中国博士后科学基金(2005037488)
- 作品数：2 被引量：4H指数：1
- 相关作者：高磊张新余祖滨白春学祝蓉更多>>
- 相关机构：第三军医大学新桥医院复旦大学更多>>
- 发文基金：上海市科委重大科技攻关项目中国博士后科学基金更多>>
- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 靶向表皮生长因子受体基因的短发夹RNA对肺腺癌A549细胞生长及药物敏感性的影响
- 2007年
- 目的探讨瞬时转染靶向表皮生长因子受体(EGFR)基因的短发夹RNA(shRNA)表达载体对肺腺癌A549细胞生长及药物敏感性的影响。方法构建靶向EGFR的shRNA载体(pShEGFR)和非特异性的shRNA载体(pShNEG),阳离子脂质体将其转染至肺腺癌A549细胞,免疫荧光和Western blot法检测转染后细胞中EGFR蛋白表达变化;克隆形成实验观察细胞生长变化;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;MTI法检测细胞对顺铂、阿霉素、泰素的敏感性。结果与未转染组和pShNEG转染组细胞相比,pShEGFR可显著抑制A549细胞中EGFR蛋白表达,转染后第6天抑制率达74.1%(P<0.01);pShEGFR转染组细胞克隆形成抑制率为62.8%。与未转染组和pShNEG组相比,pShEGFR组细胞阻滞在G_0/G_1期(P<0.01),凋亡细胞比例显著增加(P<0.01);与未转染组相比,pShEGFR可将A549细胞对顺铂、阿霉素、泰素的敏感性分别提高6.7、5.5、6.6倍。结论瞬时转染靶向EGFR基因的shRNA表达载体能够通过下调EGFR蛋白水平抑制肺腺癌A549细胞生长,并提高细胞对不同化疗药物的敏感性。
- 白莉余祖滨祝蓉张新高磊白春学
- 关键词：表皮生长因子
- 靶向EGFR基因的短发夹RNA对A549细胞生长及药物敏感性的影响被引量：4
- 2007年
- 背景与目的:已证实非小细胞肺癌中表皮生长因子受体(epidermal growth factor receptor,EGFR)的过度表达和活化与肿瘤分期、放化疗敏感度下降密切相关。许多阻滞和下调EGFR的方法被用来抑制肿瘤增殖以改善预后,EGFR目前成为公认的肿瘤基因治疗的重要靶点。本研究采用靶向EGFR的短发夹RNA(short hairpinRNA,shRNA)表达重组质粒,观察能否在人肺腺癌细胞株A549细胞中引发RNA干扰(RNAi)效应及其对A549细胞生长及药物敏感性的影响。方法:构建靶向EGFR的shRNA重组质粒(pShEGFR)和非特异性的shRNA重组质粒(pShNEG),阳离子脂质体将其转染至肺腺癌A549细胞分别命名为A549/pShEGFR、A549/pShNEG和对照组A549,免疫荧光和Western blot法检测转染后细胞中EGFR表达变化;克隆形成实验观察细胞生长变化;流式细胞仪检测细胞周期和凋亡;MTT法检测细胞对顺铂、多柔比星、紫杉醇的敏感性。结果:与对照组A549细胞和A549/pShNEG相比,A549/pShEGFR可显著抑制A549细胞中EGFR表达,转染后第6天抑制率达74.1%(P<0.01);A549/pShEGFR组细胞克隆形成抑制率为62.8%。与对照组A549细胞和A549/pShNEG相比,A549/pShEGFR组细胞阻滞在G0/G1期(63.2±1.1,64.5±1.4vs.74.2±0.8;P<0.01),凋亡细胞比例显著增加(5.8±1.4,7.7±1.2vs.25.6±1.2;P<0.01);与A549组相比,A549/pShEGFR可将A549细胞对顺铂、多柔比星、紫杉醇的敏感性分别提高6.7、5.5、6.6倍。结论:瞬时转染靶向EGFR基因的shRNA表达重组质粒能够通过下调EGFR蛋白水平抑制肺腺癌A549细胞生长,并提高细胞对不同化疗药物的敏感性。
- 白莉余祖滨祝蓉张新高磊白春学
- 关键词：表皮生长因子敏感性DDP多柔比星
