌蔡若鹏李雨宸闫晓月王春凤杨桂连
- 关键词：禽流感病毒免疫原性
