国家自然科学基金(30870903)
- 作品数：24 被引量：66H指数：5
- 相关作者：曾晓荣杨艳谭晓秋李涛李妙龄更多>>
- 相关机构：泸州医学院北京大学泸州医学院附属医院更多>>
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- 心房快速起搏致豚鼠房颤模型建立及心房肌动作电位的改变被引量：4
- 2012年
- 目的:建立一种快速高效的豚鼠急性心房颤动(atrial fibrillation,AF)模型,探讨房颤对心房肌动作电位时程(APD)的影响。方法:高频刺激豚鼠右心房处诱发房颤,记录心电图(ECG)及单相动作电位(MAP)的改变。结果:6只豚鼠共给予Burst刺激70次,以AF诱发时长>1s为模型建立成功。实验共诱发AF成功62次,成功率为88.75%,平均时长为9.860±22.035s。模型建立成功的豚鼠心房率显著增加,由205.184±31.278次/min增加到661.312±251.401次/min(P<0.05)。心房肌APD10、APD20、APD50、APD90及P-P周期长度(CL)在AF发作时显著减小(P<0.05),分别由6.038±4.172ms、13.029±11.003ms、37.193±12.504ms、84.453±24.567ms、300.148±52.020ms减小到3.291±1.906ms、6.451±3.140ms、18.227±12.646ms、51.887±36.137ms、105.414±44.567ms。动作电位幅值由AF前的34.422±10.425mV降至AF时的15.285±7.499mV,显著降低(P<0.05)。结论:经高频刺激右心房方法制作房颤动物模型成功率高、重复性好,并伴有心房肌的电生理改变,是建立急性房颤模型的有效方法。
- 陈唐葶李涛李妙龄刘智飞杨艳曾晓荣
- 关键词：心房颤动动物模型单相动作电位
- Synaptobrevin-2促进心房肌SK2通道转运的机制研究
- 2018年
- 小电导钙激活钾通道亚型2(SK2通道)主要在心房表达,与心房颤动有关.高频刺激模拟心房快速起搏可以增加SK2电流,但是其中的机制并不完全清楚.本研究旨在研究转运调节蛋白Synaptobrevin-2(VAMP2)在调节心房肌细胞膜SK2通道转运过程中的作用.以培养的新生大鼠(Rattus norvegicus)心房肌细胞(NRAMs)和表达有SK2通道的HEK293细胞为研究对象,采用蛋白质印迹、膜片钳、共聚焦显微成像、流式细胞术和全内荧光反射等技术研究VAMP2对SK2通道转运的影响.结果发现,快速起搏可上调VAMP2蛋白和增加SK2通道蛋白在细胞膜上的表达,而敲低VAMP2可降低NRAMs细胞膜上SK2通道蛋白的表达.在HEK293细胞上共表达VAMP2和SK2,增加了SK2的表达,加速了SK2向细胞膜的转运,并通过抑制SK2内吞来稳定SK2通道蛋白在细胞膜上表达.由以上结果可知,VAMP2可能通过促进SK2通道的表达,转运和稳定细胞膜上的表达,参与快速起搏心房肌细胞SK2功能的增强.
