国家技术创新计划(1998-345)
- 作品数：2 被引量：26H指数：2
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- 相关领域：医药卫生生物学更多>>
- 荧光定量RT-PCR检测mdr-1基因表达被引量：17
- 2000年
- 目的 :建立荧光定量RT PCR检测肿瘤细胞mdr 1基因表达的方法 ,了解肺癌组织中mdr 1的表达水平。方法 :建立荧光定量RT PCR方法 ,在PE770 0型检测仪上定量检测K5 6 2 /ADM耐药株和K5 6 2不耐药株细胞mdr 1基因表达水平 ,同时检测 45例初治肺部肿瘤病人组织标本。结果 :荧光定量RT PCR检测K5 6 2 /ADM耐药株和K5 6 2不耐药株细胞mdr 1基因表达 ,重复 10次实验所得结果平均分别为 (6 86± 0 6 5 )× 10 7拷贝 /μgRNA和 (8 49± 0 6 7)× 10 5拷贝 /μgRNA ,两者相差 80 8倍 ,变异系数分别为 9 5 %和 7 9%。 45例肺部肿瘤中 ,有 12例检出有mdr 1基因不同程度的表达。结论 :荧光定量RT PCR检测mdr 1基因表达方法 ,检测结果用绝对拷贝数来表示 ,定量准确可靠 ,并有利于标准的统一。有 1/4未经化疗的肺癌病人有一定水平mdr
- 高劲松马刚仝明陈佩毅王传华何蕴韶
- 关键词：荧光定量检测RT-PCRMDR-1基因肺肿瘤
- 用荧光定量PCR方法检测转染细胞中外源基因的拷贝数被引量：9
- 2001年
- 【目的】探讨采用荧光定量PCR技术检测脑源性神经营养因子 (BDNF)基因转染细胞 (PcDNA3 1(+) /BDNF/CHO)中BDNF的拷贝数。【方法】分别以同等质量的PcDNA3 1(+) /BDNF/CHO ,PcDNA3 1(+) /CHO(空载体转染细胞 )及CHO细胞的DNA为模板 ,在PE5 70 0PCR仪上进行荧光定量PCR分析。每个样本共检测 30次 ,结果采用 q检验分析。【结果】PcDNA3 1(+) /BDNF/CHO细胞、PcDNA3 1(+) /CHO和CHO细胞株中BDNF的拷贝数分别为 95 16 4± 12 ,316 2 2± 10 ,316 2 2± 11。q检验结果显示前者与后两者之间有统计学意义 ,P <0 .0 5 ,而后两者之间无统计学意义 ,即 P >0 .0 5。PcDNA 3 1(+) /BDNF/CHO细胞株中BDNF的拷贝数是后二者的 3倍 ,而后两者的拷贝数相同。【结论】BDNF转染细胞株中外源BDNF基因是以 2个拷贝的比例整合到宿主细胞基因组中去的。
- 李影何蕴韶程刚李虎
- 关键词：转染拷贝数基因转染细胞BDNF
