江苏省高校自然科学研究项目(08KJB320018)
- 作品数：3 被引量：18H指数：2
- 相关作者：董晨关凤军李俊霞贺敏敏丰炳峰更多>>
- 相关机构：徐州医学院附属医院更多>>
- 发文基金：江苏省高校自然科学研究项目更多>>
- 相关领域：医药卫生更多>>
- 全骨髓法培养大鼠骨髓间充质干细胞及其生物学特性被引量：9
- 2009年
- 目的建立一种简便有效的体外分离纯化及培养扩增大鼠骨髓间充质干细胞(MSC)的方法,研究MSC的生物学特性。方法贴壁培养法分离纯化大鼠MSC,体外培养和连续传代,在倒置显微镜下连续观察细胞的形态变化;利用四唑盐比色(MTT)法测定MSC的生长曲线;流式细胞仪(FCM)鉴定MSC膜抗原。结果原代分离的MSC在接种后48 h贴壁,细胞形态为椭圆形、多角形及短梭形,12天时细胞呈长梭形并达到90%单层融合。经传代扩增,细胞进一步纯化。细胞传代后2天内处于潜伏期,3天后进入生长期,7天后进入平台期。FCM检测CD45、CD90阳性率分别为19.60%、95.38%。结论贴壁培养法能有效分离纯化大鼠MSC,用此方法培养的细胞生长稳定,增殖能力活跃,具有MSC的一般生物学特性,为其成为组织工程理想的种子细胞提供了进一步的支持。
- 丰炳峰董晨关凤军
- 关键词：间充质干细胞骨髓
- IgA肾病小鼠模型的建立与鉴定被引量：8
- 2010年
- 目的建立小鼠IgA肾病模型,为临床研究IgA肾病提供实验依据。方法昆明种小鼠30只,分为正常对照组(10只)、模型组(20只)。采用口服牛血清白蛋白(BSA)联合尾静脉注射葡萄球菌肠毒素B(SEB)的方法制作小鼠IgA肾病模型。第12周末收集新鲜尿液,显微镜下尿红细胞定性检验;摘眼球取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);光镜法观察肾小球系膜细胞及基质变化;电镜法检测系膜区有无电子致密物沉积;免疫荧光法观察系膜区IgA沉积情况。结果第12周末,模型组小鼠均出现不同程度的血尿;Scr、BUN较正常对照组显著增高(P<0.01);光镜下系膜细胞及基质明显增生;电镜下系膜区电子致密物沉积;免疫荧光示系膜区大量的IgA沉积,而正常对照组则无上述表现。结论IgA肾病小鼠模型效果良好,病理、电镜及临床指标与人类IgA肾病临床病理相似。
- 贺敏敏董晨李俊霞
- 关键词：IGA肾病血尿免疫荧光小鼠
- 罗格列酮对IgA肾病小鼠肾小球核转录因子-κB和活化蛋白-1表达的影响被引量：1
- 2010年
- 目的观察罗格列酮对IgA肾病小鼠肾组织核转录因子-κB(NF-κB)、活化蛋白-1(AP-1)表达的影响,探讨罗格列酮对IgA肾病的作用及其机制。方法昆明种小鼠30只,分为对照组、模型组、罗格列酮组,每组10只。模型组与罗格列酮组复制IgA肾病模型。第12周末收集尿液显微镜下行尿红细胞计数;摘眼球取血,检测血肌酐(Scr)、尿素氮(BUN);光镜下观察肾脏病理损害;免疫荧光法观察系膜区IgA沉积;免疫组化和Western blot法检测NF-κB和AP-I的表达。结果①模型组尿红细胞、血Scr、BUN较罗格列酮组明显增多(P<0.01);②模型组肾小球系膜细胞及基质增生、IgA沉积量较罗格列酮组明显增多(P<0.01);③模型组肾组织NF-κB,AP-1的表达较罗格列酮组与对照组均明显增高(P<0.01)。结论罗格列酮对IgA肾病小鼠肾脏起保护作用,其保护作用可能与下调NF-κB、AP-1的表达有关。
- 关凤军董晨贺敏敏李俊霞
- 关键词：罗格列酮IGA肾病AP-1小鼠