- 李涛范学慧余奕言陈琳琳黄文俊杨艳曹济民曾晓荣谭晓秋
- 关键词：SNARES转运心律失常
- 二性霉素B与β-escin混合穿孔电极液在人心房肌细胞SK2电流记录中的应用被引量：4
- 2012年
- 目的:为研究钙离子对人心房肌细胞小电导钙激活钾通道电流(ISK2)的调节作用,建立用二性霉素B(amphotericin B)与β-escin穿孔的膜片钳(PPR)技术。方法:体外循环术中取得右心耳,应用急性酶分离获得单个人体心房肌细胞,用二性霉素B和/或β-escin作为穿孔电极液,进行穿孔膜片钳实验,在此模式下测试钙离子对人心房肌细胞SK2电流的调控作用,并用胞内钙测试系统验证穿孔前后胞内钙变化。结果:混合使用穿孔电极液6.88μg/mlβ-escin和150μg/ml二性霉素B与单独用150μg/ml二性霉素B或6.88μg/mlβ-escin相比,前一种方法细胞容易封接,能形成稳定的穿孔膜片钳记录模式,可观察到SK2电流有激活,且胞内钙测试系统检测时可观察到穿孔后电极液至细胞内的游离钙离子浓度的增加,F340/380增强。结论:适当浓度的二性霉素B与β-escin混合使用进行穿孔膜片钳实验是一种稳定的全细胞膜片的记录技术,可以用于胞内游离钙离子对SK2电流调控的研究。
- 王华李涛雷明李妙龄丁银元杨艳曾晓荣
- 关键词：二性霉素B人心房肌细胞
- 心房颤动患者小电导钙激活钾通道及蛋白激酶C对其调控的研究进展
- 2013年
- 心房颤动（amal fibrillation，AF）是临床上最为常见而复杂的心律失常，容易引起心房内血栓、脑栓塞等严重并发症而导致脑卒中、痴呆和心力衰竭。引起房颤的原因有很多，小电导钙激活钾通道（small conductance calcium-activatedpotassium channels, SK channels）是引起房颤的新的离子通道，由于它具有心房选择性特点，从而作为新的药物治疗靶点。对SK通道的调控可能成为治疗某些疾病的新途径。人类SK通道上存在蛋白激酶C（PKC）磷酸化氨基酸序列，同时PKC参与了体内多种物质的生物合成，是重要的信号传导介质。本文对近年来心房颤动患者小电导钙激活钾通道与PKC对其调控因素的研究进展作一综述。
- 范学慧曾晓荣
- 关键词：心房颤动小电导钙激活钾通道蛋白激酶C
- 人心房肌小电导钙激活钾通道在HEK293细胞上的表达与电生理学特性被引量：1
- 2013年
- 目的:克隆人心房肌小电导钙激活钾通道亚型2(SK2),构建稳定表达SK通道的HEK293细胞系并研究其基本电生理学特性。方法:以人心房肌为标本,通过逆转录,重叠PCR法和定向克隆构建真核表达载体pIRES-hrGFP-SK2,采用脂质体法转染至HEK293细胞并筛选稳定表达的细胞系;使用全细胞和单通道膜片钳技术进行电流记录,研究其基本电生理学特性。结果:全细胞和单通道膜片钳均能在表达的HEK293细胞上记录到SK2通道电流,其电流具有明显的胞内钙离子依赖性。结论:成功构建稳定表达人心房肌SK2通道的HEK293细胞系,为以后研究通道功能活动奠定了基础。
- 谭晓秋陈桂兰李畅李妙龄李涛杨艳井上勋曾晓荣
- 关键词：小电导钙激活钾通道基因转染心房颤动
- An oil-gap method for internal perfusion and voltage clamp of human cardiac cells
- Objective:The activities of many ionic channels were demonstrated to be modulated by the cytoplasmic compositi...
- Lan HuanXu QiangCheng TangtingWang NaYang YanZeng Xiaorong
- ELISA法检测慢性心房颤动患者心房肌SK2通道蛋白水平的表达
- 目的慢性心房颤动（chronic atrial fibrillation,CAF）简称房颤,是临床常见的快速心律失常,尤其多见于风湿性心脏病和冠心病。目前对房颤的发病机制尚未完全明确。本实验用ELISA法比较窦性心律患者...
