山西省青年科技研究基金(2007021037)
- 作品数：5 被引量：41H指数：4
- 相关作者：马利平郝变青乔雄梧秦曙王静更多>>
- 相关机构：山西省农业科学院山西大学更多>>
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- 相关领域：农业科学更多>>
- GFP标记对广谱拮抗菌B96-Ⅱ的影响
- 本文研究了绿色荧光蛋白标记对广谱拮抗菌B96-Ⅱ的生长及拮抗功能的影响。结果表明:绿色荧光蛋白标记对菌株的抑菌活性没有影响,对12种植物病原菌仍表现出高效广谱抑菌活性;标记对菌株的生长略有影响,标记后的菌株最大生物量减少...
- 郝变青马利平乔雄梧
- 关键词：绿色荧光蛋白拮抗菌生物防治
- 文献传递
- 芦笋茎枯病的生物防治及机理研究被引量：14
- 2009年
- 利用拮抗芽孢杆菌菌株B96-II对芦笋茎枯病菌进行了室内抑菌试验和田间防治及机理研究,结果表明:B96-II对芦笋茎枯病菌有明显抑制作用。稀释50～1600倍后平皿试验,生长速率抑制率为97.37%～92.98%;离体组织培养对菌斑的抑制率为94.40%;田间防治效果为93.40%。显微观察发现,B96-II处理后可导致菌丝和孢子严重破损,使细胞内容物外渗。处理后24h,菌液电导率(μs·cm-1)和总溶解固体(TDS)比不处理的对照明显提高,处理中B96-II培养液浓度从1%升到10%时,电导率增加量从47.50%提高到518.33%,总溶解固体增加量从176.10%提高到797.60%。经测定,B96-II可抑制病原菌菌丝呼吸,处理中B96-II培养液浓度从1%升到10%时呼吸抑制率从25.00%升至196.40%。生物测定表明,B96-II的主要抑菌物为拮抗蛋白。
- 马利平郝变青秦曙乔雄梧
- 关键词：芦笋茎枯病拮抗菌电导率拮抗蛋白
- 拮抗菌B96-Ⅱ对芦笋枯萎菌的抑菌作用被引量：13
- 2009年
- 为明确拮抗菌B96-Ⅱ对芦笋枯萎菌的抑制效果并探明其抑菌特性及方式,对经B96-Ⅱ处理后芦笋枯萎菌的生长速率、液体电解质、电导率及菌丝重量等进行了测定研究.结果表明,在107～108CFU/mL时,B96-Ⅱ对芦笋枯萎菌均有显著的抑制效果.连续3wk室内观察发现,B96-Ⅱ对芦笋枯萎菌丝有持续的抑制作用,与对照比较抑制率为94.07%～88.98%.田间防治效果为93.40%,而农药多菌灵处理的防治效果仅为65.12%.拮抗菌B96-Ⅱ对芦笋枯萎菌的抑制方式主要为:(1)对孢子形成的抑制作用;(2)对孢子的溶解作用;(3)对菌丝生长的抑制作用;(4)对菌丝的致畸作用;(5)对菌体细胞的破损作用.B96-Ⅱ处理后36h,溶液总溶解性固体和电导率增高,而菌丝重量下降.
- 马利平郝变青王静秦曙乔雄梧
- 关键词：拮抗菌电导率细胞膜
- GFP标记的植物促生菌B96-Ⅱ-gfp的定殖能力研究被引量：13
- 2010年
- 采用绿色荧光蛋白基因标记技术研究了植物促生菌B96-Ⅱ的标记菌B96-Ⅱ-gfp在盆栽黄瓜土壤中的时间、空间定殖动态以及在黄瓜植株上的分布。研究表明:B96-Ⅱ-gfp在土壤中具有持久的定殖能力,接种180d时在自然土和黄瓜枯萎菌病土中的定殖数量分别为2.7×104cfu·g-1和6.6×104cfu·g-1,360d时在土壤中仍可检测到B96-Ⅱ-gfp的存在。B96-Ⅱ-gfp可在盆栽植株生长土壤的表层(0～4cm)、中层(4～8cm)和底层(8～12cm)定殖,定殖数量随土壤深度的增加而增加。此外,B96-Ⅱ-gfp还可在黄瓜的根、茎和叶上定殖,根部定殖的数量(7.2×104cfu·g-1)显著高于茎部和叶部定殖的数量;黄瓜植株体内定殖的数量多于体表定殖的数量。对土壤中可培养的3大微生物类群影响的研究表明:B96-Ⅱ-gfp对土壤中真菌数量具有显著抑制作用,而对细菌和放线菌数量则没有明显影响。防病促生试验表明:B96-Ⅱ-gfp可增加黄瓜株高、鲜重和干重,对黄瓜枯萎病有一定的防治效果,且与未标记菌株B96-Ⅱ的防病促生作用无显著差异。
- 郝变青马利平乔雄梧
- 关键词：植物促生菌绿色荧光蛋白定殖防病促生
- 广谱拮抗菌B96-Ⅱ启动子的克隆研究
- 2009年
- [目的]构建拮抗菌B96-Ⅱ的启动子文库,为B96-Ⅱ的绿色荧光蛋白标记提供试验基础。[方法]提取拮抗菌B96-Ⅱ的基因组DNA,以绿色荧光蛋白基因（gfp）为报告基因,以启动子探针pNW33N-gfp为载体,通过鸟枪法在E.coliDH5α中构建B96-Ⅱ的启动子文库。[结果]通过筛选获得了21个阳性克隆,编号为P1~P21,这些阳性克隆在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光。研究表明,在热激时间为90 s、用4μl酶连产物原液进行转化时,所得转化子数量最多,平均每平皿可得到167个转化子。[结论]表达绿色荧光蛋白的B96-Ⅱ启动子文库的成功构建为拮抗菌B96-Ⅱ的绿色荧光蛋白标记和环境行为研究奠定了良好的基础。
- 郝变青马利平乔雄梧张丽珍
- 关键词：拮抗菌绿色荧光蛋白启动子克隆
- 广谱拮抗菌B96-Ⅱ的分子鉴定及GFP标记被引量：6
- 2009年
- 用PCR方法扩增的广谱拮抗菌B96-Ⅱ的16S rDNA经序列测定和BLAST同源序列比较,结合传统的形态观察、生理生化特征鉴定,确定了B96-Ⅱ分类地位为枯草芽孢杆菌(Bacillus subtilis)。将含有绿色荧光蛋白基因和氯霉素抗性基因标记的大肠杆菌一枯草芽孢杆菌穿梭表达载体(pNW33N-gfp-B96-Ⅱ-N)通过原生质体法转化B96-Ⅱ,获得表达GFP的4株标记菌株,在荧光显微镜下发出明亮的绿色荧光。室内平板抑菌试验结果表明,GFP标记对B96-Ⅱ的广谱抑菌活性没有影响。
- 郝变青马利平乔雄梧
- 关键词：分子鉴定绿色荧光蛋白原生质体转化
