河北省自然科学基金(C2010000248)
- 作品数：8 被引量：47H指数：3
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- 相关机构：河北大学河北凯盛医药科技有限公司更多>>
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- 相关领域：医药卫生生物学文化科学更多>>
- 一种大鼠慢性哮喘模型的建立与评价被引量：27
- 2010年
- 本实验旨在探讨一种新的大鼠慢性哮喘模型建立方法。采用组胺激发对SD大鼠进行筛选,模型组经腹腔和皮下多点注射OVA(卵清白蛋白)致敏大鼠,1%OVA雾化激发1周建立急性模型,0.1%OVA雾化激发12周建立慢性模型,对照组以生理盐水代替。通过检测大鼠肺组织病理切片、BALF(肺泡灌洗液)炎性细胞构成、血清总IgE和OVA特异性IgE、肺功能等指标变化情况及被动皮肤过敏试验对模型进行评价,并对急、慢性模型进行了比较。结果显示,慢性哮喘模型组气道平滑肌及基底膜厚度、杯状细胞增生及胶原沉积情况、皮肤蓝斑溶出物光吸收度值、血清总IgE和OVA特异性IgE含量等指标均显著高于急性模型组,但气道炎性细胞浸润程度及BALF中嗜酸性粒细胞比例低于急性模型组;急、慢性模型组呼吸速率及呼气流量间无显著性差异;急、慢性哮喘模型组中以上各指标均显著高于正常对照组。因此,本实验成功制备大鼠慢性哮喘模型,基本复制了人哮喘病理生理特征。
- 刘中成张艳芬
- 关键词：慢性哮喘气道重塑
- 以IgE/FcεRI信号通路为靶标治疗变态反应性疾病研究进展被引量：8
- 2011年
- 变态反应性疾病已成为全球性的社会卫生问题,IgE与靶细胞表面高亲和力受体FcεRI结合是I型变态反应的关键步骤。针对IgE/FcεRI信号通路重要靶点进行药物设计是当前治疗变态反应性疾病药物研究的热点,主要集中在以IgE、IgE高亲和力受体FcεRI以及信号通路关键信号分子为靶点的抗体、多肽、疫苗、融合蛋白及小分子化合物等相关药物研究。本文综述了近年来以IgE/FcεRI信号通路为靶点的代表性药物在变态反应性疾病中的作用及其机制。
- 刘中成时海浪张艳芬赵丽君
- 关键词：IGEFCΕRI信号通路变态反应性疾病
- 核酸适配子在IgE检测中的应用被引量：1
- 2013年
- 核酸适配子是一类经SELEX技术筛选出来的寡聚核苷酸,其功能与单克隆抗体类似但在诸多方面明显优于抗体,可用于测定靶物质含量等。免疫球蛋白E(immunoglobulin E,IgE)是介导过敏反应的关键因子,IgE定量检测是临床诊断过敏性疾病的重要指标。该文主要综述了核酸适配子在IgE检测中的应用。
- 刘中成赵丽君张艳芬解瑶时海浪
- 关键词：IGE
- 人Cε3-Cε4基因克隆、表达及纯化复性被引量：1
- 2011年
- 利用RT-PCR技术从变态反应疾病患者外周血淋巴细胞中克隆出人Cε3-Cε4基因,将其克隆至原核表达载体pET-17b中,转化大肠杆菌并进行诱导表达,SDS-PAGE后Cε3-Cε4蛋白表达量占细菌总蛋白的30.7%。菌体经裂解、2 mol/L尿素洗涤后,绝大部分杂蛋白被去除,目的蛋白纯度达85.5%。用8 mol/L尿素溶解包涵体,经Ni-NTA柱对变性状态下的目的蛋白进行纯化,并利用降低尿素梯度的方法对纯化的蛋白进行复性,最终目的蛋白纯度为95.3%。Western blotting方法对Cε3-Cε4蛋白进行鉴定,为该蛋白的进一步相关研究奠定基础。
- 刘中成时海浪张艳芬赵丽君王培莹常斌李雨诗
- 观赏蕨类卷柏——翠云草的引种栽培和繁殖技术被引量：3
- 2011年
- 分子生物学在药学领域中的地位和作用愈显突出，已经成为药学专业重要的基础课程之一。对其教学改革进行了多年的实践和探索，通过不断优化、更新教学内容、引入实例教学、启发式教学、以研促学、CAI教学和开展网络课堂等新的教学手段和方法，初步建立了一种适合药学专业的分子生物学教学体系，提高了教学质量。
- 刘中成张艳芬
- 关键词：药学
- 大鼠Fcε3-4基因克隆及原核表达
- 2012年
- 为了获得重组Fcε3-4蛋白,从变态反应性哮喘大鼠脾组织中提取总RNA,通过RT-PCR方法克隆大鼠Fcε3-4基因,构建成原核表达载体pET17b-Fcε3-4,并转化大肠杆菌进行诱导表达,Fcε3-4蛋白主要以包涵体形式存在.经Ni-NAT亲和层析柱对尿素溶解的Fcε3-4蛋白进行了纯化,并利用降低尿素梯度的方法柱上对纯化蛋白进行了复性.经Western Blotting和ELISA鉴定,Fcε3-4蛋白具有Fcε的免疫特异性,能被抗大鼠Fcε抗体特异性识别,为下一步研究该蛋白奠定了基础.
- 张艳芬时海浪王培莹乔晓强刘中成
- 关键词：克隆
- Cε3-Cε4蛋白核酸适配子筛选与鉴定被引量：6
- 2012年
- 设计并合成随机ssDNA文库,以硝酸纤维素膜为筛选介质,利用SELEX技术筛选人Cε3-Cε4蛋白特异性高亲和力核酸适配子,通过对退火温度、循环次数及靶蛋白与ssDNA摩尔比等关键参数进行优化,建立了适合的筛选体系。ELISA测定各适配子亲和力,获得了人Cε3-Cε4蛋白高亲和力、高特异性适配子,并分析了其一级结构和二级结构。以所获高亲和力适配子分别作为捕获适配子和检测适配子,建立了酶联适配子吸附试验(enzyme-linked aptamers sorption assay,ELASA)方法,灵敏度达到120 ng.mL-1,可用于人IgE的定量检测。
- 刘中成赵丽君张艳芬时海浪解瑶
- 关键词：免疫球蛋白E适配子
- IL-1ra-Fcε融合基因在大鼠体内表达条件优化及免疫原性分析被引量：1
- 2010年
- 目的探索基因治疗载体pCI-neo-IL-1ra-Fcε在大鼠体内的最适表达条件及免疫原性。方法采用气道滴注方式将pCI-neo-IL-1ra-Fcε载体滴注至大鼠肺部,利用RT-PCR及Westernblot方法检测不同剂量(0.25、0.5、2.5mg.kg-1)载体在不同时间(d4、d7、d20)的表达量,并采用免疫组化方法进行验证。间接ELISA法检测滴注后IL-1ra-Fcε蛋白IgG抗体变化,并对IgG抗体亚型IgG2a和IgG1进行分析。结果3种不同剂量载体在滴注后d20均可检测到目的蛋白表达,2.5mg·kg-1组蛋白表达量明显高于另外2组;以0.25mg·kg-1剂量滴注载体,目的基因d4时未见表达,d7时表达量增加,d20时达到最大值;免疫组化结果显示IL-1ra-Fcε基因在大鼠肺组织中得到有效表达。结论成功建立pCI-neo-Ira-Feε载体在大鼠体内最适表达条件,此载体可诱导机体产生Th1型免疫应答。
- 刘中成张艳芬
- 关键词：基因治疗免疫原性哮喘
