国家自然科学基金(30200310)
- 作品数：10 被引量：26H指数：4
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- 相关机构：广东医学院附属医院四川大学中南大学更多>>
- 发文基金：国家自然科学基金湛江市科技攻关计划项目国家重点基础研究发展计划更多>>
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- 利用基因芯片技术检测不同浓度蔗糖条件下变形链球菌差异表达基因被引量：2
- 2009年
- 目的:利用基因芯片技术筛选不同浓度蔗糖条件下变形链球菌中差异表达的基因。方法:构建变形链球菌基因表达谱检测芯片,利用基因芯片技术筛选不同浓度蔗糖环境中变形链球菌差异表达的基因,以观察不同浓度蔗糖环境对变形链球菌基因表达的影响。结果:0.5%蔗糖环境相对于1.0%蔗糖环境,变形链球菌中有约40种基因表达发生显著变化,其中与变形链球菌毒力、致病性、信号系统、细菌表面成分、脂肪酸和磷脂代谢和DNA复制、重组、修复等相关的23种基因表达显著下调,而糖转运系统和能量代谢等相关的17种基因表达明显上调(P<0.05)。结论:不同浓度蔗糖环境对变形链球菌的调控是多因素、多基因共同作用的结果;基因芯片能有效地筛选不同环境中变形链球菌差异表达的基因。
- 姜颖张铁柱杨锦波刘天佳皮根莉
- 关键词：基因芯片变形链球菌基因表达
- 酸性环境对变形链球菌srtA基因表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的检测酸性环境对变形链球菌初始粘附相关基因srtA表达的影响。方法变形链球菌分别在初始pH为5.5和7.0的条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始粘附相关基因srtA的表达。结果酸性环境中高粘附能力变形链球菌srtA基因表达明显上调,低粘附能力菌株的srtA基因表达也升高但不具有统计学意义;中性环境中高粘附能力菌株srtA基因表达明显高于低粘附能力菌株,而在酸性环境中这种差异无统计学意义。结论酸性环境促进变形链球菌srtA基因表达可能是变形链球菌抵抗酸性环境的机制之一;变形链球菌对牙面的粘附力可能与其srtA表达的量有关。
- 姜颖张铁柱杨锦波刘天佳陈坤贾淑娟
- 关键词：变形链球菌
- 葡萄糖浓度对变形链球菌spaP基因表达的影响被引量：4
- 2008年
- 目的观察不同浓度葡萄糖对变形链球菌初始粘附相关基因spaP表达的影响。方法变形链球菌分别在0.2、1.0、5.0%葡萄糖条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始粘附相关基因spaP的表达情况。结果在0.2%～5.0%葡萄糖浓度范围内,粘附较强的变形链球菌菌株spaP基因的表达随糖浓度的增加而明显增强,粘附较弱的菌株也呈现这样的趋势,但差异不具有统计学意义。粘附较强的变形链球菌菌株其spaP基因的表达总体上高于粘附较弱的菌株。结论在一定浓度范围内(0.2%～5.0%),葡萄糖浓度升高利于变形链球菌spaP基因表达可能是其促进变形链球菌初始粘附的机制之一;变形链球菌对牙面的粘附力可能与其spaP表达量有关。
- 姜颖张铁柱杨锦波刘天佳陈坤
- 关键词：变形链球菌
- 蔗糖浓度对变形链球菌wapA基因表达的影响被引量：1
- 2009年
- 目的:观察不同浓度蔗糖环境对变形链球菌粘附相关基因wapA表达的影响。方法:变形链球菌分别在0.5%、1%、5%蔗糖条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌粘附相关基因wapA的表达。结果:不同浓度蔗糖条件下变形链球菌wapA基因表达的变化不具有统计学意义;0.5%和5%蔗糖条件下,粘附较强的菌株其wapA基因的表达明显高于粘附较弱的菌株。结论:蔗糖量的增加对变形链球菌wapA基因表达的影响不大;wapA基因表达的量可能与变形链球菌的蔗糖依赖性粘附呈正相关关系。
- 姜颖张铁柱杨锦波刘天佳兰青
- 关键词：变形链球菌
- 酸性环境对变形链球菌黏附力的影响被引量：7
- 2008年
- 目的研究酸性环境对变形链球菌黏附能力的影响。方法课题组前期获得的变形链球菌(血清C型)临床分离株20株及参考株UA159。用唾液包被的羟磷灰石(saliva coated hydroxyapatite,SHA)模拟口腔中牙面情况。各菌株分别在含3H并且初始pH分别为5.5和7.0的1%葡萄糖TPY液体培养基中培养,然后配成细菌悬液。菌悬液与SHA作用90min,清洗、吸干,液体闪烁计数法检测各样本中黏附于SHA的细菌量。黏附量以每分钟闪烁计数值(CPM)表示。结果pH5.5与pH7.0组变形链球菌对SHA的黏附量分别为469.4333±272.6408和3447.343±2837.8149,P<0.05。结论酸性环境抑制变形链球菌的黏附力。