- 李涛毛亮谭晓秋李妙龄刘智飞杨艳曾晓荣
- 关键词：慢性心房颤动ELISA法心房肌
- 文献传递
- 特发性膜性肾病的免疫抑制疗法的系统综述与meta分析被引量：6
- 2014年
- 目的进行关于表现为肾病综合症的成人特发性膜性肾病的免疫抑制疗法的系统综述与meta分析。方法检索cochrane图书馆、PUBMED、EMBASE、CNKI等数据库,收集关于伴有肾病综合症的特发性膜性肾病的免疫抑制疗法的RCT研究论文。结果免疫抑制疗法能够提高患者完全缓解率与部分缓解率(16项RCT研究,864例患者;1.31[1.01~1.70];P=0.04),但却更容易造成停药与入院治疗(16项RCT研究,880例患者;5.35[2.19~13.02];P=0.002)。皮质类固醇+烷化剂疗法能够显著降低全死因死亡率与终末期肾病发生率(8项RCT研究,448例患者;0.44[0.26~0.75];P=0.002),提高患者完全缓解率与部分缓解率(7项RCT研究,422例患者;1.46[1.13~1.89];P=0.004),但会导致更多不良反应发生(4项RCT研究,303例患者;4.20[1.15~15.32];P=0.03)。环磷酰胺较苯丁酸氮芥安全性更好(3项RCT研究,147例患者;0.48[0.26~0.90];P=0.02)。未发现环磷酰胺与霉酚酸酯优于烷化剂疗法。他克莫司+促肾上腺皮质激素能够显著减少蛋白尿。结论烷化剂+皮质类固醇疗法对于成年人的特发性膜性肾病有着较好的远期及近期疗效,但更易造成患者入院或停药。
- 侯静曹灵刘进陈昕
- 关键词：特发性膜性肾病免疫抑制疗法META分析
- Dihydromyricetin Inhibits hKv1.5 Channel Expressed in HEK 293 Cells
- 4、血液和循环生理学Background:Dihydromyricetin(Dmy)is a derivative of myricetin and a flavonoids.The previous studies r...
- 宾晓红欧贤红王璐珍刘瑞李妙龄杨艳曾晓荣
- 关键词：IKURBLOCKADE
- 文献传递
- 心房肌胞内钙浓度变化对心房颤动患者小电导钙激活钾通道电流的影响被引量：6
- 2014年
- 目的:SK通道存在于心肌细胞上,其中SK2亚型主要表达在心房。SK2通道对胞内游离钙离子高度敏感,可快速将钙离子浓度的变化转换成细胞膜电位变化。本实验应用穿孔膜片钳技术记录人心肌细胞SK2电流,观察心房肌细胞SK2电流在窦性患者和心房颤动患者之间的差别,以及电极液中不同的钙浓度对两组细胞SK2电流的影响。方法:将接受体外循环手术的患者分为两组:心房颤动组和窦性心律组。以心房肌细胞为研究对象,用穿孔膜片钳技术记录人心肌细胞电流,观察窦性组与房颤组SK2通道电流的差异以及两组细胞SK2电流对电极液中钙敏感性的不同。结果:在全细胞穿孔膜片钳模式下,电极液中游离钙离子浓度为5×10-7mol/L时,记录到房颤组SK2通道电流明显大于窦性组,尤其是在超极化水平。膜电位在-130 mV时,窦性组与房颤组的SK2通道电流密度分别为(-2.92±0.35)pA/pF(n=6),(-6.83±0.19)pA/pF(n=3,P<0.05)。在电极液游离钙离子浓度分别为0 mol/L、5×10-7mol/L、10-6mol/L,膜电位为-130 mV时,窦性组SK2通道电流密度分别为(-1.43±0.33)pA/pF(n=7),(-2.92±0.35)pA/pF(n=6),(-10.11±2.15)pA/pF(n=8,P<0.05);房颤组SK2通道电流密度分别为(-2.17±0.40)pA/pF(n=4)(-6.83±0.19)pA/pF(n=3)(-14.47±2.89)pA/pF(n=4)(P<0.05)。结论:人心房肌细胞SK2通道具有电压不敏感、内向整流、apamin敏感的特性。电极液中钙浓度相同的情况下,房颤组的SK2电流密度明显大于窦性组,SK2通道电流对钙离子的敏感性高于窦性组,提示SK2通道钙敏感性增加可能与心房颤动的发生发展密切相关。
- 王华李涛张丽李妙龄杨艳曾晓荣
- 关键词：小电导钙激活钾通道胞内钙心房颤动心房肌细胞
