国家自然科学基金(81270768)
- 作品数：3 被引量：9H指数：2
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- 相关机构：空军军医大学第四军医大学更多>>
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- KLF-4靶向调控E-cadherin表达对高糖腹膜透析液诱导的大鼠腹膜纤维化的影响被引量：2
- 2020年
- 目的探索Kruppel样因子4(KLF-4)与E-钙黏素(E-cadherin)在人腹膜间皮细胞(HPMCs)中的关系,以及二者在高糖腹膜透析液诱导的腹膜纤维化动物模型中的表达及作用。方法在HPMCs中共转染KLF-4及E-cadherin启动子区域结合位点或其突变体质粒,利用试剂盒检测各结合位点及其匹配的突变体的荧光素酶活性,判断KLF-4是否可与E-cadherin启动子区域结合位点相结合;采用染色质免疫共沉淀实验(CHIP)检测KLF-4是否可与E-cadherin启动子区域结合位点相结合;采用Real-time PCR及Western blotting检测b、d、f、g结合位点及其匹配突变体E-cadherin的表达。将30只SD大鼠随机均分为盐水组、腹膜透析液组及实验组,每组10只。盐水组腹腔内注射0.9%NaCl溶液,腹膜透析液组腹腔内注射4.25%高糖腹膜透析液,实验组腹腔内注射4.25%高糖腹膜透析液并经尾静脉注射含有超声微泡的KLF-4质粒混悬液。采用HE染色观察3组大鼠腹膜组织的厚度,Masson染色观察3组大鼠腹膜组织中胶原纤维的沉积情况,免疫组织化学染色观察3组大鼠腹膜组织中KLF-4、E-cadherin、α-平滑肌肌动蛋白(α-SMA)及纤维连接蛋白(FN)的表达水平。结果启动子荧光素酶报告基因及CHIP检测结果显示,KLF-4可以与HPMCs中E-cadherin启动子区域的结合位点相结合。Real-time PCR及Western blotting结果显示,KLF-4可正向调控E-cadherin的表达。HE染色结果显示,腹膜透析液组大鼠的腹膜组织厚度[(105.91±12.0)μm]明显大于盐水组[(20.89±5.39)μm]及实验组[(23.05±6.07)μm],差异有统计学意义(P<0.05),而盐水组与实验组差异无统计学意义(P>0.05)。Masson染色结果显示,腹膜透析液组的胶原纤维沉积(0.89±0.09)明显高于盐水组(0.19±0.03)及实验组(0.15±0.06),差异有统计学意义(P<0.05),而盐水组与实验组差异无统计学意义(P>0.05)。免疫组织化学染色结果显示,腹膜透析液组的KLF-4(0.27±0.09)及E-cadherin(0.31±0.03)�
- 车明文徐国顺龚杜景子赵建乐李晶陈亚蓉蒋希马兴杰何丽洁
- 关键词：人腹膜间皮细胞E-钙黏素腹膜纤维化
- NLRP1炎性体促进高糖高胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡被引量：5
- 2018年
- 目的研究含pyrin结构域NOD样受体家族1(NLRP1)炎性体对高糖高胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡(pyroptosis)的调控作用。方法将培养的人肾小球系膜细胞(HRMC)分为4.5 mg/m L葡萄糖处理的高糖组和10μg/m L胰岛素处理的高胰岛素组,分别处理0、12、24、48、72、96 h。在各时间点,采用MTT法检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞焦亡,实时定量PCR检测HRMC的NLRP1、白细胞介素1β前体(pro-IL-1β)、肿瘤坏死因子α(TNF-α)和胱天蛋白酶1前体(pro-caspase-1)的mRNA水平,Western blot法检测NLRP1、IL-1β、TNF-α、caspase-1的蛋白水平;高糖高胰岛素培养的HRMC中转染NLRP1小干涉RNA(si NLRP1),采用以上方法检测上述指标的变化情况。结果高糖高胰岛素处理48 h后,HRMC增殖能力下降、焦亡细胞数目显著增加,NLRP1、pro-IL-1β、TNF-α和pro-caspase-1 mRNA和NLRP1、IL-1β、TNF-α和caspase-1蛋白水平均显著增加;si NLRP1下调HRMC中NLRP1水平后,高糖高胰岛素培养的HRMC细胞焦亡减少,IL-1β、TNF-α和caspase-1表达显著降低。结论高糖高胰岛素处理促进NLRP1的激活从而增加肾小球系膜细胞焦亡和炎症反应,下调NLRP1的表达可抑制高糖高胰岛素诱导的肾小球系膜细胞焦亡和炎症反应。
- 于艳何丽洁王汉民
- IgAN分子标记物的研究新进展表达及临床意义被引量：2
- 2017年
- 慢性肾脏病（chronic kidney disease,CKD）已成为全球性公共健康问题,包括一系列原发性和继发性肾小球肾炎,IgA肾病（immunoglobulinA nephropathy,IgA N）是目前我国最常见的原发性肾小球疾病,以IgA沉积在肾小球系膜区为特征的临床综合症。其临床表现差异较大,呈进行性发展,以血尿和（或）蛋白尿为主,同时伴不同程度的高血压和肾功能减退,任何年龄段均可发病,尤以青年多见。
- 冯宁王汉民何丽洁郝彤
- 关键词：分子标记物IGAN肾小球系膜肾间质纤维化肾小球滤过率疾病模型