- 姜颖张铁柱杨锦波刘天佳陈坤
- 关键词：变形链球菌龋病
- Notch信号对视网膜前体细胞分化的作用被引量：2
- 2009年
- 目的:观察Notch信号对体外培养的SD大鼠视网膜前体细胞分化的影响。方法:从胎龄16d的SD大鼠分离视网膜神经上皮,采用悬浮法培养视网膜前体细胞。实验分Notch信号抑制组和对照组两组。第14天行免疫细胞化学法分析细胞类型、Notch信号的表达及变化。结果:视网膜前体细胞大部分表达Notch1胞内段及其下游转录因子Hes1,少量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mash1;自发分化后大量细胞表达bHLH转录因子NeuroD和Mash1,少量细胞表达Notch1胞内段和Hes1。Notch信号抑制组Nestin,GFAP阳性率显著低于对照组,β-tubulin阳性率显著高于对照组,而Recoverin阳性率与对照组差异无统计学意义。结论:Notch1信号在体外可能参与了对视网膜前体细胞分化的抑制,抑制Notch信号可部分促进视网膜前体细胞向神经元分化,同时抑制了神经胶质细胞的分化。
- 张锟卢光琇高玲唐罗生王建王涛胡蓉
- 关键词：前体细胞NOTCHBHLH
- RAS相关区域家族1A和死亡相关蛋白激酶基因启动子在视网膜母细胞瘤中的甲基化状态被引量：4
- 2009年
- 目的研究肿瘤抑制基因RAS相关区域家族1A（RASSFIA）和死亡相关蛋白激酶（DAPK）基因启动子在视网膜母细胞瘤（RB）组织和外周血的甲基化状态。方法对RB石蜡组织切片进行实验研究，对RB患者和正常人进行病例对照研究，应用甲基化特异性聚合酶链式反应技术检测28例RB组织、9例RB患者外周血中RASSF1A和DAPK基因启动子的甲基化状态，分别收集年龄、性别相匹配的5例角膜捐赠者死亡后获取的正常视网膜、5例健康志愿者的血清作为对照，采用Fisher确切概率法比较两组间甲基化率的差异。结果RB组织中RASSFIA基因启动子的甲基化率为60．7％（17／28），高于正常人视网膜组织0％（0／5）或瘤旁组织17．9％（5／28），差异有统计学意义（P〈0．01），且单侧RB组织的甲基化率（72．7％）高于双侧（16．7％）。另外在2例（2／9）RB患者外周血中检测到RASSFIA基因启动子的高甲基化。而DAPK基因启动子在RB组织及患者外周血中均未发生甲基化。结论RASSFIA基因启动子高甲基化是RB中一种常见频发的表观遗传修饰。
- 刘茹高玲卢光琇唐罗生朱小华王建
- 关键词：视网膜母细胞瘤肿瘤抑制蛋白质类凋亡调节蛋白质类
- 胎儿视网膜前体细胞的分离培养
- 2007年
- 目的建立视网膜前体细胞的培养方法。方法分离8～12周流产胎儿的视网膜神经上皮细胞，采用悬浮和贴壁两种方法分别进行培养和传代，取传代细胞用含5%胎牛血清的、无碱性成纤维细胞生长因子（bFGF）的培养基诱导分化培养14d，并采用免疫荧光法检测培养细胞诱导分化前后前体细胞和视网膜终末细胞标记物表达的改变。结果悬浮培养的细胞形成神经球并表达神经干细胞的标记物巢蛋白nestin，但无法成功传代扩增；贴壁培养的细胞可连续传代并表达nestin，传代细胞诱导分化后表达视网膜终末细胞的标记物胶质原纤维酸性蛋白（GFAP）、β微管蛋白（β-tubulin）和恢复蛋白recoverin。结论从8～12周的人胚胎视网膜神经上皮分离培养的视网膜前体细胞具有体外扩增和多分化潜能。
- 胡蓉卢光琇高玲唐罗生朱晓华姜德咏林戈
- 大鼠胚胎视网膜干细胞的分离培养被引量：4
- 2006年
- 目的分离培养大鼠胚胎视网膜干细胞。方法从胎龄第16d的SD大鼠视网膜神经上皮分离视网膜细胞并进行悬浮培养,观察细胞增殖以及自发分化情况,采用免疫细胞化学方法检测Nestin、β-Tubulin、GFAP和Recoverin的表达。结果原代细胞可形成悬浮生长的神经球,传代后能形成新的细胞球。原代及传代细胞大部分表达神经干细胞标记物Nestin,分化后的细胞部分表达神经元标记物β-Tubulin或神经胶质细胞标记物GFAP,少数细胞表达光感受器细胞标记物Recoverin。结论分离培养的SD胚鼠视网膜神经干细胞可以在体外扩增并具有多分化潜能。
- 张锟卢光琇高玲唐罗生王建王涛胡蓉
- 关键词：视网膜干细胞细胞培养视网膜
- 酸性环境对变形链球菌spaP基因表达的影响被引量：5
- 2008年
- 目的:观察酸性环境对变形链球菌初始黏附相关基因spaP表达的影响。方法:变形链球菌分别在初始pH为5.5和7.0的条件下培养,提取总RNA,逆转录成cDNA,利用TaqMan实时荧光定量PCR技术检测不同环境条件下变形链球菌初始黏附相关基因spaP的表达。结果:pH5.5的酸性环境中变形链球菌spaP基因表达显著下调(P
- 姜颖张铁柱杨锦波刘天佳王君
- 关键词：变形链球菌
